Определение вирулентности микробов.

Формы инфекции: экзогенная, эндогенная, очаговая, генерализированная, моно- и смешанная, вторичная инфекция, реинфекция, рецидив, суперинфекция, инаппарантная инфекция.

 

Экзогенная инфекция возникает в результате заражения человека патогенными микроорганизмами. Поступающими из окружающей среды с пищей. Водой. Воздухом. Почвой, выделениями больного человека, реконвалесцента и микробоносителя.

Эндогенная инфекция вызывается представителями нормальной микрофлоры – условно – патогенными м/о самого индивидуума. Она часто возникает при иммунодефицитных состояниях организма.

Очаговая инфекция, – при которой м/о локализуются в местном очаге и не распространяются по организму. Например, при фурункулезе стафилококки находятся в волосяных фолликулах. При ангине стрептококки обнаруживаются в миндалинах, при конъюнктивитах возбудитель локализуется на конъюнктиве глаза.

Генерализованная инфекция, – при которой возбудитель распространяется по организму лимфогенным или гематогенным путями.

Моноинфекция вызывается одним видом м/о.

Смешанная инфекция – вызывается двумя и более видами м/о.

Вторичная инфекция, - при которой к первоначальной. основной. Уже развившейся болезни присоединяется другая. Вызываемая новым возбудителем. Например, при заболевании брюшным тифом может возникнуть пневмония, вызванная другими бактериями или вирусами.

Реинфекция – заболевание, возникающее после перенесенной инфекции в случае повторного заражения тем же возбудителем, например реинфекции при дизентерии, гонорее. При других болезнях, перенесение которых не завершается образованием напряженного иммунитета.

Суперинфекция – в тех случаях когда инфицирование м/о тем же возбудителем происходит до выздоровления.

Рецидивом называют возврат клинических проявлений болезни без повторного заражения за сет оставшихся в организме возбудителей, например рецидивы при рожистом воспалении, остеомиелите, возвратном тифе.

 

Факторы, влияющие на развитие инфекции.

См вопрос № 1

Систематика заразных болезней по механизму передачи. Понятие о респираторных, кишечных, кожно-венерических инфекциях, антропонозах, зоонозах.

Антропоноз – источник инфекции человек.

Зооноз – источник инфекции животное.

Кишечные инфекции – передаются фекально-оральным путем

Респираторные – передаются воздушно-капельным путем. Пылевым.

Кровяные – трансмиссивным, через укусы блох, вшей, клещей.

Инфекции кожных покровов и слизистых – при прямом контакте (половой), бытовой. Через предметы быта.

 

Источники инфекции и механизмы передачи.

Инфекции могут передаваться:

1. фекально – оральным путем (кишечные инфекции);
2. воздушно-капельным путем (респираторные);
3. трансмиссивным путем (через укусы блох, вшей, клещей);
4. при прямом контакте;

Источники инфекции:

 

Колонизация

Представляет собой процесс размножения микробов в месте адгезии. Эта стадия обеспечивает накопление микроорганизмов до такой критической концентрации, которая способна вызвать патологическое действие.

Инвазия

Вирулентность патогенных микроорганизмов может проявиться в инвазии, т.е. проникновении через слизистые и соединительнотканные барьеры в подлежащие ткани. Эту способность связывают с продукцией таких ферментов, как гиалуронидаза и нейраминидаза. Гиалуронидазу образуют Clostridium perfringens, некоторые бактерии родов Streptococcus,Staphylococcus и др. Данный фермент специфически расщепляет гиалуроновую кислоту, входящую в состав межклеточного вещества, тем самым повышая проницаемость слизистых оболочек и соединительной ткани.

 

Фагоцитоз. Фагоцитирующие клетки. Основные стаи фагоцитоза и их характеристика. Фагоцитарные показатели. Завершенный и незавершенный фагоцитоз. Ферменты фагоцитов. Значение факторов приобретенного иммунитета в фагоцитозе.

 

Стадии фагоцитоза:

1. Хемотаксис и опсонизация.
2. Хемотаксис – приближение фагоцита к объекту фагоцитоза. Индуцируется хемоатрактантами.

 

Хемоатрактанты.

Эндогенные	Экзогенные
Белки в плазме крови С5, каллекреин, фибриноген - продукты распада нейтрофилов – лимфокины, монокины -простагландины	ЛПС Гр «- «бактерий -некоторые лекарства -иммностимуляторы

 

Опсонизация – окружение объект фагоцитоза молекулами комплемента, а в иммунном организме молекулами антител.

1. Прикрепление и прилипание опсонизированных частиц к фагоциту. Есть рецепторы к такой клетке.
2. Поглощение частиц и формирование фагосомы – внутри находятся микробы для уничтожения.

 

Фагоциты:

-микрофаги

-макрофаги

Макрофаги – морфологически разнородные, но одинаково функционирующие клетки, способны к фагоцитозу

Свободно-циркулирующие – моноциты, подвижны.

Фиксированные (сидят в органах) – альвеолярные, перитонеальные, никроглия, остеокласты, куперовские клетки долго живущие, живут до нескольких месяцев, до 2-3 лет.

Микрофаги:

-нейтрофилы

- базофилы

- эозинофилы.

                                                           

 

Бактерицидная система фагоцитов

 

1. Миелопероксидазная система в результате окисления субстратов образуется биооксиданты (перекись водорода, вода).
2. Лактоферрин
3. Лизоцим – повреждает КС
4. Катионы белка – повреждают КС
5. Слияние фагосомы с лизосомами и переваривание убитых микробов.

 

Фагоцитоз может быть незавершенным, микробы не погибают, а размножаются в организме. Погибает фагоцит; при патологии; хронизация инфекционного процесса.

 

Лизоцим

Лизоцим представляет собой термостабильный белок типа муколитического фермента. Он содержится в тканевых жидкостях животных и человека – в слезах, слюне, перитонеальной жидкости, плазме и сыворотке крови, в лейкоцитах, материнском молоке и др.

Лизоцим продуцируется моноцитами крови и тканевыми макрофагами. Он вызывает лизис многих сапрофитных бактерий, оказывая менее выраженное литическое действие на ряд патогенных микроорганизмов и не активен в отношении вирусов.

Механизм бактериологического действия лизоцима состоит в гидролизе связей между М 0 ацетилмурамовой кислотой и N – ацетилглюкозамином в полисахаридных цепях пептидогликанового слоя клеточной стенки бактерий. Это приводит к изменению ее проницаемости, сопровождающемуся диффузией клеточного содержимого в окружающую среду, и гибели клеток.

 

Комплемент. Его значение в иммунологических реакциях. Фракции блоки комплемента, их роль в лизисе клетки. Классический и альтернативный путь активации комплемента. Клинико-лабораторная оценка активности комплемента.

 

Системой комплемента называют многокомпонентную, самособирающуюся систему белков сыворотки крови, которая играет важную роль в поддержании гомеостаза. Она способна активироваться в процессе самосборки, т.е последовательного присоединения к образующемуся комплексу отдельных белков, которые называются компонентами, или фракциями комплемента. Таких фракций известно девять. Они продуцируются клетками печени. Мононуклеарными фагоцитами и содержатся в сыворотке крови в неактивном состоянии.

Процесс активации комплемента может запускаться двумя разными путями. Получившими названия классический и альтернативный.

При активации комплемента классическим путем инициирующим фактором является комплекс антиген-антитело (иммунный комплекс). Причем антитела только двух классов IgG и IgM  в составе иммунных комплексов могут инициировать активацию комплемента благодаря наличию в структуре их Fс-фрагментов, связывающих Cl- фракцию комплемента. При присоединении Cl к комплексу антиген-антитело образуется фрагмент (Cl-эстераза), под действием которого формируется энзиматически активный комплекс (C4b, С4а), называемый С3 – конвертазой. Данный фрагмент расщепляет С3 на С3а и С3b. При взаимодействии субфракций С3b с С4 и С2 образуется пептидаза, действующая на С5. Ели инициирующий иммунный комплекс связан с клеточной мембраной, то самособирающийся комплекс С1, С4,С2, С3 обеспечивает фиксацию на ней активированной фракции С5, а затем С6 и С7. Последние три компонента совместно способствуют фиксации С8 и С9. при этом два набора фракций комплемента – С5а, С6, С7, С8 и С9 – составляют мембраноатакующий комплекс, после присоединения которого к клеточной мембране клетка лизируется из-за необратимых повреждений структуры ее мембраны. В том случае. Ели активация комплемента по классическому пути происходит при участии иммунного комплекса эритроцит – антиэритроцитарный Ig. Происходит гемолиз эритроцитов; если иммунный комплекс состоит из бактерий и антибактериального Ig, происходит лизис бактерий (бактериолизис).

Таким образом, при активации комплемента классическим путем ключевыми компонентами являются С1 и С3. продукт расщепления которого C3b активирует терминальные компоненты мембраноатакующего комплекса (С5 –С9).

Существует возможность активации С3 с образованием C3b при участии С3-конвертазы альтернативного пути. Т.е минуя первые три компонента: С1, С4 и С2. Особенность альтернативного пути активации комплемента состоит в том, что инициация может происходить без участия комплекса антиген – антитело за счет полисахаридов и ЛПС бактериального происхождения – ЛПС КС Гр»-«бактерий. Поверхностных структур вирусов, иммунных комплексов. Включающих IgA и IgE.

 В альтернативном пути активации комплемента необходимо участие сывороточного белка. Названного пропердином, который активен лишь в присутствии ионов Mg  и требует участия еще двух сывороточных белков: факторов B и D. Фактор D в активной форме является протеиназой, расщепляющей фактор В с образованием фрагмента Bb. Последний способен в комплексе с С3b играть роль С3 – конвертазы альтернативного пути. Функция самого пропердина заключается в стабилизации комплекса C3b Bb.

Фракции комплемента при их активации классическим или альтернативным путем выполняют ряд эффекторных функций:

1) Мембраноатакующий комплекс опосредует цитолитическое или цитотоксическое действие специфических антител на клетки –«мишени»;

2) Анафилотоксины участвуют в иммунопатологических реакциях;

3) Компоненты комплемента изменяют физико-химические свойства иммунных комплексов; уменьшают степень агрегации и эффективность их фагоцитоза через Fc-рецепторы;

4) Фрагмент C3b способствует связыванию и захвату иммунных комплексов фагоцитами, опсонизируя объекты фагоцитоза; фрагменты C3b,С5а иBb. Обладающие свойствами хемоаттрактантов. Участвуют в развитии воспаления.

 

 

В здоровом организме идет довольно интенсивное потребление комплемента за счет постоянного формирования иммунных комплексов, например с антителами против антигенов бактериальной аутофлоры. Поэтому белки системы комплемента быстро обновляются, отличаясь высокой скоростью катаболизма. Потребление комплемента может резко возрастать при разных видах патологии. Связанных с усиленным образованием иммунных комплексов при инфекциях и иммунопатологических состояниях.   

 

 

Функции комплемента:

1. Участвует в реакциях иммунного лизиса, лизирует Гр»-«бактерии, клетки.

2. Участвует в реакциях гиперчувствительности нормального типа

3. Индуцирует воспаление в месте наличия иммунных комплексов антиген-антитело

4. Участвует в работе свертывающей системы крови

5. Является мощным хемоаттрактантом усиления фагоцитоза. С3а-C3b,С5а,С4а.

 

- Опсонизирует объекты фагоцитоза

-Т-проницаемость сосудов

- вызывает дегрануляцию тучных клеток

- стимулирует систему свертывания крови

 

 18. Неспецифические факторы противовирусной защиты.

 

1. Антигенная структура бактериальной клетки. Основные свойства микробного антигена. Протективные свойства микробных антигенов. Микробная мимикрия.

 

Антигенами называют вещества любого происхождения. В том числе и микробного, которые способны вызвать в организме специфическую иммунную реакцию и принимать участие в е осуществлении. Антигены могут оказывать иммунногенное действие – вызывать гуморальный иммунный ответ и клеточный ответ либо толерогенное действе, т.е. обуславливать развитие иммунологической толерантности – ареактивности к последующему иммуногенному воздействию антигена.

Различают полные и неполные антигены, или гаптены. Последние – относительно простые вещества, способные участвовать в иммунологических реакциях, но не способны активировать АПК и самостоятельно индуцировать иммунный ответ. Лишь после присоединения к крупным, обычно белковым молекулам (носителям), гаптен сможет приобрести свойства полного антигена.

Практически все природные субстраты. Обладающие антигенными свойствами. Являются комплексами нескольких антигенов. Микробная клетка обладает множеством антигенов, свойственных отдельным ее структурам. Даже индивидуальные молекулы могут обладать несколькими антигенами.

 Основными свойствами антигена являются:

Специфичность. Уникальное биологическое явление, которое лежит в основе иммунологических взаимодействий в организме, а также лабораторных методов определения разных антигенов, серодиагностики, методов специфической профилактики и терапии инфекционных заболеваний.

Структура, обладающая антигенной специфичностью, называется антигенным детерминантом, или эпитопом. Антигенной активностью обладают только структуры, лежащие на поверхности молекулы.

Чужеродность. Антиген вызывает позитивный иммунный ответ только в тех случаях, когда он чужероден, т.е. обладает структурами, отсутствующими в данном организме. К собственным антигенам организм толерантен.

Собственные антигены организма могут подвергаться модификации при действии внешних химических или физических факторов или вступать в контакт с чужеродными веществами гаптенной природы. В результате формируются антигены, гаптенная часть которых – чужеродная структура, а носитель – собственный антиген. Такие модификационные антигены часто служат причиной развития аллергических реакций.

Иммуногенность и толерантность – альтернативные свойства антигенного субстрата. Для индукции иммунного ответа и толерантности необходимо воздействие антигена на лимфоцит, обладающий рецепторами для данного антигена – антиген-реактивную клетку (АРК). Отличия состоят в том, что при индукции позитивной иммунной реакции АРК получает стимулы от цитокинов. Обеспечивающие из пролиферацию и формирование клона эффекторных клеток. При индукции иммунологической толерантности АРК не подвергается дальнейшей стимуляции и либо погибает, либо лишается рецепторов к антигену.

Формирование иммунологической толерантности Т-ив-лимфоцитов к собственным антигенам, как уже отмечалось, происходит в организме постоянно и созревающие лимфоциты. Обладающие рецепторами к аутоантигенам, гибнут в результате контакта с ними в тимусе или костном мозге. Чужеродные антигены в иммунологически полноценном организме встречают преимущественные условия для иммуногенного действия и лишь при особых ситуациях проявляют толерогенные свойства. Это наблюдается:

1. При действии антигена в условиях неспособности организма обеспечить стимуляцию клеток. Вошедших в контакт с антигеном в случаях действия иммунодепрессивных факторов, способствующих иммуногенезу (незрелость организма, беременность).

2. При отсутствии стимуляции активного иммунного ответа, вследствие недостаточной дозы антигена («низкодозная» толерантность), сверхбольшой дозы антигена («высокодозная» толерантность ли иммунологический паралич)

3. При попадании антигена в структуры, не формирующие позитивный иммунный ответ («пероральная» толерантность).

 

Для характеристики иммунологической толерантности следует отметить, что чувствительность Т- и В-лимфоцитов к индукции толерантности различна: Т-лимфоциты более чувствительны к индукции толерантности, чем В-лимфоциты. И сохраняются толерантными более длительное время. Поэтому в организме может возникнуть ситуация, когда Т-лимфоциты толерантны к данному антигену, а В- лимфоциты не толерантны.

4. Сенсибилизирующая активность – повышенная чувствительность организма. Антигены. Которые могут вызвать гиперчувствительность немедленного типа или замедленного типа.

5. Адъювантность – способность некоторых антигенов усиливать иммунный ответ на другие иммунные антигены.

6. Иммунодепрессантное действие.

7. Толерантность – на них иммунная система не отвечает иммунной реакцией – заболевание протекает длительно.

 

Протективные свойства – свойства, которые стимулируют реакции, носящие замкнутый характер.

Антигенная мимикрия – когда микробы маскируются под антигенный состав некоторых тканей – аутоиммунный ответ.

 

Определение вирулентности микробов.

Вирулентность м/о определяется минимальной смертельной дозой (DLM), т.е наименьшим их количеством. вызывающим гибель определенного вида животных. Для ее установления различные количества микробов вводят восприимчивым животным, причем способ ведения (под кожу, внутрибрюшинно) установлен заранее.

DLM может определяться у культур с жидкой, или плотной питательной средой

 В бульонной культуре стерильно производят ее десятикратные разведения, затем животным вводят определенный объем каждого разведения. При определении DLM агаровой культуры стерильно производят смыв роста физиологическим раствором. После чего взвесь микробов стандартизируют по оптическому стандарт и заражают животных различным количеством микробных тел.

DLM разных микробов резко варьирует в зависимости как от их вида. Так и от взятого в опыт штамма.

  Определение DLM бульонной культуры пневмококка. В ряд пробирок градуированной пипеткой наливают по 1.8 мл физиологического раствора. Затем в первую пробирку вносят 0.2 мл суточной бульонной культуры пневмококка и тщательно перемешивают. Получается разведение в 10 раз. Затем о.2 мл переносят из первой пробирки во вторую и.д до получения разведения пневмококка равного 10 в минус 8 – 10 в минус 9. каждое разведение готовят специальной пипеткой. После этого производят внутрибрюшинное заражение мышей 0.2 мл каждого разведения.

При проведении заражения животных одним и тем же шприцем необходимо начинать опыт с ведения больших разведений культуры.

Критерии патогенности:

· Инфективность – способность микробов находясь в окружающей среде сохранять свои вирулентные свойства и попадая в организм вызывать инфекционный процесс (туберкулезная палочка)

· Инвазивность - способность микробов проникать в организм человека, распространяться и размножаться там, она обусловлена:

1. адгезия – механизм: взаимодействие рецепторов по принципу комплиментарности.

2. колонизация – микроб начинает активно размножаться

3. собственно проникновение. Продуцирует ферменты повышающие проницаемость клеточно –тканевых барьеров: гиалуронидаза, нейраминидаза, коллагеназа,фибринолизин.

4. Факторы, ингибирующие фагоцитоз (капсула у бактерий и капсулоподобная оболочка)

1. Факторы инвазии микроорганизмов. Факторы патогенности. Ферменты бактерий как фактора инвазии и аграсии.

См вопрос № 2

1. Факторы адгезии. Лиганд-рецепторное узнавание, механизмы реакции.

Феномен адгезии состоит из нескольких этапов, в результате которых микробные клетки прикрепляются ли прилипают к поверхности эпителия. С одной стороны, в этом процессе, задействованы неспецифические физико-химические механизмы, обеспечивающие контакт между клетками возбудителя и организма хозяина и связанные с гидрофобностью микробных клеток, суммой энергий отталкивания и притяжения. С другой стороны. Способность к адгезии определяется специфическими химическими группировками определенного строения – лигандами, находящимися на поверхности микроорганизмов, и рецепторами клеток, которые должны соответствовать друг другу. В противном случае адгезия не происходит.

Адгезины, отвечающие за прилипание возбудителя к клеткам микроорганизма, очень разнообразны. Их уникальное строение, свойственное определенным видам и даже штаммам, обуславливает высокую специфичность данного процесса. Этим объясняется способность одних микроорганизмов прикрепляться и колонизировать преимущественно эпителий дыхательных путей. Других – кишечного тракта. Третьих – мочевыделительной системы.

 

1. Экзотоксины и эндотоксины. Природа и свойства. Механизмы действия экзо-эндотоксинов. Отличия экзо-эндотоксинов.

 

Экзотоксины – во внешнюю среду	Эндотоксины – входят в состав клеточной стенки
Белки	Менее токсичны
Высокотоксичны	Термостабильны
Термолабильные	Вызывают единый симптомокомплекс (однотипная реакция – пирогенная реакция)
Выражена специфичность. Иммуногенность (благодаря рецепторам)	Не инактивируются
Инактивируются формалином – анатоксин)	Менее иммуногены

Механизм действия экзотоксинов:

1. Цитотоксины - в клетке блокируют синтез белка – (токсин дифтерийной палочки)
2. Мембранотоксины – разрушают фосфолипиды клеточных мембран – клетка лизируется.
3. функциональные Блокаторы – активируют аденилатциклазу эпителиальных клеток кишечника, в результате идет потеря воды и солей кишечника – диарея.
4. эксфоллатины, эритрогенины – нарушают взаимодействие между клетками.

 

Эндотоксины.

 У людей при попадании эндотоксинов в кровное русло приводит к лихорадке в результате их действия на клетки крови (гранулоциты, моноциты), из которых выделяются эндогенные пирогенны. Начало лихорадки совпадает с ранней лейкопенией, которая сменяется вторичным лейкоцитозом. В результате усиления гликолиза в клетках разных типов может возникнуть гипогликемия.

При эндотоксинемии имеет место гипотония в результате поступления в кровь повышенного количества серотонина и кининов, а также нарушение кровоснабжения органов и ацидоз. ЛПС активирует фракцию С3 комплемента по альтернативному пути, что приводит к снижению его уровня в сыворотке крови и накоплению биологически активных фракций (С3а,С3b,С5а и др.). большие количества поступившего в кровь эндотоксина приводят к токсико – септическому шоку.

 

1. Пути проникновения микробов в организм больного, тропизм микробов.