Особенности сооружения опор в сложных условиях: Сооружение ВЛ в районах с суровыми климатическими и тяжелыми геологическими условиями...
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни...
Топ:
Эволюция кровеносной системы позвоночных животных: Биологическая эволюция – необратимый процесс исторического развития живой природы...
Оснащения врачебно-сестринской бригады.
Основы обеспечения единства измерений: Обеспечение единства измерений - деятельность метрологических служб, направленная на достижение...
Интересное:
Национальное богатство страны и его составляющие: для оценки элементов национального богатства используются...
Наиболее распространенные виды рака: Раковая опухоль — это самостоятельное новообразование, которое может возникнуть и от повышенного давления...
Распространение рака на другие отдаленные от желудка органы: Характерных симптомов рака желудка не существует. Выраженные симптомы появляются, когда опухоль...
Дисциплины:
2017-06-25 | 1679 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Удерживаемый объем можно рассчитать, зная коэффициент распределения Dc и характеристики колонки.
Количество вещества после элюирования =
До окончательного элюирования количество вещества =
- объем подвижной фазы, равный рабочему объему колонки V0. Его определяют измеряя удерживаемый объем несорбируемого вещества; - концентрация вещества в подвижной фазе; - объем неподвижной фазы; концентрация вещества в неподвижной фазе.
Поскольку элюируется все вещество, присутствовавшее в колонке:
(1)
(2)
Часто используют приведенный удерживаемый объем , скорректированный с учетом рабочего объема колонки :
(3)
Уравнение 3 представляет собой основное уравнение хроматографии. Оно показывает, что чем больше коэффициент распределения Dc, тем больше VR и чем больше объем неподвижной фазы Vн, тем больше VR. В свою очередь Vн зависит от длины и диаметра колонки.
Эффективность разделения пропорциональна длине колонки, но при увеличении ее длины происходит размывание зоны каждого компонента и, следовательно, расширение пиков (ширина пика пропорциональна времени нахождения вещества в колонке), поэтому длину колонки необходимо ограничивать.
Газовая хроматография
Колоночная газовая хроматография является методом разделения летучих веществ: газов (при нормальной температуре) или паров (при повышенной температуре). В качестве неподвижной фазы в газовой хроматографии используются твердые материалы (насадочные или набивные колонки), твердые материалы, покрытые слоем жидкости, или же капилляры с нанесенным на внутреннюю поверхность слоем жидкости (капиллярные колонки). В качестве подвижной фазы используют газ-носитель, переносящий разделяемые вещества через колонку. Разделение анализируемой смеси осуществляется за счет различного времени удерживания компонентов пробы в неподвижной фазе.
|
Основные группы органических веществ, которые могут быть определены методом газовой хроматографии, включают газы, летучие жидкие соединения, твердые частицы, жидкие аэрозоли и главным требованием для веществ, разделяемых газовой хроматографией, является их достаточная устойчивость при температурах, которые необходимы для поддержания биопробы в газообразном состоянии.
Между жидкостной и газовой хроматографией не существует принципиальной разницы. Газовая хроматография отличается лишь свойствами подвижной фазы: высокой скоростью диффузии газа-носителя и его способностью сжиматься. Достоинствами газовой хроматографии являются:
· возможность идентификации и количественного определения индивидуальных компонентов сложных смесей;
· возможность анализа широкого круга объектов — от легких газов до органических соединений и некоторых металлов;
· высокая четкость разделения и быстрота процесса, обусловленная низкой вязкостью подвижной фазы;
· возможность исследования микропроб и автоматизация записи
получаемых результатов, обусловленная наличием чувствительных и
малоинерционных детекторов;
· возможность выделения чистых веществ в промышленных масштабах;
· пригодность для исследования малых объемов жидких биопроб (0,01...50 мкл).
Максимальная разделяющая способность колонки в ГХ зависит от:
· количества НФ, качества упаковки, толщины слоя;
· размера (диапазона размеров) частиц материала-носителя;
· размеров колонки;
· вязкости газа-носителя (следовательно, и температуры в колонке).
В газоадсорбционной в качестве неподвижной фазы используется адсорбент, а в основе разделения лежит механизм адсорбции; в газожидкостной неподвижной фазой является жидкость, нанесенная на инертный материал-носитель, а в основе разделения лежит распределительный механизм. Растворимость анализируемых веществ в неподвижной фазе определяется зависимостью давления паров растворенного вещества от его концентрации в жидкой фазе.
|
Вид хроматограммы, полученной в изотермических условиях, представлен на рис.7. Время удерживания конкретного компонента в колонке зависит от вероятности попадания молекул вещества в подвижной фазе. При этом компоненты с высоким давлением паров и соответственно низкой растворимостью в неподвижной фазе удерживаются слабее и, наоборот, вещества с низким давлением пара и высокой растворимостью элюируются позже.
Рис.7. Хроматограмма, полученная в изотермических условиях.
В газовом хроматографе (рис. 8) газ-носитель из баллона 1 через регуляторы расхода и давления непрерывно с постоянной или переменной скоростью подается в хроматографическую трубку-колонку 3, заполненную сорбентом и помещённую в термостат 4, позволяющий поддерживать заданную температуру [1]. Ввод газообразной или жидкой пробы осуществляется дозаторами 2, регулирующими объём пробы с помощью электромагнитных клапанов (ЭМК).
Рис. 8. Структурная схема газового хроматографа
1 – баллон с газом-носителем; 2 – дозатор пробы; 3 – хроматографическая трубка-колонка; 4 – термостат; 5 – детектор; 6 – электрический сигнал; 7 – хроматограмма
В газовой хроматографии применяют три типа колонок:
Рис.9. Типы колонок для газовой хроматографии: а – насадочная колонка; б – тонкослойная капиллярная колонка (SCOT - колонка); в – классическая капиллярная колонка.
1. Насадочные колонки. Такие колонки изготовливаются из стеклянных или металлических трубок (нержавеющая сталь) U-образной или спиралевидной формы. Они характеризуются большой поверхностью и высокой разделяющей способностью, однако обладают большим сопротивлением, что ведет к неравномерности потока газа-носителя. Хотя теоретически разделяющая способность растет с увеличением длины колонки, на практике преимущество длинных колонок сводится на нет из-за увеличения сопротивления. Оптимальной длиной насадочной колонки является 0,5...10 м при внутреннем диаметре 1...5 мм.
2. Тонкослойные капиллярные колонки. Этот тип колонок занимает промежуточное место между насадочными и классическими капиллярными колонками. Их внутренняя поверхность покрыта тонким слоем мелкодисперсного сорбента, пропитанного жидкой фазой. По разделяющей способности они превосходят насадочные, так как обладают меньшим сопротивлением.
|
3. Капиллярные колонки из стекла или нержавеющей стали. При равной длине с насадочными колонками такие колонки обладают существенно меньшим сопротивлением, имеют длину до 200 м при внутреннем диаметре 0,3...0,5 мм. Эффективность капиллярных колонок в 100 раз выше, чем насадочных. Преимуществом их является возможность изготовления из кварцевого стекла, что придает им свойство гибкости — их можно даже завязывать в узел или придавать любую форму. Однако такие колонки предъявляют жесткие требования к устройствам ввода пробы и к выбору детектора.
Основные характеристики колонок для газовой хроматографии представлены в табл.2.
Таблица 2. Характеристики колонок для газовой хроматографии.
Параметр | Тип колонки | |
насадочные | Капиллярные | |
Длина, м | 1...6 | 10... 100 |
Внутренний диаметр, мм | 2...4 | 0,25...0,3555 |
Емкость | 10мкг/пик | 50 нг/пик |
Толщина пленки НФ, мкл | 1...10 | 0,05...0,5 |
Скорость газа-носителя, мл/мин | 10...60 | 0,5…10 |
Перепад давления по колонке, атм | 0,6...2,4 | 0,18...2,4 |
Устройства ввода пробы. Способ ввода биопробы зависит от ее вида (жидкая или газообразная) и типа колонки. При разделении жидкостей в насадочных колонках биопробу вводят шприцем, прокалывая иглой мембрану (пробку из силиконовой резины), при этом биопроба потоком газа-носителя уносится в колонку. При введении газовых и невязких жидких биопроб область ввода иглы нагревают, чтобы она сразу испарилась. Твердую биопробу предварительно переводят в раствор.
При работе на капиллярных колонках биопробу вводят при помощи делителя потока, в котором она попадает сначала в канал испарения, после чего разбавляется газом-носителем. Большая часть газовой смеси уходит на сброс, меньшая - в колонку. При автоматизированном анализе газовых смесей биопробу вводят при помощи дозирующей петли.
Материалы-носители. Газоадсорбционную хроматографию применяют с целью разделения газов или низкокипящих веществ и обнаружения газообразных примесей в воздухе. В качестве адсорбентов применяют:
|
· активированные угли или графитированные сажи;
· пористые синтетические полимеры;
· пористые неорганические материалы (молекулярные сита).
Нанесенная жидкая фаза в колонках для газоадсорбционной хроматографии не применяется.
В газожидкостной хроматографии сорбенты выполняют функцию носителей жидкой неподвижной фазы и не оказывают влияния на процесс разделения.
Технологическая процедура подготовки пробы может осуществляться различными способами. Для анализа паров над жидкой или твердой фазой (например, при определении спирта в пробе крови) разработана специальная методика Неаd-Sрасе-Аnаlуsе (из объема над жидкостью). Необходимое количество пробы газа отбирают с помощью пробоотборника непосредственно из емкости для хранения. По другой методике биопробу потоком воздуха направляют в охлаждаемую ловушку и замораживают. Третий вариант заключается в том, что газ при пониженной температуре адсорбируют на короткой колонке, затем при повышении температуры десорбируют и направляют в рабочую колонку. При анализе влажных биопроб не допускается конденсация воды в колонке, для этого биопробу осушают. Твердые частицы в аэрозолях отделяют с помощью бумажных салфеток или фильтрующих патронов. При анализе жидких биопроб, содержащих компоненты с различной температурой кипения, исключают возможность конденсации компонентов в дозирующем шприце, для этого шприц нагревают, не допуская разложения биопробы.
Основные стадии технологической процедуры анализав газовой хроматографии несколько отличаются от рассмотренных ранее.
1. Подготовка колонки. Колонку промывают специальным раствором, а затем высушивают в потоке воздуха, очищенного от пыли и капель масла.
|
|
Своеобразие русской архитектуры: Основной материал – дерево – быстрота постройки, но недолговечность и необходимость деления...
Историки об Елизавете Петровне: Елизавета попала между двумя встречными культурными течениями, воспитывалась среди новых европейских веяний и преданий...
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Особенности сооружения опор в сложных условиях: Сооружение ВЛ в районах с суровыми климатическими и тяжелыми геологическими условиями...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!