Окраска препарата простым методом

 

Цель:                  изучить метод окраски препарата

                    простым методом 

Оснащение:          предметное стекло, культура микробов,

                    краски, вода, спиртовка, бактериальная

                    петля

 

Техника выполнения: I. Нанести культуру микробов на

                    поверхность предметного стекла.

                    II. Высушить мазок при комнатной t

                    III. Зафиксировать в пламени горелки,

                    проведением предметного стекла мазком    вверх через

                    пламя спиртовки 3 раза (5-6)

                    IV. Нанести краску на мазок, держать водный фуксин 1-2 мин, или метиленовый синий (3-5мин)

                   

                    V. Промыть струей воды, до тех пор пока вода не станет бесцветной.

                    VI. Высушить мазок на воздухе.

                    VII. Микроскопия мазка.

 

Возможные ошибки:

1. Неточно выдержано время окраски мазка

 

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТА ИЗ КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ, ВЫРАЩЕННЫХ НА ЖИДКОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЕ

 

 

Цель:          изучить методику приготовления препарата

 

Оснащение:     штатив, предметные стекла, физ.раствор,

               бактериальная петля, спиртовка, суточная

               культура микробов, выращенная на жидкой

               питательной среде.

 

Техника выполнения:

 

1. Взять чистое обезжиренное стекло.

2. Нанести культуру микроба с жидкой питательной среды прожженной бактериальной петлей на центр предметного стекла, распределить равномерно по поверхности стекла в форме 2-х копеечной монеты.

3. Высушить мазок на воздухе.

4. Фиксировать в пламени спиртовки 6 сек.

5. Далее по схеме окраски.

 

Возможные ошибки:

1. Неправильно проведена стерилизация бактериальной петли.

2. Неправильно сделан мазок.

 

ИЗУЧЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ БАКТЕРИЙ МЕТОДАМИ «ВИСЯЧЕЙ КАПЛИ» И «РАЗДАВЛЕННОЙ КАПЛИ»

 

 

ЦЕЛЬ:          изучение методики определения подвижности

               бактерий

Оснащение:    предметные стекла, стекла с луночкой,

               покровные стекла, вазилин, суточная культура

               микробов.

 

Техника выполнения:

 

а) Приготовление висячей капли:

1. Нанести на края луночки небольшой слой вазелина.

2. Нанести каплю исследуемого материала на покровное стекло.

3. Накрыть покровное стекло предметным стеклом с лункой.

4. Перевернуть стекло – покровным стеклом вверх.

5. Положить это стекло на столик для микроскопии.

 

б)Приготовление раздавленной капли:

1. На предметное стекло нанести каплю культуры микроба нагретой до 30-35⁰ или внести культуру микроба в теплый физ.раствор смешать.

2. Покрыть ее покровным стеклом, опуская стекло медленно не оставляя пузырьков воздуха.

3. Положить готовый препарат на предметный столик для микроскопии.

 

Возможные ошибки:

 

1. Неправильно приготовлена «висячая капля»

2. Неправильно проведена микроскопия.

 

 

МИКРОСКОПИЯ С ИММЕРСИОННОЙ СИСТЕМОЙ

 

 

Цель:              изучить методику микроскопии препаратов

 

Оснащение:         микроскоп, иммерсионное масло,

                   предметные стекла с окрашенным мазком

 

 

Техника выполнения:

 

1. Поставить микроскоп на стол перед собой, ближе к источнику света.

2. Настроить свет с помощью зеркала и системы конденсатора при малом увеличении.

3. Положить препарат с иммерсией на предметный столик, закрепить держателями, повернуть револьвер с объективами в положение с иммерсионным объективом (увеличение х 90).

4. Опустить объектив до препарата, наблюдая со стороны.

5. Настроить поле зрения, регулируя макровинтом

6. Настроить поле зрения до четкой видимости микровинтом (0,5 оборота + -)

 

Возможные ошибки:

 

1. Неправильно настроен свет

2. Нечеткое изображение культуры

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ РАСТВОРОВ И ПРОВЕДЕНИЕ ДЕЗИНФЕКЦИИ РУК И РАБОЧЕГО СТОЛА

 

Цель:             изучить правила приготовления

                  дезинфицирующих р-ров и технику

                  дезинфекции рук и рабочего места.

 

Оснащение:        весы, разновесы, лабораторная посуда,

                  дистиллированная вода, мерные цилиндры,

                  сухие дезинфицирующие вещества

                  (хлорамин, хлорная известь, фенол)

 

 

Техника выполнения:

 

1. Приготовить 5% р-р фенола: взвесить 5г. фенола и растворить в 95 мл.воды

2. Приготовить 5% р-р хлорамина: взвесить 5г. хлорамина и растворить в 95 мл.воды

3. Приготовить 10% р-р хлорной извести: взвесить 100г.хлорной извести его развести в 900мл.воды

4. Протереть руки ватным тампоном, смоченным одним из дезинфицирующих растворов.

5. Вымыть руки хозяйственным мылом 2 раза.

6. Ватным тампоном, смоченным дезинфицирующим раствором, протереть поверхность рабочего стола.

 

ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ:

 

  Хранить дез.растворы необходимо соблюдая правила техники безопасности. При работе с фенолом надо одеть резиновые перчатки.

 

 

Возможные ошибки:

 

1. Неправильно произведен расчет навески.

2. Неточно взята навеска сухого вещества

 

 

РАБОТА С ТЕРМОСТАТОМ

 

Цель:           изучение правил работы с термостатом          

Оснащение:      термостат, чашки Петри, пробирки, штатив и            

                посев 

 

Техника выполнения:

 

1. Ознакомиться с правилами техники безопасности при работе с электроприборами.

2. Проверить заземление.

3. Включить прибор

4. Установить необходимую постоянную температуру на шкале

5. Зарегистрировать температуру в термостате

6. Установить посевы и термостат (чашки Петри вверх дном)

7. Необходимо регулярное ведение журнала регистрации температуры в термостате

 

Возможные ошибки:

1. Неправильно установлена температура в термостате

2. Неправильно установлены чашки Петри с посевами в термостате

 

РАБОТА С АППАРАТОМ КОХА

 

Оснащение:      лабораторная посуда, аппарат Коха

Цель:            изучить методику стерилизации в аппарате

                 Коха  

 

Табличный алгоритм:

 

1. В аппарат налить воду.

2. Поместить стерилизуемый материал в ведре с отверстием в аппарат

3. Включить обогрев до 100⁰, стерилизовать 30-60мин.

4. По окончании стерилизации нагрев прекратить

5. Вынуть из аппарата ведро с материалом и оставить при комнатной t до следующего дня

6. Прогревание проводить 3 дня подряд при t 100⁰ по 30-60 мин.

7. На 3 день стерилизуемый материал остудить и использовать по назначению.

 

Возможные ошибки:

 

1. Несоблюдение режима стерилизации

 

 

РАБОТА С СУХОЖАРОВЫМ ШКАФОМ

 

Цель:             изучить методику стерилизации в

                  сухожаровом шкафу

 

Оснащение:        лабораторная посуда, сухожаровой шкаф.

 

Табличный алгоритм:

 

1. Проверить заземление

2. Загрузить неплотно посуду в шкаф (контроль сахароза)

3. Дверь шкафа плотно закрыть

4. Включить обогревательный прибор, довести t до 160-165⁰ и стерилизовать 1 час.

5. По окончании стерилизации выключить обогрев

6. Остудить посуду и приготовить к употреблению

 

Возможные ошибки:

1. Не соблюдается режим стерилизации

2. Не проверено заземление

 

ПОДГОТОВКА ПОСУДЫ К СТЕРИЛИЗАЦИИ

 

Цель:              познакомить студентов с методами

                   подготовки посуды к стерилизации

 

Оснащение:         лабораторная посуда, бумага

                   пергаментная, печь Пастера,

                   металлические пеналы, ватные тампоны,

                   ватные пробки.

 

Техника выполнения:

 

1. Вымыть посуду теплой проточной водой и хозяйственным мылом

2. Сполоснуть дистиллированной водой, дать стечь воде

3. Завернуть чашки Петри по 5 штук в пергаментную бумагу

4. Вставить в пипетки предохранительную вату, завернуть в плотную бумагу шириной 2-2,5см., длиной 50-70 см, положить в печь Пастера написать на бумаге объем завернутой пипетки.

5. Ватные пробки завернуть в перг.бумагу по 10-20 штук

6. Пипетки можно вложить в металлический пенал, завернуть в пергаментную бумагу и поместить в печь Пастера.

7. Ватные тампоны поместить в чисто вымытые пробирки и производить стерилизацию в них.

8. Подготовительную посуду сухожаровую печь на 45-60 мин. при температуре 165-170⁰

9. Вынуть посуду после выключения шкафа и опускания температуры в шкафу до комнатной.

 

Возможные ошибки:

 

1. Неправильно подготовлена лабораторная посуда.

 

                Наименование манипуляции   №22