Способы хранения спермы производителей сельскохозяйственных животных.

Методы хранения спермы вне организма основаны на снижении обменных процессов спермиев, что позволяет увеличить сроки их переживаемости и сохранения оплодотворяющей способности.

 

В настоящее время наиболее широко применяют: краткосрочное хранение разбавленной спермы при температуре 2—4°, длительное хранение спермы в жидком азоте при —196°.

 

Для хранения спермы при температуре 2—4° ее разбавляют специальными средами: для быка и барана — глюкозо-цитратно-желточная, для хряка — глюкозо-хелато-цитратно-сульфатная; для жеребца — лактозо-хелато-цитратно-желточная.

Во всех случаях очень важно, чтобы при хранении спермы колебания температуры были минимальными. Для этого ее хранят в термосе со льдом или хорошо отрегулированном холодильнике. После разбавления сперму разливают в емкости (флаконы, ампулы, пробирки и т. д.) до самой пробки так, чтобы при транспортировке не было взбалтывания. Ампулы, пробирки или флаконы обертывают слоем ваты или упаковывают в поролоновые амортизаторы, помещают в полиэтиленовые или резиновые мешочки, герметически закрывают их и постепенно охлаждают до 2—4° в холодильнике или в термосе с тающим льдом.

 

При таянии льда в термосе талую воду следует сливать, добавлять лед. Хранят сперму при постоянной температуре, отклонения в ту или иную сторону неблагоприятно сказываются на переживаемости спермы.

 

Сроки хранения спермы при 2—4 ° весьма небольшие и, как правило, ее используют в течение суток. Даже если и спермии имеют поступательное движение через 3 дня и более, их оплодотворяющая способность резко снижена.

 

В настоящее время широкое применение нашел метод низкотемпературного замораживания и длительного хранения в жидком азоте (196°) спермы производителей. Такая сперма в замороженном состоянии может храниться в течение многих месяцев или нескольких лет без потери оплодотворяющей способности.

 

При замораживании спермы необходимо: строжайше соблюдать установленную технологию разбавления, охлаждения и замораживания спермы; непрерывно поддерживать низкую температуру (не выше 150°) в течение всего срока хранении спермы. Не допускать колебания температуры во время ее хранения. Для замораживания спермы используют специальное оборудование (аппараты, приборы и т. д.) и хранят в стационарных емкостях, находящихся в специальных хранилищах станций (филиалы), откуда сперма поступает в обслуживающие хозяйства. Для длительного хранения спермы в жидком азоте ее замораживают в форме: необлицованных гранул; облицованных гранул; полипропиленовых соломинок (пайет); ампул.

После замораживания для дальнейшего хранения допускается сперма быка с подвижностью 4 балла, жеребца — 3 балла, барана — 4 балла, хряка — 4 балла.

 

Оценка качества спермы производителей сельскохозяйственных животных.

Макроскопическое иссл.

 

Иссл. спермы начинают с определения ее объем а с помощью мерной пипетки, градуированного ци­линдра или мензурки.

 

Цвет нормальной спермы белый или белый с желтым оттенком. Серова­тый или голубоватый оттенок – при­знак олигоспермии (недостаточное чис­ло спермиев). Интенсивный желтый цвет обычно указывает на примесь мочи. Розоватый или красноватый – признак примеси крови, как следствие свежей травмы. Буро-красный указыва­ет на глубокую травму половых путей давнего происхождения. Зеленоватый оттенок сперма приобретает от примеси гноя. Хлопья в сперме наблюдаются при восп. пузырьковидных желез.

 

Запах нормальная сперма не имеет или обладает легким запахом жиропота. При хронических, гнойных процессах в семенниках или в придаточных половых железах сперма может иметь гнилостный запах.

 

Консист. спермы быка сливкообразная, барана – сметанообразная, жеребца и хряка – сходная с мо­локом.

 

Микроскопическое исследование

Густота

По густоте спермы ориентировочно устанавливают насыщенность ее спермиями, относя к густой (Г), средней (С) или редкой (Р).

-У быков густой считают сперму, если все поле зрения микроскопа заполнено спермиями и в пространстве между ними не укладывается длина одного спермия; ставят оценку Г.

-Средней считают сперму, когда между спермиями хорошо выражены промежутки, равные приблизительно длине спермиев.

-В редкой сперме расстояние между спермиями превышает их длину.

К использованию допускают сперму быков, хряков и жеребцов с оценкой Г и С, а у баранов — только Г.

 

Подвижность спермиев

оценивают по 10-балльной системе. Каждый балл равен 10 % спермиев, обладающих поступательным движением. Если спермии имеют манежное движение (по кругу) или только колебательные, то качество спермы обозначают буквой К (колебательное движение). Сперму с неподвижными спермиями обозначают буквой Н (некроспермия).

 

Подвижность неразбавленной спермы быка определяют при температуре 40 °С. На теплое предметное стекло наносят каплю спермы и 2...4 капли 3%-го раствора натрия цитрата, перемешивают, накрывают покровным стеклом и просматривают не менее трех полей зрения.

 

Результат записывают в следующем виде: Например, Г-10 баллов означает, что исследуемая сперма густая и 100% спермиев обладают головным прямолинейным движением; Г-9 баллов означает 90%, Г-8 — 80, Г-7 —70% подвижных спермиев и т. д.

 

Концентрация

- (число в 1 мл эякулята) определяют в счетной камере Горяева.

В камере с сеткой Горяева средняя площадка разделена на две половины. На каждой половине нанесена сетка, состоящая из 225 больших квадратов, из них 25 (по 5 в ряду) дополнительными линиями разделены на 16 малых квадратиков каждый. Площадь малого квадратика у всех одинакова — 1/400 мм2.

Перед зарядкой камеры сперму разбавляют 3%-ным раствором поваренной соли или дистиллированной водой.

В зависимости от нужной степени разбавления (в 20, 30, 40 и т. д. раз) вливают 1,9; 2,9; 3,9 и т. д. мл 3%-ного раствора поваренной соли. Затем вносят микропипеткой 0,1 мл спермы.

Подсчет проводят в 80 малых квадратах, при этом считают спермии, головки которых находятся внутри квадрата, на левой и верхней линиях квадрата. Зная объем малого квадрата, степень разбавления, вычисляют количество спермиев в 1 мл. При разбавлении спермы в 20 раз количество подсчитанных спермиев в 80 малых квадратах соответствует количеству спермиев в миллионах в 1 мл неразбавленной спермы. При разбавлении в 30 раз число нужно помножить на 1,5, в 40 раз на 2, в 100 раз на 5 и т. д. Например: подсчитано 100 спермиев. Разбавление в 20 раз — это значит 100 млн./мл спермиев, разбавление в 100 раз —500 млн./мл.

 

Для определения концентрации спермиев жеребцов сконструировали специальные стандарты. Они представляют собой запаянные пробирки, содержащие жидкость, имеющую цвет, соответствующий той или иной известной концентрации спермы. Для определения концентрации исследуемую сперму наливают в пробирку, устанавливают рядом с ней пробирки стандарта и подбирают наиболее подходящий по виду стандарт, на котором отмечено число спермиев в 1 мл спермы.