Демографические данные о дооперационном пациенте

Субъекты варьировались в возрасте от 57 до 75 лет, в среднем в возрасте 69 лет. Соотношение мужских и женских участников исследования составляло 1: 1. У всех испытуемых была ХОБЛ на конечной стадии, а 25% были включены в список пересадки легких в их родном состоянии. Все, кроме одного предмета, узнали об этом испытании через Интернет; Один субъект узнал о своем существовании через другого субъекта, который участвовал ранее. Курение было основным фактором, влияющим на окружающую среду для ХОБЛ в этой популяции, в которой участвовали 20-100 лет истории болезни от общего количества курения. Ни один из субъектов, допущенных к продолжению или текущему употреблению табака. Почти все пациенты находились на терапевтическом кислороде (чаще всего 2 л / мин), а 75% имели, по крайней мере, один прием госпиталя для респираторной декомпенсации в течение последних 12 месяцев. Большинство испытуемых консультировались с врачами первичной медико-санитарной помощи и специальными врачами до поступления в суд. В целом врачи первичной медико-санитарной помощи были равнодушны или поддерживали, в то время как пульмонологи были равнодушны или отрицательны по их мнению относительно решения участвовать в судебном процессе.

Уборка / инфузия / немедленная послеоперационная безопасность

Во время процедуры липосакции было удалено 120 мл жировой ткани. Нуклеированные клетки перечисляли вручную, и в этих подсчетах было обнаружено в среднем 187 миллионов клеток для инфузии с диапазоном от 132 до 237 миллионов общих клеток с выходом 0,9 - 1,9 миллиона зародышевых клеток / мл. Как видно из таблицы 1, у двух испытуемых страдали боли во время процедуры, и у одного была инфильтрационная травма руки. Остальные испытуемые описали удобную и беспрецедентную процедуру экстракции и инфузии.

Таблица 1

Демографические данные участника исследования

Воз р а с т	секс	Метод поиска	Вклад местного врача в участие в исследовании	Курение (PYH)	Инфузионн ые побочн ые эффекты	Предварительно ASC-кислород	Госпиталиац ия до ASC
	M	интернет	Пульмонолог: безразличный		Никто		1 больница, ER 6 - 8 недель до
	M	интернет	Пульмонолог: поддерживающий		Никто
	F	интернет	Врачи безразличны		Никто		ежемесячно
	F	интернет	Интернист: поддерживающий; Пульмонолог: рекомендуется против		Никто		Би-раз в год
	M	интернет	Пульмонолог: безразличный		Липосакция болезненная, IV инфильтрация: начался новый IV		1 ER
	F	интернет	Интернист: поддерживающий; Пульмонолог / кардиолог против		Никто		нет
	F	интернет	Пульмонолог: рекомендуется против		Никто		нет
	F	интернет	Врач безразличен		Никто		1 ER
	M	интернет	Не консультировался с врачом		Никто		1 ER
	F	интернет	Кайзерский врач был «оскорблен», что пациент будет рассматривать не одобренную терапию		Никто		да
	M	интернет	Пульмонолог: сомневается в подходе, но не советовал участвовать		Липосакция болезненная		да
	M	Другой участник исследования	Интернист: против подхода	Маленький, воздействие окружающей среды	Никто	2.5	нет

PYH: история за год; ASCs: жировые стволовые клетки; ER: отделение неотложной помощи.

 

Участников исследования внимательно наблюдали во время и сразу после инфузии клеток, чтобы проверить безопасность процедуры, уделяя особое внимание сердечной и легочной системам. Никакие побочные эффекты, включая случаи анафилаксии, аномалии электрокардиограммы, нарушения ритма (включая брадикардию или тахикардию), десатурацию кислорода, лихорадку (температура> 38,6 ° C) или субъективные ощущения дискомфорта, отмечались в сочетании с инфузией.

Долгосрочная безопасность

Тесный контакт с субъектами в течение периода исследования позволил измерить отношения и восприятие лечения на процессе болезни. В таблице 2 приведены демографические данные и инфляция после инфузии. Во время сборки данных в течение 18 месяцев наблюдались предметы в среднем от 12 до 28 месяцев, прошедшие до интервью, проведенного исследовательской группой независимо от группы лечения. Когда были заданы вопросы об субъективном эффекте и временном курсе любых отмеченных эффектов, три заявили, что никакого эффекта от лечения не было, четыре отметили субъективное чувство пользы в течение дня, а пять отметили постепенное улучшение, причем максимальное улучшение отмечено примерно на 1 Месяц после инфузии. Три из респондентов описали потерю первоначальной предполагаемой выгоды, имевшей место от 1 до 3 месяцев. Остальные шесть из этих девяти субъектов все еще подтвердили положительное влияние на их воспринимаемое качество жизни на 12-18 месяцев. Все испытуемые, кроме одного, указали, что они будут готовы участвовать в исследовании и снова проходить процедуры.

 

Изучение участников Восприятие эффекта лечения, время максимального эффекта, потеря эффекта, перспективы повторного инфузии и ненаправленные комментарии

Возраст	секс	Курение (PY)	Время после инфузии при независимом интервью (месяцы)	Время до оптимального субъективного эффекта	Временной ход общего эффекта	Снижение эффекта во времени	Сделайте это снова?	Другие отмеченные замечания и эффекты (неориентированные)
	M			1 день	Постоянно улучшаться	нет	да	Летаргия, потеря памяти, бледность ушла, артрит ушел на 2 месяца, улучшился актинический кератоз, увеличенный секс-драйв, лучший слух, упражнения
	M			1 месяц	Постоянно улучшаться	нет	да	Звучит и выглядит лучше
	F			1 месяц	Постоянно улучшаться	нет	да	Продвинутый преднизон
	F			1 месяц	3 месяца	да	Нет (да, если это бесплатно)	Выглядит лучше, никакого кашля, никакого бронхита
	M			Никто	Никто	да	Нет (да, если это бесплатно)	Ухудшается
	F			1 месяц	Постоянно улучшаться	нет	Нет (да, если это бесплатно)	Чувствует себя сильнее и не получает URI, но не зависит от кислорода, что и ожидалось
	F			Никто	Никто	да	да	Щитовидная железа лучше; Пульмонолог уменьшает количество щитовидной железы
	F			1 день	3 месяца	да	да	15-20% увеличение возможностей дыхания изначально, теперь базового уровня; RLL-злокачественность, обнаруженная после лечения; Кашель лучше, так как лечение
	M			1 месяц	Постепенно ухудшается после первого месяца	да	Нет (да, если это бесплатно)	Легкое потребление кислорода, но никакой разницы
	F	20 (выход 2009)		немедленно	1 месяц	нет	да	Также были похожие вливания (3) в другое (США) средство. Отметил, что утомляемость уменьшилась и послеоперационное выздоровление улучшилось.
	M			Никто	Никто	Никто	нет	В программе UCLA по трансплантации легких
	M	Маленький, но сварщик, так что воздействие окружающей среды		1 день	Постоянно улучшаться	нет	Да, если бы он мог получить без поездки	Меньше панических атак из-за SOB, жена заметила, что пациент был менее смущен и имел меньше других медицинских проблем; Все еще на кислороде

PY: пакеты в год; ИМП: инфекция мочевыводящих путей; RLL: правая нижняя доля; SOB: одышка.

Несколько участников отметили снижение частоты использования кислорода через 12 месяцев. Из субъектов, которые описали положительные эффекты от инфузий SVF, они часто включали субъективное общее ощущение хорошего самочувствия. Многие субъекты описали общее улучшение их субъективного уровня активности и внешнего вида, с несколькими комментариями об уменьшении актинических кератозов, уменьшением бледности и повышенной энергией или выносливостью.

SGRQ продемонстрировал статистически значимые улучшения как через 3, так и через 6 месяцев после лечения. SGRQ на базовом уровне (n = 12) составляла 73. Показатель качества жизни испытуемых улучшился до 45 через 3 месяца после лечения (n = 10, P = 0,005) и 44 через 6 месяцев после лечения (n = 7, P = 0,008),

Идти к:

Обсуждение

В этом исследовании было проведено клиническое исследование фазы I аутологичной инфузии СВФ у пациентов с ХОБЛ с нерандомизированной конструкцией обработки открытых меток с целью получения ранних данных о первичных конечных точках осуществимости и безопасности, а также для получения Любые ранние доказательства эффективности. Оценка безопасности основывалась на компиляции наблюдений, сделанных во время инфузии СВФ, а также на данных телефонного интервью, полученных четким набором сотрудничающих исследователей, которые не участвовали в первоначальном оформлении протокола, ни при наборе или лечении предметов, Этот метод сотрудничества с участием независимых интервьюеров был использован для усиления данных, полученных в процессе телефонного интервью, Который включал вопросы, представленные последовательным образом исследователями, лишенными экономических отношений либо с лечебным центром, либо с врачами, участвующими в исследовании. Учитывая, что в пробном проекте участвовали пациенты, путешествующие из США в страны с суверенными регулирующими юрисдикциями, было сочтено полезным предоставить эту дополнительную вторичную валидацию.

ХОБЛ является прогрессивно дегенеративным состоянием, связанным с продолжающимся воспалением, альвеолярным разрушением и возможной смертью пациента. На сегодняшний день, за исключением трансплантации легких, лечение симптоматично и паллиативно. Качество жизни и отсутствие прогресса требуют этического исследования новых подходов. К сожалению, оценка терапии стволовыми клетками при ХОБЛ отставала от других областей регенеративного исследования, и только одно клиническое исследование опубликовано до настоящего времени [ 6 ].

Основной причиной ХОБЛ является воспалительное и / или иммунологически опосредованное [ 15 ] разрушение альвеолярной ткани, связанное с реактивностью Т-клеток [ 16, 17 ], патологическая активация легочного макрофага [ 18 ] и производство авто-антител [ 19 ]. Исследование SVF как потенциального терапевтического подхода к ХОБЛ предлагается по содержанию как мезенхимальных стволовых клеток, так и Т-регуляторных клеток, оба из которых могут быть очищены в высоких концентрациях из сосудистой ткани жировой стромы вместе с высокими концентрациями Т-регуляторных клеток [ 20 ]. Было продемонстрировано, что мезенхимальные стволовые клетки сильно подавляют аутореактивные Т-клетки [ 21 ], Ингибируют активацию макрофагов [ 22 ] и ответы аутоантител [ 23 ]. Т-регуляторные клетки, полученные из жировой ткани, были показаны на животных моделях примерно на 100 более сильных, чем периферические Т-клетки, при секретировании цитокинов, терапевтических для ХОБЛ, таких как ИЛ-10 [ 24, 25 ]. Использование SVF, включающее оба типа клеток, дало многообещающие клинические результаты в аутоиммунных состояниях, таких как рассеянный склероз [ 13 ]. Было продемонстрировано, что введение BM-MSC в новорожденные поврежденные кислородом легкие, которые проявляют ХОБЛ-подобную альвеолярную дисплазию, дает улучшения в животной модели [ 26, 27 ]. К тому же,

Пластические хирурги использовали аутологичную трансплантацию жира в качестве объемного наполнителя в течение десятилетий. Интересно отметить, что ранние наблюдения показали, что компоненты аутологичного липоаспирата содержат регенеративную фракцию. Действительно, первые формальные исследования о моноядерном компоненте липоаспирата были зарегистрированы Холенбергом и Востом в 1968 году, которые идентифицировали СВФ как пролиферативный компонент жировой ткани [ 28 ]. Клетки, содержащие SVF, морфологически напоминают фибробласты и, как было продемонстрировано, дифференцируются в предадипоциты и функциональную жировую ткань in vitro [ 29, 30 ]. Хотя было высказано предположение о том, что неадипозная дифференциация СВФ может происходить в особых условиях [ 31 ], Понятие «жироподобных стволовых клеток» не было широко признано до семенной работы в 2001 году, в которой Zuk и др. Продемонстрировали, что SVF содержит большое количество мезенхимальных стволовых клеток, которые могут быть индуцированы для дифференциации на адипогенные, хондрогенные, миогенные и Остеогенными линиями [ 32 ]. Следуя этому первоначальному описанию, одна и та же группа сообщила, что после экспансии in vitro у АВС-полученного ASC был фенотип поверхностного маркера, аналогичный BM-MSC, включая присутствие CD29, CD44, CD71, CD90, CD105 / SH2 и SH3 и Отсутствие CD31, CD34 и CD45 экспрессии [ 33 ]. С этих начальных исследований было проведено множество клинических испытаний с использованием клеток SVF. Например, Использование очищенных клеток SVF было выполнено в хирургии увеличения груди, чтобы повысить эффективность трансплантации жира. Йошимура и др. Разработали процедуру, называемую «липотрансфером с клеточной поддержкой», в которой липоаспират разделяется поровну на две части: одна половина используется для концентрации клеток, полученных из компонента СВФ, другая половина используется в основном для обеспечения объема. Было обнаружено, что процедура липотрансферы с помощью клеток была эффективной и безопасной для увеличения мягких тканей и превосходит традиционную липоинъекцию [ 34 ]. В настоящее время несколько клинических испытаний были одобрены и продолжаются с участием инфузии аутологичных клеток SVF для лечения печеночной недостаточности, пост-инфарктного ремоделирования и ишемической кардиомиопатии среди других; Эти испытания предоставляют информацию о безопасности, касающуюся вливания СВФ, в дополнение к литературе, включающей местную инъекцию SVF. Кроме того, большой набор исследований на животных, а также ранние фазовые клинические испытания продемонстрировали безопасность других внутрисосудистых или внутрипаренхимных клеточных вливаний у людей. Стволовые клетки, полученные из костного мозга, были введены более чем 1000 пациентам с сердечной недостаточностью с четкой информацией о безопасности, а также некоторыми показателями эффективности [ 35 ].

Интересно отметить, что ни один из врачей, участвовавших в обычной не-учебной помощи этим пациентам, изначально предположил, что они рассматривают клиническое исследование с участием клеток, несмотря на известный прогрессивный и неумолимый ход их заболевания. Как только пациенты узнали о возможности участвовать в исследовании, врачи первичной медико-санитарной помощи, как правило, поощряли их участие в клинических испытаниях в большей степени, чем специализированные врачи (пульмонологи), которые обычно не поощряли участие в исследовании.

Есть некоторые недостатки, присущие этому методу исследования и анализа. Поскольку предметы проходили значительное расстояние до лечебного учреждения, дизайн исследования не включал их возвращение для объективного тестирования в последующий период, и, таким образом, ключевые данные о последующем наблюдении после первоначального сброса были получены путем собеседования и субъективного ввода, предоставленного субъектами, Важно отметить, что в этой модели исследования протокол предполагал, что субъекты получат дополнительное специальное последующее тестирование под присмотром своих местных врачей; Однако в конечном итоге было получено недостаточное количество этих исследований, позволяющих анализировать эти данные. Соответственно, результаты ограничены теми, которые фокусируются на субъективных показателях неблагоприятных событий, а также на качестве жизни для субъектов. В дальнейшем,

Еще одна слабость может возникнуть из гетерогенного клеточного состава СВФ. Использование этой фракции нуклеированных клеток из жировой ткани теоретически может поддерживать более надежный терапевтический ответ, но также может быть ответственным за изменчивость внутрипотери в потенции, которая может привести к будущей изменчивости эффективности среди индивидуумов. Кроме того, на сегодняшний день не проведена оценка биоактивности SVF или ASCs, полученных из жировой ткани пациентов с ХОБЛ против SVF или ASCs, полученных от здоровых людей.

Это исследование дает первое доказательство того, что внутривенная инфузия аутологичного СВФ сразу после липоаспирации является выполнимой и безопасной у пациентов со значительным ХОБЛ. Опрошенные пациенты не сообщили о значительных клинических неблагоприятных событиях, связанных с инфузией. Этот отчет создает основу для будущих оценок безопасности SVF, а также эффективности с дополнительными малыми этапами I-подобного исследования, а также более крупными исследованиями с использованием предполагаемых ослепленных и рандомизированных элементов дизайна.

Выводы

Здесь мы представляем результаты 12-тематического исследования, в которых оценивались эффекты аутологичной инфузии СВФ в контексте умеренной и тяжелой ХОБЛ. Протокол лечения проводился в соответствии с нормативными требованиями правительства Мексики с юрисдикцией над лечебным учреждением. Независимые интервью проводились исследователями, полностью не вовлеченными в набор и лечение предметов, чтобы ограничить предвзятость исследователя в отношении табулирования конечных точек, основанных на интервью. Частота побочных эффектов была небольшой и была связана с процедурами липосакции, необходимыми для сбора жировой ткани. Не наблюдалось никаких побочных эффектов, связанных с сердечно-легочными системами. Большинство участников исследования выразили готовность получить еще одну инфузию, если это возможно, из-за чувства благополучия, связанного с инфузией.

Идти к:

Согласие

Все пациенты были согласны и согласились принять участие в исследовании и опубликовали свои данные.

Идти к:

Конкурирующие интересы

KC является офицером US Stem Cell, Inc. JL является директором Института регенеративной медицины, где лечились предметы. JP и JL являются сотрудниками Института регенеративной медицины.

Идти к:

Финансирование

Это исследование было частично профинансировано Институтом регенеративной медицины и US Stem Cell, Inc.

Идти к:

Авторские вклады

KC предоставил протоколы и процедуры для обработки жировой ткани в SVF. TI, JL и RC отвечали за клинические процедуры и наблюдение за пациентами. Все авторы прочитали и утвердили окончательную рукопись.

Идти к:

Сокращения

SVF

Стромальная сосудистая фракция

ХОЗЛ

хроническое обструктивное заболевание легких

ИСС

Жировые стволовые / стромальные клетки

MSC

Мезенхимальная стволовая клетка

SAE

Серьезное неблагоприятное событие