ПМ 05: Проведение лабораторных гистологических исследований

Специальность: 060604 Лабораторная диагностика

Составлено в соответствии с Государственными требованиями к минимуму содержания и уровню подготовки выпускников по специальности: 060604 Лабораторная диагностика

Общая редакция: Кочерыжкина Н.А. – преподаватель высшей квалификационной категории ГОУ СПО МУ №4

АЛГОРИТМЫ ДЕЙСТВИЙ СТУДЕНТОВ

ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАДАНИЙ

ПМ 05: Проведение лабораторных гистологических исследований

1. Подготовка посуды и предметных стекол к работе

2. Приготовление фиксаторов

3. Фиксация материала

4. Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)

5. Обезвоживание, уплотнение и заливка материала в парафин

6. Приготовление спиртов различной концентрации»

7. Разведение спиртов

8. Приготовление гистологических срезов

9. Устранение артефактов приготовления гистологических срезов

10. Уход за микротомом и микротомными ножами

11. Монтировка срезов на стекло

12. Приготовление адгезивной среды

13. Депарафинирование гистологических срезов (подготовка срезов к окраске)

14. Приготовление красящих растворов

15. Окраска гистологических препаратов

16. Обезвоживание и просветление препаратов

17. Заключение препаратов

18. Обработка материала при срочной операционной биопсии

19. Микроскопирование препаратов

 

Подготовка посуды и предметных стекол к работе

Оснащение: раковина с проточной водой, эмалированная посуда для замачивания и кипячения стекол, электрическая плита, вытяжной шкаф, эксикаторы, банкас широким горлом, пинцет, хлопчатобумажные салфетки, картонные коробки.

Реактивы: 2-3% раствор гидрокарбоната натрия, раствор моющего средства, смесь Никифорова,

Алгоритм действий:

- Сложить стекла в эмалированную посуду и замочить в теплой мыльной воде

- Прокипятить стекла в 2-3% растворе гидрокарбоната натрия

- Промыть в проточной воде в течение нескольких часов

- Протереть чистой хлопчатобумажной тканью

- Поместить в смесь Никифорова на несколько дней.

- Пинцетом извлечь стекла из смеси Никифорова

- Протереть чистой тканью

- Проверить качество обезжиривания: капнув на предметное стекло воду из пипетки: по обезжиренному стеклу вода растекается тонким слоем, а не собирается в каплю.

- Сложить в коробку

 

Приготовление фиксаторов»

Приготовление 10% раствора формалина

Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой

Реактивы: 1 л40% формальдегида, 100 гкарбоната кальция или магния.

Алгоритм действий:

- На дно широкогорлой банки насыпать 100г карбоната кальция или магния

- Добавить 1 л 40% формальдегида

- Перемешать и оставить на сутки

- Полученный нейтральный формалин разбавить водопроводной водой в соотношении 1:10

Приготовление раствора Карнуа

Оснащение: вытяжной шкаф, банкас широким горломи притертой пробкой,мерный цилиндр, пипетки

Реактивы: спирт 100%, хлороформ, ледяная уксусная кислота.

Алгоритм действий:

- В приготовленную емкость последовательно отмерить и добавить:

o 60мл 100% спирта

o 30 мл хлороформа

o 10мл ледяной уксусной кислоты

- Перемешать

- Использоватьфиксатор следует сразу после приготовления.

Фиксация материала»

Вариант 1. С использованием гистологических кассет

Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, гистологические кассеты, плотная бумага, простой карандаш

Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина

Алгоритм действий:

	ХХХ ХХХ
- Вырезанный кусочек материала поместить в кассету	- Подготовить бумажную этикетку. - простым карандашом написать порядковый номер, под которым материал зарегистри-рован в журнале	- Этикетку поместить в кассету

 

- Закрыть кассету (при этом должен раздаться щелчок).

- Поместите кассету с материалом в емкостьшироким горлом

- Добавьте фиксатор в объеме в 10-20 раз превышающем объем фиксируемого материала

- Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.

- Закрыть емкость крышкой и оставить под вытяжкой на время, необходимое для фиксации.

Вариант 2.

Оснащение: вытяжной шкаф, емкость с широким горлом, марлевые салфетки, плотная бумага, простой карандаш

Реактивы: 10% раствор нейтрального формалина

Алгоритм действий:

- Налить фиксатор в подготовленную емкость

- Подготовить марлевую салфетку

- Подготовить бумажную этикетку: простым карандашом написать на ней порядковый номер, под которым материал зарегистрирован в журнале.

- Положить этикетку в центр салфетки надписью вниз

- Поместить на салфетку вырезанные кусочки материала

- Завязать салфетку

- Поместить материал в сосуд с фиксатором

- Если цвет фиксатора изменился после погружения в него кусочков ткани, необходимо немедленно сменить фиксатор.

- Закрыть емкость крышкой и оставить материал в вытяжном шкафу до конца фиксации

 

4. «Промывание материала для удаления фиксатора (формалина)»

Оснащение: раковина с проточной водой, банкас широким горлом, отводная трубка, марлевая салфетка

Алгоритм действий:

- Материал поместить в стеклянную банку

- Вставить резиновую отводную трубку

- Обвязать горлышко банки марлей

- Поместить банку в раковину, отрегулировать напор воды и оставить на 24-48 часов