Семя – орган полового размножения и расселения растений: наружи у семян имеется плотный покров – кожура...
История развития хранилищ для нефти: Первые склады нефти появились в XVII веке. Они представляли собой землянные ямы-амбара глубиной 4…5 м...
Топ:
Комплексной системы оценки состояния охраны труда на производственном объекте (КСОТ-П): Цели и задачи Комплексной системы оценки состояния охраны труда и определению факторов рисков по охране труда...
Методика измерений сопротивления растеканию тока анодного заземления: Анодный заземлитель (анод) – проводник, погруженный в электролитическую среду (грунт, раствор электролита) и подключенный к положительному...
Когда производится ограждение поезда, остановившегося на перегоне: Во всех случаях немедленно должно быть ограждено место препятствия для движения поездов на смежном пути двухпутного...
Интересное:
Как мы говорим и как мы слушаем: общение можно сравнить с огромным зонтиком, под которым скрыто все...
Берегоукрепление оползневых склонов: На прибрежных склонах основной причиной развития оползневых процессов является подмыв водами рек естественных склонов...
Распространение рака на другие отдаленные от желудка органы: Характерных симптомов рака желудка не существует. Выраженные симптомы появляются, когда опухоль...
Дисциплины:
2018-01-27 | 1137 |
5.00
из
|
Заказать работу |
|
|
Для диагностики вирусных заболеваний применяют следующие методы:
1. Вирусоскопический.
2.Иммунной электронной микроскопии.
3. Вирусологический.
4.Серологический.
5. Иммунофлуоресцентный.
6. Биологический.
7. Использование ДНК- (РНК) - зондов.
8. Цепная полимеразная реакция.
При вирусоскопическом методе в исследуемом материале обнаруживают с помощью электронной микроскопии вирионы или с помощью светооптической микроскопии — внутриклеточные включения. Метод электронной микроскопии дает возможность обнаружить вирионы, но он недостаточно специфичен.
Гораздо более специфичным, чувствительным и надежным является метод иммунной электронной микроскопии. Он оказался особенно ценным в обнаружении тех вирусов, которые не размножаются в культуре клеток и для которых нет других тест-систем. В основе этого метода лежит взаимодействие антител с вирусами при смешивании вируссодержащего материала со специфической сывороткой. В результате взаимодействия антител с вирусами образуются микропреципитаты, состоящие из вирусных частиц, покрытых своеобразным «венчиком». Специфичность агрегации вирионов антителами позволяет надежно их идентифицировать. Разрешающая способность метода возрастает благодаря тому, что образование иммунных агрегатов повышает концентрацию вирионов в микропрепарате. Сам процесс иммунной электронной микроскопии включает следующие процедуры:
1) приготовление водного экстракта исследуемого материала и смешивание его с соответствующим объемом специфической сыворотки;
2) осаждение образующихся микропреципитатов центрифугированием;
3) негативное контрастирование иммунного преципитата фосфорно-вольфрамовой кислотой;
|
4) нанесение материала на сеточку;
5) просмотр препарата в электронном микроскопе.
Единственный недостаток этого метода заключается в его громоздкости, поэтому он не может быть использован для массовых исследований.
Вирусологический метод основан на выделении вирусов и их идентификации с использованием культур клеток или куриных эмбрионов. Для проведения вирусологического исследования важное значение имеют: выбор материала и его предварительная обработка, условия транспортировки и соблюдение необходимых условий для культивирования вируса. Материал для исследования определяется характером вирусного заболевания, местом размножения вируса в организме и путями его выделения. В соответствующих главах указано, при каких заболеваниях какой материал необходимо брать для выделения вируса. Для подавления возможного роста бактерий исследуемый материал обрабатывают антибиотиками, или последние добавляют в питательную среду для выращивания культуры клеток в соответствующих концентрациях. Выбор способа культивирования (заражение лабораторных животных, куриных эмбрионов или культур клеток) определяется биологией предполагаемого возбудителя. Важное значение имеет соблюдение стандартных условий культивирования: оптимальная температура, продолжительность, использование дополнительных тестов для индикации (бляшкообразование, реакции гемадсорбции, гемагглютинации, иммунофлуоресценции и т. д.). Для идентификации вирусов применяются типоспецифические сыворотки.
Серологические методы могут быть использованы для обнаружения в исследуемом материале как специфических антител, так и вирусных антигенов. Для этих целей могут быть использованы все известные серологические реакции:
1. Реакция связывания комплемента.
2. Реакция пассивной гемагглютинации и ее варианты.
3.Реакция торможения гемагглютинации.
4.Реакция гемагглютинации иммунного прилипания (комплекс антиген+ антитело в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах).
|
5. Реакции преципитации в геле.
6.Реакции нейтрализации вирусов.
7. Радиоиммунный метод.
8. Методы иммуноферментного анализа.
Из перечисленных методов все большей популярностью пользуются методы иммуноферментного анализа, отличающиеся высокой специфичностью и удобством использования.
Иммунофлуоресцентный метод, применяемый в прямом и обратном вариантах, является методом ускоренной диагностики.
Биологический метод основан на использовании животных, чувствительных к соответствующему вирусу.
Метод гибридизации ДНК-ДНК, или метод ДНК-зондов — один из наиболее перспективных способов исследования в современной биологии и медицине. Он может быть использован для выявления любых генов, любых фрагментов нуклеиновых кислот. В его основе лежит способность однонитевых молекул нуклеиновых кислот вступать во взаимодействие с комплементарными нитями и образовывать двунитевые гибридные молекулы. Гибридизация осуществляется или в растворах, или, чаще всего, на твердых подложках, таких, например, как нитроцеллюлозная мембрана. Исследуемую клеточную суспензию лизируют для высвобождения нуклеиновых кислот. После этого двухцепочечную ДНК предварительно денатурируют, а образующиеся одноцепочечные молекулы переносят на мембрану, где они ковалентно связываются с ДНК-зондом, который представляет собой меченные изотопом или ферментом денатурированные молекулы нуклеиновой кислоты. Гибридизация происходит лишь в том случае, если между зондом и иммобилизованной на мембране нитью ДНК имеется гомология.
Метод цепной полимеразной реакции (ЦПР) охарактеризован выше.
Тестовые задания:
1. вирусы культивируют:
1) в МПА
2) в курином эмбрионе
3) в среде 199
4) на тканевых культурах
5) в лабораторных животных
2. Для идентификации вирусов используют:
1) цветную пробу
2) реакцию торможения гемагглютинации
3) реакцию нейтрализации цитопатического действия вирусов
4) реакцию связывания комплемента
5) реакцию пассивной гемагглютинации
3. Для индикации вирусов используют:
1) цветную пробу
2) реакцию нейтрализации
3) реакцию гемагглютинации
4) реакцию торможения гемадсорбции
4. Для диагностики вирусных инфекций используют:
|
1) бактериологический метод
2) вирусологический метод
3) вирусоскопический метод
4) микологический метод
5) серологический метод
5. компоненты, участвуюЩИЕ в реакции торможения гемадсорбции:
1) монослой клеток
2) исследуемый материал с вирусом
3) эритроциты
4) бактерии
5) диагностическая противовирусная сыворотка
6) диагностическая антибактериальная сыворотка
6. препараты, используЕМЫЕ для специфической профилактики вирусных инфекций:
1) антибиотики
2) вакцины
3) γ-глобулины
4) витамины
7. интерферон обладает СЛЕДУЮЩИМ действием
1) противоопухолевым
2) противовирусным
3) противопротозойным
4) иммуностимулирующим
5) антибактериальным
|
|
Индивидуальные и групповые автопоилки: для животных. Схемы и конструкции...
Состав сооружений: решетки и песколовки: Решетки – это первое устройство в схеме очистных сооружений. Они представляют...
Двойное оплодотворение у цветковых растений: Оплодотворение - это процесс слияния мужской и женской половых клеток с образованием зиготы...
Археология об основании Рима: Новые раскопки проясняют и такой острый дискуссионный вопрос, как дата самого возникновения Рима...
© cyberpedia.su 2017-2024 - Не является автором материалов. Исключительное право сохранено за автором текста.
Если вы не хотите, чтобы данный материал был у нас на сайте, перейдите по ссылке: Нарушение авторских прав. Мы поможем в написании вашей работы!