Определение гемоглобина в крови

Подготовка к анализу:

1. Для сдачи крови из пальца нужно прийти в лабораторию в утреннее время (обычно взятие происходит с 7.30 до 10 часов).

2. Анализ нужно сдать натощак, то есть с утра есть нельзя, можно только пить простую воду. Последний прием пищи должен происходить накануне вечером – не позднее, чем за 8-12 часов до процедуры.

3. Днем раньше можно кушать, но рекомендуется за день-два до анализа, чтобы не получить искаженных результатов, отказаться от жирной пищи и спиртных напитков.

4. Накануне следует избегать физических и эмоциональных нагрузок.

5. Утром перед процедурой нужно воздержаться от курения.

Алгоритм и техника взятия крови:

1. Пациент сидит напротив лаборанта. Рука (обычно левая) лежит на столе.

2. Место прокола дезинфицируется спиртом и обезжиривается эфиром.

3. Одноразовым скарификатором быстро делают прокол в подушечке безымянного пальца, погружая инструмент на всю глубину режущей части (примерно на 2-3 мм).

4. Первая капля крови снимается с помощью сухой ваты.

5. Для исследования используют вторую и следующие капли крови, которые набирают с помощью стеклянного переходника, затем помещают в пробирки и подписывают.

6. После того, как кровь взяли, место укола обрабатывают спиртом или йодом и зажимают ватным тампоном до полной остановки крови.

Алгоритм забора капиллярной крови у ребенка точно такой же, как и у взрослого.

 

Гемиглобинцианидный метод

Принцип метода: Гемоглобин крови при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемиглобин), образующий с ацетонциангидрином гемиглобинцианид (цианметгемоглобин), интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется фотометрически при длине волны 540 (500–560) нм.

 

Оборудование и реагенты
– Спектрофотометр, длина волны 540 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 500–560 нм (зеленый светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 и 5,0 мл;
– колба мерная вместимостью 1,0 л;
– пробирки вместимостью 5–10 мл;
– секундомер;
– вода дистиллированная;
– перчатки резиновые или пластиковые.

Ход определения:
В пробирки внести по 5,0 мл трансформирующего раствора, добавить по 0,02 мл крови (разведение в 251 раз), тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 20 минут, после чего измерить величину оптической плотности опытных проб против холостой пробы (трансформирующего раствора) при длине волны 540 (500–560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм.
Калибровочный раствор гемоглобина обрабатывать так же, как и пробу цельной крови.
Окраска устойчива в течение 1 часа.
Концентрацию гемоглобина в крови рассчитать по формуле:

Eо
С = --------- х 150,
Eк
где: С – концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л;
Eо – оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;
Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;
150 – концентрация гемоглобина в калибровочном растворе, г/л.

Диагностическая информация:

При снижении концентрации гемоглобина в крови (олигохромемия): анемиях (железодефицитной, гемолитической, гипопластической, В12-дефицитной); острых кровопотерях (в первые сутки кровопотери из-за сгущения крови, обусловленного большой потерей жидкости, концентрация гемоглобина не соответствует картине истинной анемии); скрытых кровотечениях; злокачественных опухолях и их метастазах; поражении костного мозга, почек и некоторых других органов; в результате действия некоторых лекарственных препаратов, которые могут вызвать развитие апластической анемии (противоопухолевые, противосудорожные, тяжелые металлы, некоторые антибиотики, анальгетики) или способствовать развитию гемолиза (пенициллин, левомицетин, сульфаниламиды).

При повышении концентрации гемоглобина в крови (гиперхромемия): первичных и вторичных эритроцитозах; относительных эритроцитозах при дегидратации.

Референтные пределы:

- у новорожденного — 136–196 г/л;
- у трехмесячного — 105–125 г/л;
- у ребенка в возрасте 1 года — 110–130 г/л;
- у ребенка в возрасте 10 лет — 115–148 г/л;
- у взрослого мужчины — 130–160 г/л;
- у взрослой женщины — 120–140 г/л.

Результаты исследования

 

Было проведено исследование на содержание железа в сыворотке крови у 10 пациентов женского и мужского пола следующих возрастных пределах: от 25-30 лет.

Таблица 2. Показатели железа в сыворотке крови респондентов, участвующих в исследовании.

Пациенты (25-30 лет)	Результаты определения железа в сыворотке крови
Мужчины	женщины
Пациент № 1	9,5 мкмоль/л	10,1 мкмоль/л
Пациент № 2	11,8 мкмоль/л	9,0 мкмоль/л
Пациент № 3	11,6 мкмоль/л	9,7 мкмоль/л
Пациент № 4	20,1 мкмоль/л	6,2 мкмоль/л
Пациент № 5	11,8 мкмоль/л	12,5 мкмоль/л
М (среднеарифметическое значение)	6,48 мкмоль/л	4,75 мкмоль/л

 

У пациента № 1 уровень железа в сыворотке крови снижен – 9,5 мкмоль/л (норма 11,6 - 31,3 мкмоль/л). Пациент жаловался на частые головные боли и боли в области солнечного сплетения, при испражнении кал имел чёрный цвет. Можно было предположить внутреннее кровотечение. В ходе дальнейшего исследования был поставлен диагноз, язвенная болезнь желудка. Пациента госпитализировали. После длительного лечения, до выписки пациента с больницы, ему заново сделали анализ на содержание железа в сыворотке крови, результат анализа был таков - 11,5 мкмоль/л, это норма.
У пациентки № 4 уровень железа в сыворотке крови снижен – 6,2 мкмоль/л (норма 9,0-30,4 мкмоль/л). Пациентка жаловалась на головокружения, быструю утомляемость, слабость, частые обмороки, нарушение вкусовых качеств, плохой аппетит. Визуально была выражена бледность кожных покровов. В ходе дальнейшего исследования был сделан ОАК, в нём чётно просматривались отклонения от норм таких показателей: гемоглобин – 93 г/л, гематокрит - 31%, ЦП - 0,66, СОЭ – 45 мм/ч. Можно было предположить, что пациентка беременна. Пациентку направили к гинекологу, после осмотра врач гинеколог поставил беременность 6 недель, предположения подтвердились. У неё обнаружили железодефицитную анемию.

Таким образом, выяснилось, что содержание железа в крови у женщин ниже, чем у мужчин связано это с различными физиологическими отличиями.

Вывод: Железо напрямую связано с содержанием гемоглобина в крови человека. Без железа кислород, поступающий в организм, бесполезен. Когда кислород поступает в кровь, гемоглобин, важным составляющим которого является железо, транспортирует его от легких к тканям. Следовательно, когда определяют железо в крови, необходимо определять и гемоглобин.

Было проведено исследование на содержание гемоглобина в крови у 20 пациентов женского и мужского пола следующих возрастных пределов: 20-30 лет.

Таблица 3. Показатели гемоглобина респондентов, участвующих в исследовании.

 

Пациенты (20-30 лет)	Результаты определения Hb
мужчины	Женщины
Пациент № 1	136 г/л	125 г/л
Пациент № 2	130 г/л	159 г/л
Пациент № 3	158 г/л	99 г/л
Пациент № 4	132 г/л	100 г/л
Пациент № 5	146 г/л	120 г/л
Пациент № 6	105 г/л	126 г/л
Пациент № 7	98 г/л	130 г/л
Пациент № 8	130 г/л	90 г/л
Пациент № 9	160 г/л	104 г/л
Пациент № 10	138 г/л	121 г/л
М (среднеарифметическое значение)	133 г/л	117 г/л

 

При исследовании гемоглобина, у 20% пациентов мужского пола возрастом от 20-30 лет была выявлена анемия. Они жаловались на быструю утомляемость, сонливость, головные боли. При опросе выяснилось, что они работают строителями. Причина низкого гемоглобина у этих пациентов тяжёлый труд и недостаточное питание и питье. При биохимическом исследовании сыворотки крови на микроэлементы было зарегистрировано снижение уровня основного внутриклеточного катиона — калия. Возможно, это состояние обусловлено перемещением его из внеклеточного пространства внутрь клеток. Пониженное содержание калия является «фактором риска» и проявляется нарушением клеточного метаболизма, может приводить к снижению работоспособности, мышечной слабости.[] Установлено также снижение концентрации магния. Скорее всего, это связано с усиленными продолжительными нагрузками, сопровождающимися потерей магния мышечными клетками в результате повреждений мышечных волокон, стрессами, значительной потерей с потом. Были даны рекомендации врачом, пропить препараты, повышающие гемоглобин в крови, улучшить питание и взять отпуск.
У 40 % среди пациентов женского пола возрастом от 20-30 лет выявлено снижение гемоглобина в крови, возможно, это связано с менструальным циклом, физической нагрузкой или с нарушением питания.

У пациентки № 2 уровень гемоглобина в крови завышен – 159 г/л (норма 120–140 г/л). При опросе выяснилось, что два дня назад она отравилась, у неё были обильные рвоты и понос. Это и стало причиной завышенного гемоглобина в крови пациентки, так как на фоне потери жидкости из-за рвоты и поноса из крови уходит плазма, а относительное количество эритроцитов с гемоглобином нарастает.
Таким образом, снижение концентрации гемоглобина в крови у женщин наблюдается в два раза чаще, чем у мужчин, скорее всего, это связано с особенностями женского организма (менструальный цикл, беременность, лактация, физические нагрузки, нерациональное питание).