Концентрация БОФ у пациенток с невынашиванием беременности

Показатели БОФ	Группы обследованных (n=102)
	Беременные основной группы (n-87)			Группа контроля (n=15)
	I группа (n=53)	IIа группа (n=17)	IIб группа (n=17)
СРБ (мкг/мл)	69,29±4,33	93,71±12,19* **	132,20±12,92* ** ***	67,08±5,49
ГГ (мг/мл)	0,82±0,15	0,79±0,27	0,77±0,21	0,64±0,13
ОР (мг/мл)	0,52±0,07*	0,57±0,07*	0,52±0,07*	0,30±0,04
α1-ИП (мг/мл)	1,59±0,16	2,14±0,28****	1,87±0,30	1,76±0,17

 

Примечание: Достоверность различий (p<0,05) *-по сравнению с контрольной группой; **- по сравнению с I и контрольной группой; ***- по сравнению с IIа и I группой; ****-между IIа и I группой

Результаты исследований показали, что во всех группах беременных с невынашиванием имелось достоверное (p<0,05) увеличение ОР в сыворотке крови по сравнению со здоровыми беременными. Уровень СРБ в  I группе соответствовал уровню СРБ здоровых беременных, но был достоверно (p<0,05) выше в группах женщин с прервавшейся беременностью. Проведенные исследования показали отсутствие достоверного увеличения концентрации ГГ в сыворотке крови пациенток с невынашиванием беременности. При сопоставлении средних значений изучаемых показателей у пациенток с различными вариантами течения невынашивания беременности оказалось, что СРБ в сыворотке крови у женщин с неразвивающейся беременностью был достоверно (p<0,05) выше, чем у беременных с начавшимся или произошедшим самопроизвольным выкидышем. Этот показатель у беременных IIб группы отличался от его значений у беременных I группы почти в 2 раза и от показателей пациенток IIа группы. Уровень α1-ИП во  II группе был достоверно (p<0,05) выше, чем у беременных I группы. Уровни ГГ и ОР в сыворотке крови беременных I, IIа и IIб групп не различались между собой. В работах различных авторов (Алёшкин В.А. Новикова Л.И.,1996, Jortani S. A., Pugia M. J., Elin R. J. et al.,2004) имеются сведения о зависимости выработки БОФ от вида инфекционного агента. В связи с этим было проведено исследование БОФ у беременных с начавшимся выкидышем инфекционного генеза в зависимости от вида возбудителя. Все беременные с начавшимся выкидышем (53 женщин) были разделены на 3 группы: 1 группа - 11 беременных с бактериальной инфекцией; 2 группа - 17 беременных с вирусной инфекцией и 3 группа - 25 женщин с сочетанной бактериально-вирусной инфекцией.

 

1                  2                   3

Рис.2. Концентрация СРБ у беременных с невынашиванием инфекционного генеза в зависимости от возбудителя

Примечание: Достоверность различий (p<0,05) * - по сравнении с 1 и 2 группами

 В результате проведенных исследований выявлено, что наиболее значимые изменения касались СРБ, который был достоверно (p<0,05) выше в 3 группе, чем у беременных 1 и 2 групп (рис.2). Уровень СРБ в 1 группе беременных составил 72,25±8,59 мкг/мл; во 2 группе беременных - 62,51±9,72 мкг/мл и в 3 группе - 130,52±11,43 мкг/мл.  Существенных различий в уровнях ГГ, ОР и α1-ИП в различных группах беременных, установить не удалось. Высокие уровни СРБ, ОР и α1-ИП относящихся к самым сильным факторам воспаления, возможно, свидетельствует об активации инфекции с развитием воспалительной реакции. В связи с этим БОФ можно рассматривать как патогенетические маркеры воспаления в диагностике невынашивания беременности инфекционного генеза. Кроме того, концентрация различных белков острой фазы изменяется не однозначно у женщин с различными вариантами невынашивания беременности и видами возбудителя. Таким образом, для оценки гестационного процесса необходимо исследование содержания нескольких БОФ, относящихся к различным функциональным группам, что может иметь как диагностическое, так и прогностическое значение.

Основными индукторами БОФ являются цитокины. Однако в литературе отсутствуют данные о взаимосвязи показателей цитокинов и БОФ при невынашивании инфекционного генеза. Определение содержания цитокинов в слизи цервикального канала, как основных факторов противоинфекционной защиты на локальном уровне, и выявление взаимосвязи БОФ у пациенток с невынашиванием может иметь определенное значение в изучении патогенеза прерывания беременности при наличии урогенитальной инфекции. В связи с этим, проведено исследование уровней провоспалительных (ИЛ-8, ФНОα, ИФγ) и противовоспалительного цитокина (ИЛ-4) в слизи цервикального канала у 30 беременных (20 беременных с начавшимся выкидышем и 10 здоровых беременных). Средние значения ИЛ-8 и ФНОα у беременных с невынашиванием беременности были достоверно (p<0,05) выше, чем у здоровых беременных и составлял 4797,0±34,0 нг/мл и 30,1±4,2 нг/мл; 2173,2±73,0 пг/мл и 2,4±0,8 нг/мл, соответственно. Анализ индивидуальных данных показал, что у 70% женщин с осложненным течением беременности концентрация ИЛ-8 в слизи цервикального канала была выше 3000 пг/мл и только у 13% здоровых женщин. Уровень ИФγ у беременных с невынашиванием был равен 96,4±28,4пг/мл и не определялся в слизи цервикального канала у здоровых беременных. При анализе индивидуальных данных у 55% женщин с невынашиванием беременности уровень ИФγ в слизи цервикального канала был выше 40 пг/мл. Средние значения и индивидуальные колебания ИЛ-4 у пациенток с невынашиванием беременности и здоровых беременных практически не различались между собой. Для выяснения роли цитокинов в выработке БОФ в сыворотке крови проведена оценка содержания острофазных белков в сопоставлении с медиаторами воспалительной реакции - цитокинами. С этой целью, у 20 пациенток I группа параллельно с определением БОФ в сыворотке крови проводилось исследование уровней цитокинов ИФγ, ИЛ-8, ИЛ-4, а так же ФНОα, являющегося мощным активатором БОФ, в слизи цервикального канала. Проведенный корреляционный анализ выявил наличие сильной положительной корреляции (r=0,96;p<0,01) между СРБ и провоспалительным цитокином - ИЛ-8 и умеренной отрицательной корреляции (r=-0,63; p<0,05) между СРБ, ГГ и провоспалительным цитокином – ИЛ-4. Имелась сильная положительная зависимость (r=0,68;p<0,05) между ИФγ и ОР, а также между ФНОα и α1-ИП (r=0,74;p<0,05). Достоверное (p<0,05) увеличение ИЛ-8, ИФγ в слизи цервикального канала и выраженная активность СРБ, ОР в сыворотке крови у беременных с прервавшейся беременностью по сравнению со здоровыми беременными, свидетельствует о возможности их использования в качестве маркеров риска невынашивания беременности.

    На основании вышеуказанного мы полагаем, что увеличение в слизи цервикального канала провоспалительных цитокинов ИЛ-8>3000,0 пг/мл; ИФγ>40 пг/мл и повышение уровня в сыворотке крови СРБ>90 мкг/мл и ОР>0,5 мг/мл можно считать критериями риска невынашивания беременности инфекционного генеза в I триместре.

   Для определения наличия дефицитов С4А и С4В изотипов компонента С4 комплемента у пациенток с различным течением беременности, нами впервые было проведено определение относительной активности С4А, С4В и соотношения С4А/С4В у 12 здоровых беременных (контрольная группа) и у 35 беременных с невынашиванием беременности в I триместре гестации. Из них: у 18 беременных с начавшимся выкидышем, но пролонгированной беременностью (I группа); и у 17 беременных с прервавшейся беременностью (II группа). В результате проведенного исследования выявлено, что у здоровых беременных частота встречаемости врожденных дефицитов компонентов составила для С4А- 25% и для С4В- 17%.  Изучение функциональной активности отдельных изотипов не выявило четкой закономерности дефицита С4А в различных группах беременных.  В то же время выявлены значительные различия в частоте встречаемости дефицита С4В комплемента у беременных с различным течением гестационного процесса (рис.3).

%

Рис.3. Частота встречаемости дефицитов изотипов С4 компонента комплемента у обследуемых беременных

Примечание: Достоверность различий (p<0,05) * между II, I и контрольной группами

 Так, в группе женщин с начавшимся выкидышем, но сохраненной беременностью (I группа), частота дефицитов компонента С4В комплемента не отличалась от группы здоровых беременных (контрольная группа) и составила 16,7%. В то же время, в группе пациенток с прервавшейся беременностью (II группа) дефицит изотипа С4В встречался в 3 раза чаще, чем у пациенток в I и контрольной группе и достигал 60%, что достоверно выше (p<0,05), чем в других группах беременных. Таким образом, исследование дефицитов изотипов компонента С4 комплемента может быть использовано в диагностике течения инфекционного процесса и выделения групп риска женщин по невынашиванию беременности.

ВЫВОДЫ

1. Изучение БОФ у здоровых беременных выявило значительное их отличие от показателей у небеременных женщин, которое проявлялось в достоверном (р<0,05) увеличении СРБ, α1- ИП и снижении ОР, что свидетельствует об участии БОФ в процессе гестации. Средние значения которых составляли: 67,08 ± 5,49 мкг/мл; 1,76 ± 0,17 мг/мл; 0,30 ± 0,04 мг/мл и 44,0 ± 3,13 мкг/мл, 0,94 ± 0,08 мг/мл; 0,65 ±0,07 мг/мл, соответственно.

2. У всех женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза отмечено достоверное увеличение (р<0,05) ОР по сравнению со здоровыми беременными (I группа-0,52±0,07; IIа группа-0,57±0,04; IIб группа- 0,52±0,07 и 0,30±0,04 мг/мл – группа контроля) что может иметь значение в диагностике невынашивания беременности.

3. Выявлено отличие в уровнях различных БОФ в зависимости от варианта течения беременности. Уровень СРБ в группе беременных с начавшимся выкидышем, но сохраненной беременностью (I группа) соответствовал уровню СРБ здоровых беременных (69,08±0,33 и 67,28±5,49 мкг/мл, соответственно), но был достоверно выше (p<0,005) у женщин с прервавшейся беременностью.

4. Для беременных с неразвивающейся беременностью (IIб группа) характерно достоверное (р<0,05) увеличение СРБ по сравнению с беременными I и IIа групп (132,2±12,92 мкг/мл; 93,71±12,19 мкг/мл; 69,28±4,33 мкг/мл, соответственно).

5. У беременных с произошедшим самопроизвольным выкидышем (IIа группа) уровень α1- ИП был достоверно (р<0,05) выше, чем у беременных с начавшимся выкидышем, но сохраненной беременностью (2,14±0,28 мг/мл,; 1,59±0,16 мг/мл, соответственно).

6. Выявлена зависимость уровня СРБ от вида инфекционного агента, наиболее выраженное повышение отмечено у женщин с сочетанной бактериально-вирусной инфекцией по сравнению с монобактериальной или моновирусной инфекцией (130,52±11,43 мкг/мл; 72,25±8,59 мкг/мл,; 62,51±9,72 мкг/мл, соответственно), что может быть использовано в качестве дополнительного критерия в этиологии невынашивания беременности инфекционного генеза.

7. Выявлена зависимость между локально продуцируемыми цитокинами и системно вырабатываемыми БОФ. Отмечена положительная корреляция (r=0,96; р<0,05) между СРБ и провоспалительным цитокином –ИЛ-8 и отрицательная (r=-0,51 и r=-0,63; р<0,05) между СРБ, ГГ и противоспалительным цитокином ИЛ-4. Имелась положительная зависимость (r=0,68; р<0,05) между ИФᵧ и ОР, а также между ФНОα и α-ИП (r=0,74; р<0,05), что может быть использовано в диагностике и патогенезе невынашивания беременности.

8. Выявлена повышенная частота встречаемости дефицита С4В у пациенток с невынашиванием беременности. Наличие у беременных с урогенитальной инфекцией 60% дефицита изотипа С4В компонента С4 комплемента может служить обоснование включения их в группу риска по невынашиванию беременности.

 

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. На стадии предгравидарной подготовки необходимо выделять группу риска по невынашиванию беременности инфекционного генеза, к которой относятся женщины с наличием хронических экстрагенитальных, генитальных инфекционных заболеваний и нарушением репродуктивной функции в анамнезе. В данной группе женщин целесообразно проведение исследования на выявления наличия С4В компонента комплемента с обязательным обследованием на урогенитальную инфекцию, с последующим патогенетическим лечением.

2. У беременных с невынашиванием беременности целесообразно проведение исследования БОФ, относящихся к различным функциональным группам, что может иметь как диагностическое, так и прогностическое значение.

3. У беременных с выявленной урогенитальной инфекцией мы рекомендуем проводить изучение уровней ИЛ-8, ИФγ в слизи цервикального канала и СРБ, ОР в сыворотке крови.

Увеличение ИЛ-8>3000,0 пг/мл, ИФ γ>40 пг/мл и повышение СРБ>90 мкг/мл, ОР >0,5 мг/мл можно считать диагностическими критериями риска невынашивания беременности.

4. Частота врожденного дефицита изотипа С4В компонента комплемента более 60% у пациенток с наличием инфекции является фактором повышенного риска по невынашиванию беременности.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

 

1. Савченко Т.Н., Гиммельфарб Е.И., Точиева М.Х., Дондуп О.М. Частота встречаемости Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum у женщин репродуктивного возраста, сравнительная оценка различных методов диагностики. // Сборник материалов международной Российско-американской научно-практической конференции «Актуальные проблемы охраны материнства и детства».- Тула.- 2004.- С.158-159.

2. Савченко Т.Н., Точиева М.Х., Гиммельфарб Е.И., Протопопова Л.О., Дондуп О.М. Определение видового состава и чувствительности к антимикотическим препаратам у беременных с кандидозным вульвовагинитом на ранних сроках беременности. // 1-Й Международный конгресс по репродуктивной медицине.- Москва.- 2006.- С. 221-222.

3. Макаров О.В., Савченко Т.Н., Козлов П.В., Новикова Л.И., Дондуп О.М., Протопопова Л.О., Точиева М.Х. Выявление врожденных изотипов С4 компонента комплемента при нарушениях беременности и родов. // Материалы VIII Всероссийского научного форума «Мать и дитя».- Москва.- 2006.- С.150.

4. Макаров О.В., Алешкин В.А., Савченко Т.Н., Новикова Л.И., Дондуп О.М., Протопопова Л.О., Козлов П.В., Точиева М.Х. Изучение маркеров острой фазы при беременности. // там же.- М., 2006.- С.147-148.

5. Савченко Т.Н., Точиева М.Х., Дондуп О.М., Гиммельфарб Е.И. Роль нейтрофильной эластазы в активации кандидозного вульвовагинита у беременных с невынашиванием. // II Международный конгресс по репродуктивной медицине «Репродуктивное здоровье семьи». - Москва.- 2008.- С.125.

6. Савченко Т.Н., Точиева М.Х., Дондуп О.М., Гиммельфарб Е.И. Значение нейтрофильной эластазы в активации кандидозного вульвовагинита у беременных с невынашиванием в I триместре. // XV Российский научный конгресс «Человек и лекарство».- Москва.- 2008.- С.470.

7. Савченко Т.Н., Новикова Л.И., Дондуп О.М., Протопопова Л.О. Маркеры острой фазы воспаления при невынашивании беременности в ранние сроки гестации. // Рос. вестн. акуш.-гин. - 2008.- Т. 7, №2.- С.13-15.

8. Макаров О. В ., Алешкин В.А., Савченко Т.Н., Новикова Л.И., Козлов Л.В., Дондуп О.М., Протопопова Л.О.

Роль белков острой фазы воспаления и системы комплемента в невынашивании беременности // Вестник РГМУ – 2008.- №5.- С. 18-20.