Лабораторные методы специфической аллергодиагностики

К методам выявляющим аллергические реакции немедленного, В-зависимого типа относятся:

a) определение общего IgE (однако, его высокий уровень может быть и в продуктивной фазе иммунного ответа),

b) определение аллерген-специфических Ig E и IgG4

Определение общего IgE, аллерген-специфических IgE и IgG4 антител методом иммуноферментного анализа (ИФА)

аллергены бактерий и грибов, шерсти и перхоти животных, перьев птиц; аллергены пыльцы трав и деревьев; аллергены клещей, домашней и библиотечной пыли, ядов насекомых; лекарственные и профессиональные аллергены.

Принцип метода.

Соответствующий аллерген (или антитела к IgE) фиксирован на поверхности иммунологического планшета или бумажного диска. При инкубации пробы специфические антитела связываются с твердой фазой. Промывка моющим раствором удаляет с поверхности планшета или диска все несвязавшиеся антитела. Инкубация диска (планшета) с антисывороткой против IgE человека (или против IgG4), конъюгированной с ферментной меткой (чаще - пероксидаза хрена), и последующая инкубация с хромогенным субстратом приводит к интенсивному окрашиванию пробы при наличии общего или аллерген-специфических IgE (IgG4).

Скарификационные кожные пробы. Одновременно можно поставить до 10 кожных проб с различными аллергенами. Проба проводиться на внутренней поверхности предплечья по средней линии после предварительной обработки кожных покровов 70% раствором спирта. Насечки на поверхности кожи наносят на расстоянии 5 см (в строгом соответствии с маркировкой) стерильными скарификаторами, отдельными для каждого. С помощью положительной пробы с гистамином оценивается нормальная реактивность кожных покровов. На 5 см выше проводиться тест с контрольной жидкостью (контроль отрицательной реакции). Аллергены наносятся в соответствии с маркировкой на расстоянии 5см. Капли испытуемых растворов наносят на кожу и в капле стерильным скарификатором, отдельным для каждого аллергена, делают две параллельные царапины длинной до 5 мм. Реакцию немедленного типа определяют через 20 минут При аллергических заболеваниях кожи пробы ставят на участках, не затронутых повреждением (спине, животе, бедре).

Капельные и аппликационные пробы. Аллергены при аппликационных тестах применяют в чистом виде или в растворах, в концентрациях, не вызывающих раздражения кожи у здоровых людей. При постановке теста на предварительно обработанную 70% спиртом кожу предплечья наносят каплю аллергена (капельная проба) или накладывают кусочек марли размером около 1 см, смоченный раствором аллергена (аппликационная проба), фиксируют ее лейкопластырем и через 24–48 ч оценивают реакцию (измеряют волдырь или гиперемию). Если реакция появляется раньше 24 ч и появляются такие симптомы, как зуд, жжение, отек, местное повышение температуры и др., марлю с аллергеном снимают раньше (при появлении выраженных симптомов реакции).

При отсутствии реакции через 48 ч, проба считается отрицательной.

Проба уколом (prick-test) – удобный и весьма чувствительный метод определения сенсибилизации. При его проведении используется стандартный набор разового применения, позволяющий сделать укол кожи иглой с ограничителем на глубину 1 мм. Проба уколом осуществляется через каплю испытуемого аллергена, каплю растворителя (для аллергена) и каплю 0,1% раствора гистамина. Расстояние между каплями не менее 2-4см. Максимальная реакция на гистамин считывается через 10 мин, на пыльцовые аллергены через - 15 мин. Реакцию оценивают, так же как и результат скарификационных проб.

Внутрикожные пробы. Внутрикожные тесты более чувствительны, чем скарификационные, но менее специфичны. Применяют их, главным образом, для выявления сенсибилизации к аллергенам бактериального и грибкового происхождения. С неинфекционными аллергенами их проводят только в том случае, когда аппликационные или скарификационные тесты отрицательны или сомнительны, а анамнез четко положительный.

 

Билет №8

1)

2)

37 Клинико-диагностическое значение определения концентрации билирубина в крови и моче. Паренхиматозная, обтурационная, гемолитическая желтухи. Функциональные гипербилирубинемии.

Пигментный обмен представляет собой совокупность слож­ных превращений различных окрашенных веществ в организме человека и животных.

Из гемоглобина образуется вердоглобин, из него биливердин и потом билирубин. При распаде 1 г гемоглобина обра­зуется 34 мг билирубина. Будучи водонерастворимым, свободный билирубин соединяется с альбумином плазмы, который служит основным его транспортером в плазме крови. Установлено, что каждая молекула альбумина реагирует с двумя (или даже тремя) молекулами билирубина, одна из которых связана с белком более прочно, чем дрyгaя(ие) (в физиологических условиях 1 г альбуми­на заключает в себе 17 мг билирубина).

В настоящее время под свободным билирубином принято по­нимать неконъюгированный (с глюкурсновой кислотой) билиру­бин, который из-за плохой растворимости в воде дает трудную, непрямую (происходящую лишь после внесения в пробу этилового спирта или другого ускорителя) реакцию с ди­азореактивом Ван ден Берга.

Клиницистам хорошо известно токсическое действие высоких концентраций билирубина крови. Оно проявляется пораже­нием центральной нервной системы, возникновением очагов некроза в паренхиматозных органах, подавлением клеточного иммунитета, развитием анемии вследствие гемолиза эритроци­тов. Механизм токсического действия билирубина сводится не только к угнетению процессов окислительного фосфорилирова­ния, но также к снижению потребления кислорода, что способно обусловить повреждение тканей из-за дефицита энергии. Важ­ную роль в этом процессе играет и фотосенсибилизирующее дей­ствие билирубина. Будучи метаболитом протопорфирина - од­ного из наиболее активных фотосенсибилизаторов, билирубин способен, используя квантовую энергию света, переводить хими­чески инертный молекулярный кислород в чрезвычайно актив­ную, синглетную форму. Синглетный кислород разрушает любые биологические структуры, окисляет липиды мембран, нуклеине­вые кислоты, аминокислоты белков. В результате активации им перекисного окисления липидов и отщепления гликопротеинов, а также высокомолекулярных пептидов мембран возникает гемо­лиз эритроцитов. Учитывая способность билирубина иницииро­вать свободнорадикальное окисление липидов, многие авторы рекомендуют включать в комплекс медикаментозной терапии препараты антисксидантнсго действия (альфа-токоферол, аскор­бат, цистамин, ионол и др.), способствующие снижению выра­женности гипербилирубинемии.

Для определения содержания билирубина в сыворотке (плаз­ме) крови используют в основном химические и физико-хими­ческие методы исследования, среди которых выделяют колори­метрические, спектрофотометрические (ручные и автоиатизированные), хроматографические, флюориметрические и некоторые другие.

Желтуха (icterus) — синдром, возникающий при увеличении содержания в крови билирубина и характеризующийся желтой окраской кожи, слизистых оболочек, склер в результате отложения в них желчных пигментов при нарушении желчеобразования и желчевыделения.

Классификация. В зависимости от первичной локализации патологического процесса, приводящего к развитию желтухи, и механизма возникновения выделяют такие виды желтухи:

1) надпеченочную, вызванную повышенной продукцией билирубина, главным образом в связи с усилением распада эритроцитов (гемолитическая желтуха) и реже при нарушении плазменного транспорта билирубина;

2) печеночную желтуху, обусловленную нарушением захвата, конъюгации и экскреции билирубина гепатоцитами вследствие их повреждения при различных патологических процессах, а также приобретенных и наследственных дефектах структуры гепатоцитов и ферментов, участвующих в метаболизме и транспорте билирубина в клетках печени;

3) подпеченочную желтуху (механическую), возникающую при затруднении оттока желчи по внепеченочным желчевыводящим путям.

Надпеченочная желтуха. К этой группе относятся:

1) гемолитическая желтуха, которая развивается в результате повышенного распада эритроцитов;

2) шунтовая гипербилирубинемия — при возрастании образования так называемого шунтового билирубина из гемоглобина незрелых форм эритроцитов (например, нормобластов костного мозга в результате неэффективного эритропоэза при В₁₂-дефицитной анемии) или же из гема таких протеидов, как миоглобин, цитохромы, каталаза, при обширных гематомах, инфарктах;

3) желтуха при нарушении плазменного транспорта билирубина — при разрыве связи между билирубином и альбумином некоторыми медикаментами или же нарушении образования билирубин-альбуминового комплекса вследствие резкого уменьшения содержания альбумина в крови.

Печеночная желтуха.Этиология. Причиной возникновения печеночной желтухи является прежде всего действие этиологических факторов, вызывающих повреждение гепатоцитов (инфекция, токсические, в том числе лекарственные, вещества, внутрипеченочный холестаз), а также наследственный дефект захвата, конъюгации и выведения билирубина из гепатоцита.

Патогенез. Выделяют следующие патогенетические разновидности печеночных желтух:

1 .Печеночная желтуха вследствие нарушения захвата билирубина гепатоцитом

2.Печеночная желтуха вследствие нарушения конъюгации билирубина с уридиндифосфоглюкуроновой кислотой в мембране эндоплазматического ретикулума

3.Печеночная желтуха вследствие нарушения экскреции билирубина из гепатоцита в желчевыводящие пути развивается при изменении проницаемости билиарной части цитоплазматической мембраны печеночной клетки, цитолизе гепатоцитов, разрыве желчных канальцев, сгущении желчи и закупорке внутрипеченочных путей (внутрипеченочный холестаз).

Значительно чаще уменьшение выделения билирубина в той или иной мере сочетается с нарушением его захвата, внутриклеточного транспорта, конъюгации гепатоцитом. Таков механизм возникновения печеночной желтухи при повреждении клеток печени (гепатоцеллюлярная желтуха) и внутрипеченочном холестазе (холестатическая желтуха), что наблюдается при вирусных, инфекционных, токсических (в том числе медикаментозных) гепатитах, обменных гепатозах, циррозе печени (например, первичном билиарном циррозе), диффузной инфильтрации печени при лейкозах, гемохроматозе.

Подпеченочная желтуха (механическая, обтурационная

Патогенез. Механическое препятствие оттоку желчи приводит к застою (внепеченочный вторичный холестаз) и повышению давления желчи выше 2,7 кПа (270 мм вод. ст.), расширению и разрыву желчных капилляров и поступлению желчи прямо в кровь или через лимфатические пути. Появление желчи в крови обусловливает прямую гипербилирубинемию (увеличивается содержание конъюгированного билирубина), гиперхолестеринемию, развитие холемического синдрома в связи с циркуляцией в крови желчных кислот, билирубинурию (отсюда темная окраска мочи — "цвета пива") и наличие желчных кислот в моче. Непоступление желчи в кишечник из-за механического препятствия в желчевыводящих путях приводит к тому, что не образуется и, следовательно, не выделяется стеркобилин с калом (обесцвеченный, ахоличный кал) и мочой. Таков же механизм развития ахолического синдрома, наиболее выраженного при механической желтухе при полной обтурации желчевыводящих путей.

Функциональные гипербилирубинемии - группа заболеваний и синдромов, характеризующихся желтушным окрашиванием кожи и слизистых, гипербилирубинемией при нормальных других показателях функции печени и (при основных формах) отсутствии морфологических изменений в печени, доброкачественным течением. К ним относятся гипербилирубинемия постгепатитная и гипербилирубинемии функциональные врожденные.

Гипербилирубинемии функциональные врожденные - группы наследственно передающихся (генетически обусловленных) негемолитических гипербилирубинемий. Заболевания обусловлены нарушением процессов захватывания гепатоцитами свободного билирубина из крови, связывания его с глюкуроновой кислотой с образованием билирубин-глюкуронида (связанного билирубина) и последующего выделения его с желчью. Во всех случаях гипербилирубинемия и желтуха обнаруживаются с раннего детства, в большинстве случаев (кроме синдрома Криглера-Найяра) - незначительны, могут иметь перемежающийся характер (усиливаться под влиянием погрешностей в диете, приема алкоголя, интеркуррентных заболеваний, физического переутомления и других причин). Нередки нерезко выраженные диспепсические явления, легкая астенизация, слабость, быстрая утомляемость. Печень обычно не увеличена, мягка, безболезненна, функциональные пробы печени (за исключением Гипербилирубинемии) не изменены. Радиоизотопная гепатография изменений не выявляет. Селезенка не увеличена. Осмотическая резистентнотъ эритроцитов, продолжительность их жизни - нормальны. Пункционная биопсия при всех формах (кроме синдрома Дубина-Джонсона) изменений не выявляет.

· Синдром Жильбера

· Криглера-Найяра синдром

· Дубина-Джонсона синдром

· Ротора синдром

Течение при всех формах (кроме синдрома Криглера-Найяра) доброкачественное

Билет №9

1) 8. Санэпид режим в КДЛ. Меропря при контте с биоматм. 1. Прикз мз РБ №66от2 апр1993г «О мерах по сниже­нию заболти вир гепми в РБ». Приложение № 5. «Срва и Мды дезинф и стери­л». 2. Приказ мз РБ №351 ОТ 16дек1998 года«О пере­смотре ведомств норматх актов, регламентх вопр по проблеме ВИЧ/СПИД».Приложе №5.«Инстря по профке внутри­больничго зараж ВИЧ-инфй и предупрежя про­фессионго заражя мед работв». Приложение № 6. «Инстря по орги проф­ки заря ВИЧ через донор кровь». 3. Отраслевой стандарт ОСТ 42-21-2-85 «Стериля и де­зинфя изделий мед назначя (мды, срва и режимы Приказом Мз СССР № 770 ОТ 10 июня 1985 года вводится в действие с 1 января 1986 года. Ответть - на рукля КДЛ. -в мед халат, шапках, смен обу­ви, разбрызгивания - в маске, защит экране или очках, непро­мок фартуке и нарукавниках, резин перчат. Выбор одежды-от степени риска. - НЕ: есть, пить, ку­рить, пользся космет. -На раб столе-сосуд для стерилго пинц, тампв, салфк, стерилй цитрат Na д/промыв капилв, антисептик (70%спирт), дезраств (3% хлорамина) д/сбора ват шарв, 3% рром хлорамина.-избег укол,порез, закрыть лейкоплм или напальч. Рабть в перчат!-не брать из вены через иглу непоср в пробку. -не пипетир ртом- не использ стекляшки с битыми краями- пробирки закр и в контейнер-транспорт в штативах, помещх в контейн, биксы,пеналы, на дно- 4-слойная сухая салфетка. НЕ в картон короб, деревян ящик, по­лиэтилен пакетах. -бланки отдельно- дб выписки из инструктив­но-методичх докумв, аптечки для проведя экстр профил помощи -дезинфя инструмв в соотв с Прикм МЗ РБ N9 66 от 2 апр1993 г «О мерах по снижю заболти вир геп в РБ»и др 1. При контте с биожид-ми с наруш целти кож покрв (порезе, уколе): -снять перч рабоч повю внутрь;- выдавить кр;- обраб антисепт (70% спирт или 5% йод-при порез, 3% H2O2-при укол);-руки вымыть под проточ водой с мыл, протер 70% спиртом;- налож пласт, напальчник;- надеть новые перч.ЗАРЕГИСТР В ЖУРН АВАРЙ (если много попало),сдать на ВИЧ в день авари (для исключ заражя до авар), чз 6 месв. Контактире с инфиц матерм тестирся на ВИЧ сразу, чз 1,3 и 6 месяцев.2. без поврежд кож покрв: -обрабть антисептм (70% спирт, 3% Н2О2,);-промыть Н2О с мылом и обраб спиртом.3. на слиз оболки: -рот -пропоть 70% спиртом;- нос-закап 20-30% альбуцидом;-глаза промыть водой (чист руками), 20-30% р-ром альбуц.4. халат, одежду, обувь незначит колва биомат: -обеззараз перч перед снятием одежды;-снять ее- в пластик пакет;-в прачечную без предварит дезинф 5.значит колва: -обеззараз перч перед снят одеж- Замоч в дезинфект;-выдержь экспозицию по вирулицидному режиму соглно инстри по применю препарата;-\ в пластик пакет, в прачю;- Личн одеж: в пласт пакет; стир при 70°Смоющ срвом; Кожу под местом загрязн одеж: протер 70%спирм;-промыть с мылом,протер спирм;- обувь: двукратно протер ветошью, смочй в дез.срве.АПТЕЧ:напальч(перч),лейкопл,ножн,70%спирт,20-30%альб,5%йод,3% Н2О2,мешок пласт д/сбора загрязн одеж, инстря. РЕГИСТРЯ АВАР, НАБЛЮДЕ ЗА ПОСТРАДМИ:1.регистрирся,если больш кво вва.2.в журнал-фио пострадго, дата и время; -вид работы во время авар;харр авар; описе истка возмго заражя и его обсля на ВИЧ.- О происшй авар и проведх меропрх пострадй немедл сообщ заведму и старш медс отдя, ке информт главврча, врача-эпга и председля комис по ВБИ (в дн время), ответго дежур врача больнцы (в веч, ноч время и выход).тестире-выше Пострадй сотрк напрся:- в дн вр в Консульт-диспанс отде по ВИЧ-инф -в веч, ноч и выход– в прием отде гор клин инф бцы к врачу-инфекцту.Постконт профку антиретровир препми необх -в первые 2 ч после контта, не позже, чем чз 72 часа.

Обслед при приеме на раб, далее 1 р в год, не??обследна геп??

2) 68.Комбинированный пренатальный скрининг врожденных пороков развития. Биохимические маркеры (хорионический гонадотропин, альфа-фетопротеин, эстриол), в диагностике патологии беременности.

I. Скрининг 1-го триместра

Комбинированный тест (выполняется на 10-13 неделе беременности). Включает свободную субъединицу b -ХГЧ и PAPP - A и NT -УЗИ. В первом триместре PAPP-A и NT (затылочный размер плода на УЗИ) обычно увеличиваются с развитием беременности.

В первом триместре при беременности плодом с синдромом Дауна (СД) уровни PAPP - A в материнской крови, в среднем, в два раза меньше и NT увеличен примерно в 2 раза по сравнению с нормой. В этом тесте возможно определить 85% всех патологических плодов, в группе риска 5% женщин оказываются с патологией. Ограничения теста: не позволяет обнаружить дефекты открытой нервной трубки (нет АФП, поскольку определение АФП в первом триместре еще не имеет диагностической ценности для данного дефекта).

II. Скрининг 2-го триместра

Квадро-Тест (выполняется на 15-22 неделе беременности). Самый распространённый и общепринятый на сегодняшний день тест пренатального скрининга СД и трисомии 18.

Квадро-Тест - метод скрининга с использованием измерения четырех маркёров в материнской сыворотке. Это АФП, Е3, ингибин А и ХГЧ. Четыре серологических маркера и возраст женщины используются вместе для оценки риска беременности СД+ плодом.

В норме во втором триместре уровни АФП и Е3 растут (15% и 24% в неделю), уровень ХГЧ уменьшается и уровень ингибина медленно снижается перед 17 неделей и также медленно растёт после 17 недели. При беременности СД+ АФП и уровни Е3, в среднем, ниже Mom на 75%. Напротив, ХГЧ и ингибин А увеличены приблизительно в 2 раза.

III. Скрининг 3-го триместра

III. Интегральный тест - наиболее эффективный метод скрининга СД и трисомии 18. Тест выполняется в две стадии:

Первая стадия - проводится между 10 и 13 неделями гестации, когда берётся проба крови на анализ PAPP - A и параллельно проводится ультразвуковое исследование NT.

Вторая стадия - включает забор второй пробы крови приблизительно через 3-4 недели после забора первого образца на АФП, Е3, ингибин А и ХГЧ. Кровь оптимально берётся на 16-й неделе беременности, но возможно сделать анализ до 22 -й недели.

Эти пять биохимических маркеров (Mom концентраций маркеров рассчитывают только по сроку гестации, уточнённому на УЗИ!) + NT + возраст женщины используются для оценки степени риска.

Интегральный тест, хотя и основан на информации, полученной от двух образцов для анализа: и в первом и во втором триместрах, является новым подходом в пренатальной диагностике СД. Если рассчитать совокупный риск по результатам интегрального теста, то эффективность выявления СД у плода достигает 90% с 2% ложноположительных результатов. Интегральный тест применяется в настоящее время в 19 странах (2003 г.). Если используется сокращённый вариант скрининга, то чувствительность обнаружения СД+ плода намного ниже.

ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТА

Материнский вес, этническая группа и экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО)

Серологические уровни маркеров бывают снижены у полных женщин и повышены у хрупких женщин.

Серологические уровни АФП и ХГЧ выше и уровни ингибина ниже у женщин негроидной расы по сравнению с женщинами европеоидной расы.

Уровни ХГЧ и NT приблизительно на 10-15%, выше и уровни Е3 и PAPP - A примерно на 10-20% ниже у женщин, забеременевших в результате процедур ЭКО, по сравнению с женщинами с естественной беременностью.

Для этих групп сделаны соответствующие поправки.

Многоплодная беременность и инсулин-зависимый сахарный диабет

В первом и втором триместре серологические уровни маркеров повышены при многоплодной беременности.

уровни АФП снижены (приблизительно на 18%), в то время как уровни Е3 и ингибина снижены в меньшей степени (приблизительно на 6% и 12% соответственно) у женщин с инсулин-зависимым сахарным диабетом.

Невозможно достоверно рассчитать риск по этим факторам, ещё и потому, что один из плодов-близнецов может быть здоровым. Вклад каждого маркёра в оценку риска в этом случае точно рассчитать невозможно.

Диабет и многоплодная беременность, таким образом, являются противопоказаниями для скрининга беременности СД+ плодом.

Влагалищное кровотечение

Влагалищное кровотечение, произошедшее перед взятием пробы крови, может влиять на результат скрининга. Кровотечение может увеличивать уровень маркёров в крови матери. В этих условиях рекомендуется отложить анализ на одну неделю после остановки кровотечения.

Тест после амниоцентеза

Если амниоцентез был выполнен до взятия пробы крови, результат труднее интерпретировать из-за возможности трансфузии от плода к матери, в результате чего может повыситься уровень АФП.

Предыдущие беременности СД+ плодом

Если предыдущая беременность была СД+ плодом или с дефектом невральной трубки, то женщина относится к группе риска независимо от результатов пренатального скрининга, в этом случае всегда предлагается амниоцентез.

Влияние возраста матери

Вероятность рождения ребенка с СД растет вместе с возрастом матери и увеличивается в 200 с лишним раз в период от 25 до 50 лет (вероятность растёт от 1:1150 до 1:5).

Женщинам со скрининг-положительными результатами предлагается диагностический амниоцентез, который определяет патологию плода. Биохимический скрининг уменьшает в сотни раз число пациенток, которым назначается эта процедура, небезопасная для плода.

85. 3) Антигены эритроцитов (ABO, Rh, Kell), принципы определения, клиническая значимость. Лабораторные методы контроля в трансфузиологии.

Группы крови определяются различным сочетанием антигенов эритроцитов (агглютиногенов) и антигенов плазмы (агглютининов). Но понятие «группа крови» подразумевает все генетически наследуемые факторы, выявляемые в крови человека: сывороточные и клеточные факторы (эритроцитарные, лейкоцитарные, тромбоцитарные). Известно около 250 групповых антигенов, которые объединяются в системы. Для эритроцитов известно более 15 систем. Наиболее распространенная система – система АВО. Другие антигенные системы эритроцитов: *система Lewis, *система Kell, *система Duffy, групповая система MNS, система крови Резус, система Кидд.

Система групп крови АВО

Открыта в 1901г. Карлом Ландштейнером.

Аллели группы крови наследуются кодоминантно. Полиморфизм групп крови в системе определяется распространенностью и числом аллелей генов в популяции. Наиболее часто встречаются I и II группы.

Выделяют 4 группы крови в зависимости от сочетания агглютиногенов эритроцитов (А, В) и агглютининов плазмы (α, β). Уникальность системы АВО состоит в том, что в плазме у неиммунных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену: у лиц группы О (1) - антитела к А и В; у лиц группы А (П) - анти-В-антитела: у лиц группы В (ПI) – анти-А-антитела; у лиц группы АВ (IV) нет антител к антигенам системы АВО. Особенность анти-А-антител и анти-В-антител - способность к резкой активации комп­лемента, что обусловливает их клиническую значимость. При переливании АВО-несовместимой крови специфические антитела активируют комплемент, что ведет к внутрисосудистому лизису эритроцитов, развитию диссеминиро­ванного внутрисосудистого свертывания (ДВС) крови и острой почечной не­достаточности у реципиента.

Определение группы крови необходимо для совместимого переливания крови. Эритроциты донора не должны содеожать антигена, соответствующего антителам реципиента, т.е. А и α, В и β, так как иначе произойдёт массивный гемолиз введённых эритроцитов антителами реципиента.

Существуют разновидности (слабые варианты) антигена А (в большей степени) и реже антигена В. Что касается антигена А, имеются варианты: "сильный" А1 (более 80%), слабый А2 (менее 20%), и еще более слабые (А3, А4, Ах - редко). Это теоретическое понятие имеет значение для переливания крови и может вызвать несчастные случаи при отнесении донора А2 (II) к группе 0 (I) или донора А2В (IV) - к группе В (III), поскольку слабая форма антигена А иногда обуславливает ошибки при определении группы крови системы АВO. Правильное определение слабых вариантов антигена А может требовать повторных исследований со специфическими реагентами. Снижение или полное отсутствие естественных агглютининов альфа и бета иногда отмечается при иммунодефицитных состояниях: 1) новообразования и болезни крови - болезнь Ходжкина, множественная миелома, хроническая лимфатическая лейкемия; 2) врожденные гипо- и агаммаглобулинемия; 3) у детей раннего возраста и у пожилых; 4) иммуносупрессивная терапия; 5) тяжелые инфекции. Трудности при определении группы крови вследствие подавления реакции гемагглютинации возникают также после введения плазмозаменителей, переливания крови, трансплатации, септицемии и пр.

 

Определение групп крови по с-ме АВО:

1. При помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Устанавливают наличие или отсутствие агглютиногенов, делают заключение о групповой принадлежности крови.

2. Определение группы крови перекрёстным способом, т.е одновременно при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов. Определяют наличие или отсутствие агглютиногенов и групповых агглютининов.

3. Определение группы крови с помощью моноклональных антител (ЦОЛОКЛОНов).

Система групп крови Lewis

Антигены этой системы не синтезируются эритроидными клетками-предшественниками, а адсорбируются эритроцитами из плазмы. Антигены экспрессируются во многих тканях организма, в частности, на эпителии дыхательных, мочевыводящих путей, ЖКТ.

Антигены системы кодируются генами на 19 хромасоме.

Существует 3 главных фенотипа системы Lewis: 1. Le a⁺b^- 2. Le a^-b⁺ 3. Le a^-b^-

Антигены системы Le участвуют в воспалительном ответе. Они связывают нейтрофилы и моноциты с эндотелием сосудов и помогают им мигрировать через эндотелий во внесосудистые очаги воспаления. Лица с Le a^-b^- имеют дефект противоинфекционной резистентности.

Система групп крови Duffy

Гликопротеин Duffy – рецептор ростовых факторов, связывает цитокины, по структуре принадлежит к суперсемейству рецепторов, ассоциированных с G-белками. Функция до конца не изучена.

Групповая система Келл (Kell) состоит из 2 антигенов, образующих 3 группы крови (К—К, К—k, k—k). Антигены системы Келл по активности стоят на втором месте после системы резус. Они могут вызвать сенсибилизацию при беременности, переливании крови; служат причиной гемолитической болезни новорожденных и гемотрансфузионных осложнений. Наиболее иммуногенен KEL7.

Групповая система Кидд (Kidd) включает 2 антигена, образующих 3 группы крови: lk (a+b-), lk (A+b+) и lk (a-b+). Антигены системы Кидд также обладают изоиммунными свойствами и могут привести к гемолитической болезни новорожденных и гемотрансфузионным осложнениям.

Групповая система MNS является сложной системой; она состоит из 9 групп крови. Антигены этой системы активны, могут вызвать образование изоиммунных антител, т. е. привести к несовместимости при переливании крови; известны случаи гемолитической болезни новорожденных, вызванные антителами, образованными к антигенам этой системы.

Система крови Резус

Открыта в результате иммунизации кроликов кровью макак Резус.

Полиморфная система, подразделяется на 5 основных групп: D, C, c, E, e. Основная подгруппа – D, встречается у 80% европейцев и у 100% лиц монголоидной расы.

Антиген Rh экспрессируется на мембране эритроцита в присутствие вспомогательного гликопротеина Rh50. Аминокислотная последовательность этого белка имеет 40%-гомологию с белком Rh. Все белки Rh образуют структуру, 12 раз пронизывающую мембрану.

Обнаружена связь между Rh матери и гемолитической болезнью новорожденных (у Rh^- -матери образуются антитела к эритроцитам Rh⁺-плода).

Rh⁺-людей – 85%, Rh^--людей –15%.

Определение с помощью двух серий стандартных сывороток антирезус.

Антигенная система лейкоцитов и тромбоцитов

Лейкоциты имеют более 90 антигенов. Основные антигены лейкоцитов – антигены МНС первого типа (подгруппы А, В, С) и второго типа (подгруппы DR, DQ, DP).

Основные антигены тромбоцитов – 5 антигенов типа HPA (1, 2, 3, 4, 5). При участии антител к HPA развивается тромбоцитопеническая пурпура новорожденных, посттрансфузионная пурпура и развивается рефрактерность к траксфузиям тромбоцитов.

Билет№10