Сыворотка диагностическая холерная люминесцирующая, приготовление, назначение.

Сыворотка диагностическая холерная люминесцирующая – это МБП, содержащий АТ, дающие свечение в люминесцентном микроскопе и предназначенные для идентификации холерного вибриона.

Изготовления холерных флуоресцирующих иммуноглобулинов включает в себя следующие этапы:

· получение антигена,

· гипериммунизацию кроликов-продуцентов с целью получения сыворотки-полуфабриката;

· выделение из гипериммунной сыворотки серологически активной иммуноглобулиновой фракции;

· конъюгирование иммуноглобулиновой фракции с флуорохромом;

· контроль уровня специфической активности и специфичности конъюгата;

· ​стабилизацию препарата флуоресцирующих антител.

Можно применять в экспрес-диагностике холеры – проведение прямой РИФ.

Факторы патогенности холерного вибриона. Токсины и их характеристика.

Главными факторами патогенности явл.:

· Токсинкорегулируемые пили – обеспечивают колонизацию вибриона на микроворсинках тонкой кишки.

· Холерный энтеротоксин – белок, состоящий из 1субъединицы А и 5 субъединиц В. В- субъединицы ответственны за связывание всей молекулы токсина с клеточным рецептором слизистой тонкой кишки.

А-субъединица проникает внутрь клетки, активирует АЦ, усиленный синтез цАМФ, это изменяет активный транспорт ионов: усиленно выделяются ионы хлора, затрудняется всасывание хлора и натрия, что составляет осмотическую основу для выделения в просвет кишечника воды.

· Нейраминидаза укрепляет связь В-субъединицы с эпителиоцитами и облегчает проникновение энтеротоксина внутрь клеток

· Растворимая гемагглютинин/протеаза способствует отделению вибрионов от рецепторов эпителиоцитов и их выходу из кишечника во внешнюю среду, обеспечивая им эпидемическое распространение.

· ​ Эндототсин – ЛПСЮ, выделяется при разрушении вибриона. Активирует каскад арахидоновой кислоты, запускает синтез простагландинов, происходит сокращение гладкой мускулатуры и развитие тенезм.

Бактериологическоеисследование при пищевых токсикоинфекциях. Особенности.

Материал для исследования:

- Испражнения

- Рвотные массы

- Промывные воды желудка

- Пищевые продукты и сырье, с которыми связывают развитие болезни

Для обнаружения безусловно-патогенных микробов на соответствующие накопительные и селективные среды засевают неразведенный исследуемый материал. Для выявления УПМ готовят серийные разведения материала в ИХН или в0,1% пептонной воде. Плотный материал перед посевом измельчают в асептических условиях с добавлением ИХН.

Делают мазок, окраска по Граму.

Для выявления и идентификации бактерий используют подходящие пит. среды и тесты:

· Среда Левина или Эндо – выявление энтеробактерий

· ЖСА –стафилококки

· МПА с фурагином –псевдомонады

· МПА - бациллы

· ​Среда Китта-Тароцца – клостридии.

Выделяют чистую культуру, проводят идентификацию, определяют чувствительность к антибиотикам, определяют факторы патогенности, б/х св-ва.

 

Агглютинирующие сыворотки шигелл Флекснера, Зонне и др., состав, назначение.

Содержание: агглютинирующие антитела к антигенам шигелл.

Получение: путем иммунизации кроликов определенными видами и сероварами шигелл дизентерии Флекснера, Зонне, Бойда.

Применение: для диагностики в бактериологическом методе: постановке реакции агглютинации.

 

Семейство энтеробактерий. Таксономия. Общая характеристика. Морфология, культуральные, биохимические свойства. Антигенная структура.

Семейство – Еnterobacteriaceae

Роды – Proteus Providencia Klebsiella Enterobacter Escherichia Shigella Salmonella

Морфология: грамотрицательные палочки, спор не образуют (искл. Shigella и Klebsiella), подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиков, некоторые образуют капсулу.

Культуральные: растут на простых питательных средах, при 37 С, факультативные анаэробы

Биохимические: оксидазоотрицательные, обладают нитратредуктазой, ферментируют глюкозу с образование кислоты, некоторые с образованием газа, роды различаются по способности ферментировать лактозу, продуцировать сероводород, индол, расщеплять мочевину и т.д.

Антигенные: обладают соматическим О-антигеном, могут иметь жгутиковый Н-антиген, поверхностный К-антиген.