Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Топ:
Установка замедленного коксования: Чем выше температура и ниже давление, тем место разрыва углеродной цепи всё больше смещается к её концу и значительно возрастает...
Характеристика АТП и сварочно-жестяницкого участка: Транспорт в настоящее время является одной из важнейших отраслей народного...
Устройство и оснащение процедурного кабинета: Решающая роль в обеспечении правильного лечения пациентов отводится процедурной медсестре...
Интересное:
Отражение на счетах бухгалтерского учета процесса приобретения: Процесс заготовления представляет систему экономических событий, включающих приобретение организацией у поставщиков сырья...
Лечение прогрессирующих форм рака: Одним из наиболее важных достижений экспериментальной химиотерапии опухолей, начатой в 60-х и реализованной в 70-х годах, является...
Инженерная защита территорий, зданий и сооружений от опасных геологических процессов: Изучение оползневых явлений, оценка устойчивости склонов и проектирование противооползневых сооружений — актуальнейшие задачи, стоящие перед отечественными...
Дисциплины:
2022-10-29 | 19 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Антиглобулиновая сыворотка (АГС) – сыворотка крови кролика содержащая антитела против человеческих иммуноглобулинов (IgG), получают иммунизируя кроликов (IgG) человека;
Неполные антитела -_(моновалентные или блокирующие антитела) имеют один активный центр и не дают при соединении с антигеном видимых серологических реакций._Пример: резус-фактор
Варианты | Прямая проба Кумбса (одноступенчатая) | Непрямая проба Кумбса |
Принцип | Реакция агглютинации для выявления неполных антител, фиксированных на поверхности эритроцитов. | Реакция агглютинации для выявления неполных антител в сыворотке крови |
Исследуемый материал | Кровь из вены (взрослый пациент) или пуповинная кровь новорожденного | Сыворотка пациента |
Диагностические препараты | АГС | 1) Эритроциты группы 0 (I) Rh + 2) АГС |
Нарисовать схему | ||
Применение | 1) Диагностика гемолитической болезни новорожденных (ГБН) 2) Выяснение причин гемолитической трансфузионной реакции 3) Диагностика гемолитических анемий, обусловленных аутоиммунными реакциями или некоторыми препаратами | 1) Выявление неполных антител к эритроцитарным антигенам реципиента и донора перед проведением гемотрансфузии 2) Выявление анти-Rh-антител в крови матери 3) Диагностика приобретенной гемолитической анемии |
3. Методы оценки В-системы.
►Количественная оценка.
Определение количества В-лимфоцитов методом розеткообразования с эритроцитами мыши
Принцип метода: на 1 этапе из крови выделяют лимфоциты. На 2 этапе с помощью реакции розеткообразования с эритроцитами мыши определяют процент В-лимфоцитов от общего числа лимфоцитов. При добавлении к суспензии лимфоцитов эритроцитов мыши, последние адсорбируются В-лимфоцитами, а образующиеся при этом структуры называются розетками. Общее количество лимфоцитов подсчитывают под микроскопом по количеству розеток.
|
Кровь (10 мл) пациента вносят в пробирку с раствором гепарина и осторожно наслаивают на смесь фиколл-гипака, который способствует выделению лимфоцитов, и центрифугируют. После центрифугирования эритроциты оседают на дно пробирки, а лимфоциты располагаются тонким слоем на границе раствора фиколл-гипака и плазмы. Взвесь лимфоцитов осторожно извлекают из этого слоя (интерфазы), доводят до концентрации 4x106/мл –4x109/л) и смешивают с взвесью эритроцитов мыши в соотношении 1:1. Полученную смесь инкубируют при 37°С в течении 10 минут и снова центрифугируют, после чего выдерживают в холодильнике при температуре 4 °С в течение нескольких часов. Подсчет клеток производят в камере Горяева. Подсчитывают число “розеток” на 100 лимфоцитов и определяют процентное содержание В-лимфоцитов. Для определения абсолютного количества В-лимфоцитов в день исследования производят общий клинический анализ крови. В норме содержание В-лимфоцитов в периферической крови колеблется от 30 до 50% от общего количества лимфоцитов (в среднем 46,7±1,0%). Лимфоциты 19-37 % от общего числа лейкоцитов (4,0 – 9,0 х 10 9 – в 1 л крови).
Препарат мазок крови Окраска по Романовскому Увеличение 900 Метод выявляет маркер CD 20 на поверхности В-лимфоцитов; Содержание В-лимфоцитов – (CD 20) = 8-20% от общего числа лимфоцитов. |
►Качественная (функциональная) оценка
Определение концентрации иммуноглобулинов G класса в сыворотке крови методом простой радиальной иммунодиффузии по Манчини (в реакции преципитации).
Принцип метода: на стеклянную пластинку (или чашку Петри) наливают агар, смешанный с антителами против IgG. После застывания в агаре делают лунки диаметром 2 мм. В один ряд лунок вносят разведения стандартной сыворотки с известной концентрацией IgG. В другие лунки добавляют исследуемые сыворотки крови больных. Иммуноглобулины диффундируют в агар и на месте встречи с антителами, которые находятся в агаре, образуется зона кольца преципитации. Диаметр этого кольца зависит от концентрации Ig (чем больше Ig, тем больше диаметр). Измеряют диаметр зоны преципитации для трех разведений стандартной сыворотки и по ней на полулогарифмической бумаге строят график зависимости квадрата диаметра кольца преципитации (Д) от количества Ig в сыворотке крови. Затем измеряют диаметр кольца преципитации исследуемой сыворотки, наносят на построенный график и определяют концентрацию Ig. Стандарт IgG = 10-20 г/л.- содержание в крови у человека.
|
Вывод: диаметр кольца преципитации равен (2,5 мм)2 =6,25 концентрация иммуноглобулина ~ 5 г /л, т.е. она снижена (норма содержания в крови у здорового человека IgG = 10-20 г/л).
Реакция Кумбса - это антиглобулиновый тест для определения неполных антиэритроцитарных антител. Используется для выявления антител к резус-фактору у беременных женщин и определения гемолитической анемии у новорождённых детей с резус-несовместимостью, влекущей разрушение эритроцитов. Данный метод был предложен английским врачом Робертом Кумбсом в 1945 году, в связи с чем впоследствии получил название "реакция Кумбса".
Антиглобулиновая сыворотка - реагент, необходимый для проведения теста Кумбса. В состав антиглобулиновой сыворотки входят антитела к иммуноглобулинам человека. Сыворотка взаимодействует с эритроцитами, сенсибилизированными неполными антителами, что приводит к их агглютинации.
|
|
Типы оградительных сооружений в морском порту: По расположению оградительных сооружений в плане различают волноломы, обе оконечности...
Таксономические единицы (категории) растений: Каждая система классификации состоит из определённых соподчиненных друг другу...
История создания датчика движения: Первый прибор для обнаружения движения был изобретен немецким физиком Генрихом Герцем...
Адаптации растений и животных к жизни в горах: Большое значение для жизни организмов в горах имеют степень расчленения, крутизна и экспозиционные различия склонов...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!