Замораживание спермы быка в капиллярах, соломинках (пайеттах)

Перед получением спермы от производителя готовят холодильник, материалы и оборудование для оценки и разбавления спермы. Обеззараживают помещение лучами бактерицидных ламп.

При замораживании используют полипропиленовые трубочки емкостью 0,25 мл. Сперму разбавляют ЛФРМГЖ -лактозо-фруктозо-раффинозо-магниево-глицерино-желточной средой с таким расчетом, чтобы в соломинке (пайетте) содержалось не менее 10 млн. подвижных спермиев. Каждую соломинку маркируют с указанием наименования предприятия, клички и номера быка, даты получения спермы. После разбавления сперму расфасовывают по 0,25 мл. для этого используют машину, которая автоматически наполняет спермой соломинки и закупоривает их с обоих концов стерильными шариками. Один шарик используется как пробка-поршень, а другой герметизирует соломинку.

Соломинки можно наполнять спермой с помощью машины МНЗСили вакуумным способом. Для этого применяют специальную вакуумную камеру. Соломинки с одного конца закупоривают пробкой-поршнем, связывают в пачку и подвешивают к штативу камеры. На поддон камеры ставят стакан со спермой и насосом откачивают воздух до давления 0,92 атм., затем насос выключают, при помощи ручки поднимают поддон со спермой до погружения 169

открытых концов соломинок в сперму на 4-5 мм. После этого в камеру медленно впускают воздух, который нагнетает сперму в соломинки. Соломинки после наполнения их спермой раскладывают на штативе с зубцами посредством счетных реек. Затем штатив снимают с рейки и между его зубцами размещают соломинки. Штативы с соломинками помещают в пластмассовые коробки и ставят для охлаждения в холодильник при температуре 4° на 3-4 часа. Для замораживания допускают сперму с активностью не ниже 8 баллов.

Сперму замораживают в газообразном азоте на медном щите в стационарном хранилище КВ6202 при температуре -120-130° в течение 5 мин. Замороженную сперму в соломинках помещают в пластмассовые стаканы (в стакан входит до 500 соломинок) и хранят в стационарном хранилище в жидком азоте при температуре -196°.

Для хранения и транспортировки спермы на пункты искусственного осеменения используются матерчатые мешочки, которые помещают в сосуды Дьюара с жидким азотом. Сперму быков доставляют в хозяйства 3-4 раза в год и используют ее по мере надобности. Один раз в месяц необходимо пополнять сосуды жидким азотом, в которых хранится сперма.

Высокая оплодотворяемость коров при искусственном осеменении обеспечивается применением только высококачественной

Рис. 56. Расфасовка спермы в соломинки. 170

спермы. Поэтому перед каждым осеменением животных необходимо проводить тщательную проверку качества спермы.

Для проверки активности спермы, сохраненной при температуре 2-4°, открывают термос, достают из него флакон, осторожно перемешивают в нем сперму (путем вращения флакона), затем берут каплю спермы, наносят на предметное стекло, рядом с ней -каплю 2,8%-ного раствора лимоннокислого натрия, смешивают их, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом при температуре 38-40° на обогревательном столике.

Гранулы замороженной спермы быка оценивают после оттаивания в теплом (38-40°С) 2,8%-ном растворе лимоннокислого натрия объемом 1 мл. Каплю спермы исследуют под микроскопом по указанной методике.

Гранулы замороженной спермы объемом в 0,5 мл оттаивают во флаконе, погруженном в биотермостат с водой, при температуре 38-40°, каплю спермы исследуют под микроскопом.

Сперму в облицованных гранулах оттаивают, помещая их в биотермостат с температурой 38-40°Сна 5-10 с до появления тонкого стерженька льда. Затем оценивают активность спермиев по указанной методике.

Соломинки (пайетты) с замороженной спермой перед осеменением оттаивают в биотермостате при температуре 38-40°Св течение 10-14 с. Содного конца соломинки (выборочно) стерильными ножницами срезают пробку. Затем каплю спермы и 2,8%-ого раствора лимонно-кислого натрия наносят на предметное стекло и производят оценку.

Для искусственного осеменения коров и телок замороженную сперму после оттаивания допускают с оценкой активности спермиев не ниже 4 баллов.

Помните! На всех этапах замораживания нельзя допускать хотя бы кратковременного нагревания гранул и стаканчиков.

Для проверки активности спермиев после замораживания и перед использованием спермы для осеменения самок сперму оттаивают в теплом 2,9%-ном растворе цитрата натрия. Для этого стерильной пипеткой отмеривают в стерильный пенициллиновый флакон 1 мл свежеприготовленного раствора цитрата натрия, закрывают пробкой и ставят в биотермостат или на водяную баню (следя, чтобы вода не попала внутрь флакона) при температуре 40°С. Охлажденным до температуры жидкого азота длинным анатомическим пинцетом извлекают из чашечки или мешочка гранулу спермы, и быстро опускают в нагретый раствор. Пинцет следует держать рукой в кожаной перчатке, чтобы избежать ожогов. Для ускорения оттаивания гранулы следует слегка покачивать 171

флакон. Сразу же после растаивания гранулы флакон извлекают из теплой воды.

Раствор цитрата натрия (2,9%-ный) готовят на химфармзаводах в стерильных условиях, расфасовывают по флаконам или ампулам и реализуют через племпредприятия.

Активность спермиев после оттаивания, определяют на электростолике при температуре 38-40°С. Для хранения и осеменения коров и телок, допускается сперма с активностью не ниже 4 баллов.

Транспортировка спермы позволяет зоотехнику-селекционеру стать независимым в своей работе от территориального размещения животных и производить подбор скрещиваемых пар. Это важно для максимального использования лучших производителей и проведения селекционно-племенной работы.

Племпредприятия отправляют сперму в ООО, ЗАОпо их заявкам в соответствии с заключенными договорами. Для этого необходимое количество расфасованной спермы укладывают в сосуд Дьюара и отправляют адресату. Всопроводительной, указываются дата получения спермы, кличка производителя, оценка спермы по густоте и подвижности, степень разбавления, количество доз, кому направляется сперма. Вместе со спермой в хозяйство направляется также ордер или накладная в двух экземплярах.

При транспортировке спермы должна быть обеспечена сохранность ее от механических повреждений, взбалтывания, перевертывания, воздействия высокой и низкой температур.

При перевозке спермы с племпредприятий на пункты искусственного осеменения, чаще всего используют автомашины. Можно также перевозить ее поездом, пароходом, самолетом или конным транспортом. При любом способе перевозки спермы необходимо обязательно придерживаться следующих правил.

1. Не допускать сильного встряхивания спермы.

2. Поддерживать необходимую температуру (около 0, -196°Си т.д.) и не допускать быстрого израсходования охладителей.

3. Не допускать повреждений сосудов со спермой.

4. Точно маркировать сосуды со спермой, обозначая номер и кличку производителя.

5. Сперму завозить в сроки и в количестве, необходимом хозяйству.

6. Оберегать сперму от действия прямых солнечных лучей, а также от пыли. 172

Техника безопасности при хранении спермы

в жидком азоте

Жидкий азот -это прозрачная, бесцветная, легко испаряющаяся жидкость с плотностью 0,804 кг/л. Производят его путем сжижения газообразного азота.

При попадании на открытые участки тела жидкий азот вызывает ожоги. Поэтому при работе с жидким азотом нужно тщательно защищать лицо, глаза, руки. Обязательно надевать защитные очки, рукавицы. Брюки должны быть без манжет.

При получении жидкого азота нужно взять от представителя ОТКпредприятия-поставщика сертификат на жидкий азот с указанием его чистоты в процентах. Заливать жидкий азот в сосуды Дьюара надо медленно. При этом запрещается заглядывать в горловину сосуда, так как возможны выбросы азота наружу. Если азот переливают из другого сосуда, то лучше лить через широкую металлическую воронку небольшими порциями.

При заливке сосудов из транспортных резервуаров нужно опускать гибкий шланг до дна, иначе струя азота может выбросить шланг из сосуда и облить стоящих рядом людей.

Кэксплуатации транспортных цистерн с жидким азотом допускаются лица изучившие инструкцию. На длительное хранение замороженная в жидком азоте сперма закладывается в сосуды Дьюара емкостью 50 л и стационарные биохранилища емкостью 200-500 л.

Помещения, где находятся сосуды Дьюара, должны быть оборудованы вентиляцией. Курение в этих помещениях категорически запрещается. При резком повышении концентрации азота и снижении кислорода в помещении до 16%, человек теряет сознание. При обморочном состоянии пострадавшего необходимо вывести из помещения на свежий воздух.

Запрещается оставлять на отогрев после испытаний сосуды Дьюара, потерявшие вакуум (покрывшиеся слоем инея) в помещении, где могут находиться (или проходить) люди, т.к. может произойти взрыв. Особую осторожность следует соблюдать при оттаивании глубоко замороженной спермы в соломинках, облицованных гранулах, пакетах, так как, проникший внутрь вследствие плохой герметизации жидкий азот при оттаивании быстро испаряется, резко увеличивает давление и разрывает оболочку.

Для извлечения из сосудов Дьюара замороженной спермы используют предварительно охлажденный металлический корнцанг или большой пинцет, концы которых должны быть плотно затянуты полиэтиленовой или резиновой трубкой нужного диаметра. 173

 3

  

      174

Глава 1. организация естественнойслучкииискусственногоосеменения самоксельскохозяйственныхживотных

Внастоящее время в животноводческой практике применяется как естественное так и искусственное осеменение самок сельскохозяйственных животных.

Естественное осеменение происходит при половом акте, т. е. при непосредственном контакте самца и самки.

Способы естественного осеменения подразделяются на два вида: вольную и ручную случку.

Вольная случка, когда самец постоянно находится в стаде самок, самостоятельно находит самок в охоте и покрывает их. Причем одну и ту же самку он покрывает иногда по нескольку раз. Но бесконтрольное использование самца приводит к нарушению режимов половой нагрузки (эксплуатации) и снижению его половой потенции. Могут распространяться инфекционные и инвазионные заболевания, передающиеся посредством полового акта (бруцеллез, вибриоз, трихомоноз и др.). Нет своевременного учета покрытых животных. Нагрузка при этом на производителя в среднем составляет 30 самок.

Разновидность вольной случки в коневодстве - косячная и варковая; а в овцеводстве - классная.

Рис. 57. Естественная случка. 175

При косячной случке в табуне или косяке из 20-25 кобыл находится один полновозрастной жеребец-производитель. Табун пасется круглосуточно под наблюдением табунщика, который и регистрирует случки. Применяется этот метод в табунном коневодстве.

При варковой случке намеченных к покрытию кобыл помещают в варок или баз и туда же на несколько часов 2 раза в сутки выпускают жеребца-производителя, обычно утром и вечером. Востальное время суток самки содержатся отдельно от самца.

Классная случка применяется в овцеводстве. При этом подбирают по определенным признаком группы овцематок и осеменяют их на пастбище специально подобранным бараном-производителем; средняя нагрузка на производителя 25-30 самок.

Гаремное спаривание - к барану прикрепляют определенное количество овцематок соответствующего качества. Баран пасется вместе с овцематками и осеменяет их.

В звероводстве перед спариванием для каждого производителя подбирают по 5-8 самок, затем по одной подсаживают в клетку к самцу, а после полового акта немедленно удаляют. Через час целесообразно повторить спаривание -это повышает оплодотворяемость и многоплодие самок.

Ручная случка -когда проводят индивидуальный подбор маток к производителям. При этом половой акт протекает под непосредственным контролем техника-осеменатора (скотника), который ведет точный учет осеменений, регулирует и контролирует половую нагрузку.

При ручной случке за одним быком закрепляется 60-80 коров, за бараном -80-100 овец, за жеребцом -до 60 кобыл и за хряком -до 30 свиноматок.

Впастбищный период ручную случку производят на открытых площадках или под навесом. Встойловый период выбирают закрытые помещения (манеж, просторный тамбур т. п.). Но нужно помнить, что наличие посторонних предметов, различных звуков и других раздражителей в манеже, где происходят случки, неблагоприятно сказывается на проявлении половых рефлексов. Самцов и самок регулярно исследуют на вибриоз, трихомоноз, бруцеллез и другие заразные болезни. У самцов исследуют качество спермы.

Перед случкой обязательно наружные половые органы самок и самцов обмывают теплой водой. У кобыл корень хвоста бинтуют, отводят в сторону и фиксируют, тазовые конечности расковывают, в необходимых случаях надевают случную шлею. Жеребца рекомендуется расковывать. Производителям перед садкой и после нее делают проводку. После случки самку выдерживают в станке, а при беспокойстве проводят на поводу. Проведением ручной случки 176

поручают опытным специалистам во избежание нарушений правил осеменения животных, так спаривание жеребца с кобылой повторяют до отбоя через каждые 24-36 ч.