В препарате крови, окрашенном бриллиант-крезиловым синим, подсчитать ретикулоциты. Результаты занести в бланк

Перед началом манипуляции необходимо надеть перчатки.

На препарат помещают каплю иммерсионного масла, после чего находят изображение (сначала при увеличении х7, х8, затем - х90).

Ретикулоциты считают в тонкой части мазка в 5 полях зрения (на 1000 эритроцитов, т.к. 1 поле зрения соответствует двумстам эритроцитам). Ответ выдается в промилле (‰).

Ретикулоциты – это эритроциты с нитчато-сетчатой субстанцией сине-зеленого цвета (остатки ядра).

Эталон ответа к билету № 5

Задача № 1

1. Результат ниже нормы – тромбоцитопения. Количество тромбоцитов в норме в периферической крови здоровых людей 180,0-320.,0´10⁹ /л.

Тромбоцитопения – это уменьшение количества тромбоцитов в единице объема крови. Тромбоцитопения может быть связано с перераспределением их по сосудистому руслу, с множественным образованием тромбоцитарных тромбов, повышенным распадом тромбоцитов – тромбоцитолизом, В патологии тромбоцитопения отмечается при:идиопатической тромбоцитопенической пурпуре, болезни Верльгофа.Тромбоцитоз- увеличение количества тромбоцитов отмечается:

при травмах с размозжением мышц, при асфиксиях, ожогах, гемолитических кризах, после кровотечений, в период выздоровления от инфекционных болезней,после удаления селезенки.

2. Тромбоциты по Фонио подсчитывают в окрашенном мазке крови параллельно с эритроцитами, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов (т.е считают 5 полей зрения, в каждом поле содержится примерно за 200 эритроцитов). Затем производят перерасчет количества тромбоцитов на число эритроцитов в 1 л крови.

3. Время свертывания при данной патологии не должно меняться, т.к. оно зависит не от количества тромбоцитов, а от плазменных факторов свертывания крови.

Задание №2.

Определить группу крови предложенного образца. Результаты занести в бланк.

 

- Одеть перчатки.

- Накапать последовательно по 1-2 капле цоликлонов анти-А, анти-В и анти АВ из дозатора на планшет для определения групп крови.

- Добавить по 1 капле крови в лунки с цоликлонами одноразовой пастеровской пипеткой

- Сбросить пипетку в дезраствор

- 3-мя разными палочками перемешать содержимое лунок;

- Сбросить стеклянные палочки в дез раствор.

- Перемешать содержимое лунок аккуратным покачиванием планшета.

- Через 3 мин. оценить результат исследования.

- Записать результат.

- Залить планшет 6% перекисью водорода

- Снять перчатки и сбросить их в дез. раствор.

Эталон ответа к билету № 6

Задача № 1

1. Если камера будет заполнена взвесью из верхних слоев пробирки, результат будет занижен и наоборот, если из нижних слоев – завышен. Взвесь должна быть равномерной, что достигается вращением пробирки между ладонями непосредственно перед заполнением камеры. После заполнения камеру нужно положить на столик микроскопа на 1-2 мин, чтобы эритроциты осели, и только после этого можно их подсчитывать.

2.

Эритроциты считают в 5 больших расчерченных квадратах), расположенных по диагонали, поскольку распределение клеток в камере может быть неравномерным.

Чтобы не считать дважды одни и те же клетки, пользуются следующим правилом счету подлежат все клетки внутри малого квадрата и лежащие на пограничных линиях, если они большей своей половиной заходят внутрь данного квадрата. К ним, кроме того, присчитываются эритроциты, пересекаемые пограничными линиями пополам, но только те из них, которые находятся на верхней и левой линиях. Эритроциты, расположенные большей своей частью вне данного квадрата, не считают

Разводящей жидкостью для эритроцитов является изотонический раствор хлорида натрия.

3. Увеличение количества эритроцитов в единице объема крови называется эритроцитозом. В физиологических условиях наблюдается у новорожденных в первые 3 дня жизни. Может отмечаться и у взрослых при усиленном потоотделении, голодании, подъемах на большую высоту высоту. В последнем эритроцитоз обусловлен не сгущением крови, а повышением продукции эритроцитов в костном мозге. Усиленный эритроцитоз является реакцией на понижение парциального давления кислорода в воздухе (эритроцитоз на основе высокой гипоксии отличается большим постоянством у жителей высокогорных областей).

Эритроцитозы, наблюдаемые в патологии, чаще бывают симптомами каких-либо заболеваний, т.е. являются вторичными.

Задание №2.

При определении лейкоцитов в камере Горяева получили при подсчете 100 квадратов 66 клеток.

Эталон решения:

1. Делим полученный результат на 2. 66:2=33

2.Полученный результат делим на 10 и умножаем на 10 9.

3.Результат 3,3 * 10 9.

Оценка результата: патология (лейкопения)

Эталон ответа к билету № 7

Задача № 1

1. Данный результат завышен, т.к. нормы гемоглобина для женщин 120-140 г/л. Повышение концентрации гемоглобина наблюдается при:

- миело-пролиферативных заболеваниях (например эритремии);

- пребывании на больших высотах;

- хронических гипоксиях;

- гемоконцентрации (дегидратация, ожоги, рвота, кишечная непроходимость); гемоконцентрация также сопровождается альбумина и некоторых других показателей

Снижение гемоглобина наблюдается:

- в первый триместр беременности содержание гемоглобина из-за физиологического разбавления крови;

- у людей старше 65 лет нижние пределы Hb несколько снижены;

- анемиях различного происхождения (железодефицитной, апластической, гемолитической и др.) и разбавлении крови.

 

2.Ошибки могли быть преаналитические: неправильная подготовка больного и аналитические:

а) несоблюдение соотношения реактива и крови;

б) выстаивание опытной пробы более 20 мин;

в) использование грязной кюветы

г) неправильное приготовление раствора или старый раствор

д) неисправный прибор

3. Принцип метода: гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин – гемиглобин, образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина

Задание №2.

	Подготовка к манипуляции
1.	Вымыть и осушить руки
2.	Надеть перчатки
	На рабочий стол поставить
3.	Поднос
4.	Дез. раствор для сброса перчаток
5.	Дез. раствор для сброса скарификаторов
6.	Спиртовые салфетки
7.	Сухие стерильные ватные шарики или салфетки
8.	Скарификаторы
9.	Микроветы для забора капиллярной крови с К3ЭДТА
10.	Бланки общего анализа крови
11.	Коробку с перчатками
12.	Маски
13.	Спирт 70%
14.	Ветошь

Эталон ответа к билету № 8

Задача № 1

1. У пациента в 1 л крови 90´10⁹ /л тромбоцитов. Рассчитывается путем составления пропорции, далее 4,5´10¹² /л. умножают на 20 и делят на 100.

Этот результат оценивается как тромбоцитопения.

Функции тромбоцитов

2. 1) Участие в остановке кровотечения:

а) вызывают спазм поврежденного сосуда, содержат серотонин и гистамин

б) участие в образовании первичного тромба (процессы адгезии и агрегации)

в) запуск системы свертывания (тромбоциты содержат факторы свертывания)

г) обеспечение ретракции кровяного сгустка

2) Укрепление кровеносных сосудов (питание для эндотелия, выработка факторов роста эндотелия)

3) Участие в иммунитете организма:

а) эффекторы иммунитета; перенос молекул иммуноглобулинов

б) поглощают чужеродные микрочастицы и вирусы (вирусы в тромбоцитах погибают, т.к. тромбоциты не содержат ядра)

в) участие в аллергических реакциях, способны к антителзависимой цитотоксичности (могут разрушать бактерии, опухолевые клетки)

 

3. В данном случае можно ожидать увеличения длительности кровотечения по Дуке. Наиболее общими тестами, отражающими состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, являются длительность кровотечения по Дуке..

Задание №2.

Подготовка к манипуляции

Вымыть и осушить руки.

Надеть перчатки.

На рабочий стол поставить

Поднос.

Дез. раствор для сбрасывания перчаток.

Дез. раствор для сбрасывания одноразовых отходов.

Гемоглобинометр, предварительно откалиброванный преподавателем.

Трансформирующий раствор.

Дозаторы на 5 мл и 20 мкл.

Наконечники для дозаторов.

Бланки общего анализа крови

Спирт 70%

Ветошь

Эталон ответа к билету № 9

Задача № 1

1. Норма ретикулоцитов: 5-8 % или 0,5-0,8 ‰. Ретикулоциты – это молодые эритроциты, с остатками ядра в виде нитчато- сетчатой субстанции.Полученный результат можно оценивать как ретикулоцитоз,

Анемии по числу ретикулоцитов делятся на нормо_-, гипо- и гиперрегенерарные.. Регенерация – увеличение регенеративных элементов красной крови (ретикулоцитов, полихроматофилов, нормобластов

2. В принципе окраски ретикулоцитов лежит прижизненная окраска без фиксации спиртом. Окраска ведется щелочными красками, например бриллиантовым крезиловым синим.Ход определения: берут одну каплю краски и одну каплю крови.

После этого кровь с краской тщательно перемешивают и оставляют на 30 мин.

По истечении времени окраски небольшие капли покрашенной крови помещают на предметные стекла и шлифовальным стеклом делают тонкий мазки, которые быстро высыхают на воздухе.

 

3.Техника подсчета количества ретикулоцитов.

Окрашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой в тонкой его части. Ретикулоциты учитываются в числе подсчитанных 1000 эритроцитов (т.е считают 5 полей зрения, в каждом поле содержится примерно за 200 эритроцитов).

Количество ретикулоцитов выражают на 1000 эритроцитов – ‰ (в промилле) и на 100 эритроцитов - % (в процентах).

Задание №2.

 

При определении эритроцитов в камере Горяева получили следующие результаты:

1 квадрат 115

2 квадрат 110

3квадрат 119

4 квадрат 115

5квадрат 118

Эталон решения:

1. Складываем сумму 5 квадратов: =577

2. Делим полученный результат на 100 и умножаем на 10 12

3. Получаем 5,77.

Оценка результата: патология (эритроцитоз).

Эталон ответа к билету № 10

Задача № 1

1. В результате анализа можно отметить лейкоцитоз, нейтрофильный сдвиг влево, увеличение СОЭ. Сдвиг лейкоцитарной формулы влево – это изменения в крови, напоминающие лейкозы, но не переходящие в них. Возникает в ответ на что-то; их можно назвать псевдобластными реакциями. Сдвиг лейкоцитарной формулы влево наблюдается при воспалительных процессах, при бактериальных инфекциях, сепсисе.Подобный сдвиг лейкоцитарной формулы, с лейкоцитозом и увеличением СОЭ возможен при острых воспалительных реакциях в организме.

2. Лейкоцитарная формула подсчитывается в наиболее тонкой части мазка, где эритроциты расположены одиночно, а не "монетными столбиками". Лейкоциты в мазке располагаются неравномерно: более крупные клетки – моноциты, эозинофилы, нейтрофилы встречаются чаще по краю мазка, более мелкие – лимфоциты – в середине. Поэтому подсчет ведется по зигзагообразной линии.

3.. Принцип всех методов окраски основан на сочетании щелочной синей краски – азура – с кислой краской – эозином. Структурные части клетки имеют различную реакцию. Они поглощают краситель противоположной реакции и им окрашиваются: щелочные части клетки окрашиваются кислой краской в красный цвет, а кислые – щелочной краской в синий цвет.

Задание №2.

Подготовка к манипуляции

Вымыть и осушить руки

Надеть перчатки

На рабочий стол поставить:

Поднос

Штатив

Пробирки с кровью

Микроскоп

Пробирки химические

Камеры Горяева

Дозаторы на 4,0 мл

Дозаторы на 0,02 мл

Бланки общего анализа крови

Дез. раствор для перчаток и одноразовых отходов

Дез. раствор для пробирок с кровью

Дез. раствор «для слива крови»

Спиртовые ватные шарики или спиртовые салфетки

Марлевые салфетки

Чистые пробирки

0,85 % раствор хлористого натрия

Коробку с перчатками

Спирт 70%

Ветошь

 

Эталон ответа к билету № 11

Задача № 1

1.

Гемоглобин М Ж	130,0-160,0 120,0-140,0	г/л
Эритроциты М Ж	4,0-5,0 3,9-4,7	х 1012/л
Цветовой показатель	0,85-1,05
Лейкоциты	4,0-9,0	х 109/л
Нейтрофилы:
Палочкоядерные	1-6 0,040-0,300	‰ х 109/л
Сегментоядерные	47-72 2,000-5,500	‰ х 109/л
Эозинофилы	0,5-5 0,020-0,300	‰ х 109/л
Базофилы	0-1 0-0,065	‰ х 109/л
Лимфоциты	19-37 1,200-3,000	‰ х 109/л
Моноциты	3-11 0,090-0,600	‰ х 109/л
Плазматические клетки	- -	‰ х 109/л
Скорость (реакция) М оседания эритроцитов Ж	2-10 2-14	мм/ч

• 4мл 0,9 % изотонического раствора натрия хлорида для подсчета числа эритроцитов;
• 5мл трансформирующего раствора для определения гемоглобина;
• 0,4 мл 3% раствора уксусной кислоты для подсчета числа лейкоцитов;
• 5% раствор цитрата натрия, набранного в капилляр Панченкова до метки Р и слитого в пробирку- для постановки СОЭ
• Краска Романовского, фиксатор Май-Грюнвальд для подсчета лейкоциттрной формулы.

3. Камера Горяева представляет собой толстое стекло со шлифованными краями, к которому притирается покровное стекло. Шлифованное стекло разделено четырьмя бороздами и поперечной канавкой. В центральной углубленной части нанесены две сетки Горяева. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов (15х15). Большие квадраты, расчерченные вертикально и горизонтально на 16 малых квадратов, чередуются с квадратами, разделенными только вертикальными или горизонтальными линиями, и с квадратами, без линий.

Задание №2.

При определении лейкоцитов в камере Горяева получили при подсчете 100 квадратов 80 клеток.

Эталон решения:

1. Делим полученный результат на 2. 80:2=40

2.Полученный результат делим на 10 и умножаем на 10 9.

3.Результат 4,0 * 10 9.

Оценка результата: норма.

Эталон ответа к билету № 12

Задача № 1

1) Промойте капилляр Панченкова 5 % цитратом натрия, а затем наберите ¼ капилляра цитрата натрия и поместите в центрифужную пробирку.

2) Обработайте палец пациента.

3) Проколите палец пациента скарификатором до упора.

4) Наберите кровь в капилляр Панченкова до метки "К" без пузырьков воздуха. Суженный конец капилляра оботрите ваткой от остатков крови.

5) Опустите капилляр с кровью в пробирку с цитратом и тщательно перемешайте.

6) Наберите в капилляр смесь крови с цитратом до метки "К", зажмите указательным пальцем верхнее отверстие капилляра.

7) Поставьте вертикально капилляр в штатив Панченкова, суженным отверстием надавив на одну из резинок штатива и опустив указательный палец с верхнего отверстия. Укажите время постановки реакции. Ровно через 1 час снимайте показания.

2. Ошибки при постановке СОЭ могут быть связаны с различными факторами:

- При комнатной температуре СОЭ определяется не позже, чем через 2 часа после взятия крови. В случае хранения крови при +4⁰С, СОЭ определяется не позднее, чем через 6 часов, но перед выполнением кровь прогревают до комнатной температуры.

- Исследование СОЭ должно проводиться при 18-25⁰С. При более высоких температурах значение СОЭ увеличивается, при низких – замедляется.

- Перед проведением анализа кровь хорошо перемешивают, что обеспечит лучшую воспроизводимость результатов.

При отсутствии резкой границы между эритроцитным столбиком и плазмой (регенеративных анемиях), над компактной массой эритроцитов образуется светлая "вуаль" в несколько миллиметров из разведенных эритроцитов

3. Клинико-диагностическое значение.

На СОЭ воздействуют многие факторы. Главными из них являются качественные и количественные изменения белков крови:

- Увеличение содержания крупнодисперсных белков (фибриногена, глобулинов) ведет к повышению СОЭ;

- Уменьшение их содержания, увеличение содержания мелкодисперсных белков (альбуминов) к ее снижению.

Помимо различных диспротеинемий на СОЭ влияют следующие факторы:

- соотношение холестерина и лецитина в плазме крови (при повышении содержания холестерина СОЭ увеличивается),

- содержание желчных пигментов и желчных кислот в крови (увеличение их количества ведет к уменьшению СОЭ),

- вязкость крови (при повышении вязкости СОЭ уменьшается),

- кислотно-щелочное равновесие плазмы крови (сдвиг в сторону ацидоза снижает, а в сторону алкалоза повышает СОЭ),

- физико-химические свойства эритроцитов:

их число (при уменьшении числа эритроцитов СОЭ повышается, а при увеличении снижается);

величина (увеличение объема эритроцитов способствует их агломерации и повышает СОЭ, уменьшение ведет к снижению СОЭ);

насыщенность гемоглобином (гипохромные эритроциты хуже агломерируют) и т.д.

Задание №2.

1. Количество гемоглобина умножаем на 3: 3*80=240

2. Полученное число делим на количество эритроцитов (первые три цифра): 240: 310=0.77

Оценка результата: патология (гипохромия).

Эталон ответа к билету № 13

Задача № 1

1.Гемоглобин – 62 г/л- снижен

Эритроциты – 3,0х10¹²/л- снижены

Цветной показатель – 0,6-снижен

 

Лейкоциты – 24,5х10⁹/л- увеличены

Сегментоядерные нейтрофилы –41%- снижены

Лимфобласты-2%,

Пролимфоциты -3%- в норме нет

Лимфоциты – 48%- увеличены

Моноциты –6% -снижены

Базофилы – 2%; Эозинофилы – 3%- (базофильно-эозинофильная- ассоциация)

Тени Боткина- Гумпрехта.- в норме- нет

СОЭ – 20 мм/час

Можно предположить хронический лимфолейкоз.

 

2 Лейкозы заболевания крови, сопровождающиеся нарушением кроветворения, развиваются в костном мозге из стволовой кроветворной клетки или клеток-предшественников II-III классов

 

3.

1. В костном мозге повышенное содержание бластных клеток, или появление в периферической крови бластных клеток.
2. Базофильно- и эозинофильная ассоциация
3. гено- и фенотипические изменения в клетках
4. атипические изменения в клетках
5. морфологические изменения – атипизм, анаплазия;
6. цитохимические изменения– химическая анаплазия
7. в крови находятся все виды клеток(молодые, созревающие, зрелые)
8. анемия, тромбоцитопения

 

Задание №2.

Эталон решения:

1. Количество гемоглобина умножаем на 3: 3*140=420

2. Полученное число делим на количество эритроцитов (первые три цифра): 420: 310=1,35

 

Оценка результата: патология (гиперхромия).

 

Эталон ответа к билету № 14

Задача № 1

1.Возможно уменьшение гемоглобина, уменьшение числа эритроцитов, уменьшение цветового показателя, микроцитоз.

2. Анизоцитоз- изменение эритроцитов по размеру. По диаметру эритроциты делятся на:

ž микроциты- диаметр эритроцитов меньше 7 микрон

ž макроциты - диаметр эритроцитов больше 9 микрон

ž нормоциты- диаметр эритроцитов 7-9 микрон