Микроскопировать с масляной иммерсией готовые микропрепараты различных видов стрептококков (S.pyogenes, S.pneumoniae), описать морфологические и тинкториальные свойства, зарисовать

S.pyogenes в мазках, окрашенных по Граму представлены неподвижными сферическими или слегка вытянутыми кокками размером 0,5-2,0 мкм, располагающиеся парами или короткими цепочками (от греч. streptos — цепочка и kokkos — ягода); грамположительны.

Пневмококки (S.pneumoniae) представлены неподвижными овальными или ланцетовидными кокками диаметром около 1 мкм. В мазках из клинического материала располагаются парами, окруженными толстой капсулой.

Произвести учёт реакции, поставленной на определение антител к О-стрептолизину в диагностике ревматизма.

Реакция основана на подавлении (нейтрализации) антителами сыворотки крови способности О-стрептолизина вызывать гемолиз. Реакцию ставят со стандартным сухим О-стрептолизином. Компоненты реакции: 1. Исследуемая сыворотка

2. О-стрептолизин

3. 5% взвесь эритроцитов

4. фосфатный буфер

Для постановки реакции исследуемую сыворотку прогревают при 56°С в течение 30 минут и разводят фосфатным буфером 1:50, 1:250, 1:1000. Диагностический препарат О-стрептолизина также разводят буфером и применяют в количестве 0,3 мл, в котором содержится 1 рабочая доза О-стрептолизина. Рабочая доза — это количество О-стрептолизина, которое почти полностью нейтрализуется половиной международной единицы анти-О-стрептолизина стандарта ГИСК. О-стрептолизин в рабочей дозе должен вызывать полный лизис 0,2 мл 5% взвеси эритроцитов. Разведенную сыворотку и другие ингредиенты разливают по пробиркам согласно таблице №5 инкубируют. После инкубации отмечают последнюю пробирку, в которой сыворотка еще нейтрализует рабочую дозу О-стрептолизина (гемолиз отсутствует).

 

Таблица 5. Схема постановки антистрептолизиновой реакции с О-стрептолизином

Ингредиент	Количество материала (мл)
Номера пробирок												Контроль
Исследуемая сыворотка 1:50	0,4	0,2	0,15	0,1	-	-	-	-	-	-	-	--
Исследуемая сыворотка 1:250	-	-	-	-	0,4	0,3	0,25	0,2	0,1	-	-	--
Исследуемая сыворотка 1:1000	-	-	-	-	-	-	-	-	-	0,25	0,1	--
Фосфатный буфер, мл	0,1	0,3	0,35	0,4	0,1	0,2	0,25	0,3	0,4	0,25	0,25	0,8 0,5
Стрептолизин О, мл	По 1 мл в каждую пробирку, инкубация 45 мин при 37º С	— 0,3
5% взвесь эритроцитов, мл	По 0,2 мл в каждую пробирку, инкубация 1 ч при 37º С	— -
Число АЕ St-О в 1 мл в международных единицах												--

 

Титр сыворотки выражают числом единиц анти-О-стрептолизина (AE St-O) в 1 мл (указаны на демонстрационных пробирках). Титр анти-О-стрептолизина до 250 AE St-O обнаруживается у практически здоровых людей. При ревматическом процессе с первых дней болезни антитела выявляют в высоких титрах — 500 AE St-O и выше.

Решение ситуационных задач

 

Модуль II «Стафилококковые и стрептококковые инфекции. Инфекции,
вызываемые спорообразующими и неспорообразующими анаэробами»

Занятие № 2

ТЕМА: Микробиологическая диагностика инфекций, вызываемых спорообразующими и неспорообразующими анаэробами

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ знать: классификацию и таксономию, морфологические, тинкториальные, культуральные, антигенные, биохимические свойства, факторы патогенности, особенности культивирования возбудителей газовой гангрены, столбняка; ботулизма; эпидемиологию, патогенез, микробиологическую диагностику и биопрепараты для этиотропного лечения и специфической профилактики газовой гангрены, столбняка, ботулизма; основные биологические свойства бактероидов, порфиромонад, превотелл, фузобактерий, вейлонелл, пептококков, пептострептококков; микробиологическую диагностику; методы профилактики и терапии

уметь: приготавливать мазки из раневого отделяемого, окрашивать их по Граму и Ожешко, микроскопировать с масляной иммерсией, определять морфологические и тинкториальные свойства анаэробов, учитывать реакцию нейтрализации с учётом на белых мышах, идентифицировать чистые культуры неспорообразующих анаэробов с помощью API-систем

Задание на дом

1. Вопросы для самоподготовки:

1) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики газовой анаэробной инфекции

2) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики столбняка

3) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики ботулизма

4) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики инфекций, вызываемых неспорообразующими анаэробами: бактероидами, порфиромонадами, превотеллами, фузобактериями, вейлонеллами, пептококками и пептострептококками