Хранение биопсийного материала

Материалы для прижизненной морфологической диагностики должны быть доставлены в патологоанатомическое отделение своевременно, в полном объеме, с соответствующей маркировкой и заполненным направлением на патологоанатомическое исследование. При этом должны быть полностью исключены причины, ведущие к возможной путанице материалов от разных больных, представлена полная информация о клинической картине заболевания, характере проведенной манипуляции, виде и количестве объектов, направляемых на исследование, обеспечены условия для получения полноценного заключения патологоанатома о сущности болезни, ее прогнозе.

Важнейшим этапом подготовки материала к передаче в патологоанатомическое отделение является его маркировка и фиксация. Оптимальной считают ситуацию, когда нефиксированные биоптаты и операционный материал немедленно передают в патологоанатомическое отделение, что обеспечивает патологоанатому возможность использовать в диагностике весь спектр морфологических, иммуногистохимических, цитогенетических и других методов. При отсутствии такой возможности, для предотвращения аутолиза тканей объекты для прижизненной морфологической диагностики должны быть подвергнуты фиксации в емкости, обеспечивающей помещение в нее исследуемого материала и фиксирующей жидкости в объеме, минимум в 10 раз превышающем объем биоптата или операционного материала.

Из большого количества фиксирующих средств практическое применение нашли несколько фиксаторов: 10 % раствор формалина, этиловый спирт (80 %), спирт-формалин. Раствор формалина 10 %, желательно нейтральный (рН 7,4), готовят следующим образом: к 100 мл 40% раствора продажного формальдегида добавляют 900 мл водопроводной воды. Для нейтрализации фиксирующего раствора в него в избытке добавляют карбонат кальция/магния. Фиксирующая жидкость спирт-формалин содержит 100 мл 40 % раствора формальдегида и 900 мл этилового спирта, в нее добавляют 0,5 г ацетата кальция. На банку с помещенным в нее биоптатом - операционным материалом (с фиксатором или без него) прикрепляют бирку из плотной бумаги, не размокающей в жидкости. На бирке простым карандашом обозначают фамилию, имя и отчество пациента, наименование стационара (поликлиники) и дату операции. Материал от одного больного желательно поместить в одну емкость. Однако при многоэтапных оперативных вмешательствах с последовательным иссечением различных тканей, участков органа (органов) эти объекты следует помещать в отдельные "банки с соответствующими обозначениями, как на бирках, так и в направлении на патологоанатомическое исследование. Врач контролирует работу среднего медицинского персонала по маркировке всех объектов, фиксации материала и соблюдению техники безопасности.

Направление на гистологическое исследование (форма № 14/у) заполняет лечащий врач или врач, взявший материал для исследования, в двух экземплярах (под копирку). В карту стационарного больного (амбулаторную карту) вносят запись о дате забора материала, его характере, маркировке. В направлении четко обозначают:

• год, месяц, день, час взятия материала;

• наименование лечебного учреждения, отделение;

• фамилию, имя, отчество, возраст и пол больного;

• биопсию (ее вид), операционный материал, послед, самопроизвольно отторгшиеся ткани;

• первичную, повторную биопсию, операцию (при повторной биопсии, операции необходимо указать дату, номер первичной биопсии, операции, данные предшествующего гистологического исследования);

• число и характер объектов, их маркировку;

• клинические данные: продолжительность заболевания, результаты клинико-лабораторных, рентгенологических и других специальных методов исследования, проведенное лечение (химиотерапевтическое, лучевое, оперативное). При наличии опухоли указывают точную локализацию, темпы роста, размеры, консистенцию, отношение к окружающим тканям, метастазы, специальное лечение. При иссечении лимфатических узлов, трепанобиопсии подвздошного гребня отмечают изменения в периферической крови, миелограмме; кроме того, указывают:

• развернутый клинический диагноз;

• фамилию, имя, отчество врача, направившего материал на исследование, его рабочий телефон, подпись.

В направлении на патогистологическое исследование соскобов эндометрия должны быть дополнительно включены следующие сведения:

• при нормальной менструации — начало и окончание последней;

• характер нарушения менструальной функции;

• другие важные для диагностики признаки

Выбор места взятия биоптата определяет хирург, а в сложных случаях – при консультации с патологоанатомом. Если очаг поражения незначителен, его берут целиком. Как правило, очаг поражения по возможности иссекают целиком с небольшим количеством окружающей ткани. Такое иссечение в большинстве случаев оказывается и лечебной процедурой, но нужно учитывать кроме технических, хирургических возможностей и косметический результат.

Если невозможно убрать очаг целиком, то все же объем материала должен быть достаточно большим. Ткань берут из зоны наиболее развитого поражения, наиболее клинически выраженной, а не из переходных зон, так как это чревато ошибками. При иссечении тканей необходимо постараться исключить их травматизацию. Особое внимание должно быть уделено исключению механического или термического повреждении иссекаемой ткани. Эти воздействия особенно сильно повреждают ткани, иногда до такой степени, что гистологически невозможно определить даже ее принадлежность. Если иссечение производится термокаутером, то линия терморассечения должна находиться как можно дальше от очага.

Иссекаемую ткань ни в коем случае нельзя мять не только инструментом, но и пальцами. При иссечении лимфатических узлов все манипуляции должны быть ограничены окружающей их клетчаткой. Если необходимо иссечь лимфатический узел при генерализованном поражении лимфатической системы, брать надо такие узлы, которые меньше всего подвержены дополнительным изменениям. «Неудобными» при диагностике являются лимфатические узлы нижних конечностей, особенно паховые, верхних конечностей - кубитальные и подмышечные. В этих лимфатических узлах всегда имеются неспецифические изменения, иногда полностью нарушающие архитектонику этого узла. Более подходящими для биопсии являются шейные и другие поверхностные лимфатические узлы.

Если иссекаемая ткань достаточно однородна, а очаг не может быть удален целиком, достаточно взять небольшой кусочек. Если же ткань очага неоднородна, то надо иссечь несколько кусочков из разных мест. При необходимости их следует промаркировать. Также желательно взять несколько кусочков ткани в тех случаях, когда граница очага не определяется или он вовсе невиден, например, кусочки кожи, мышц при некоторых поражениях, в частности, болезнях соединительной ткани.

При подозрении на некоторые генерализованные процессы, например, амилоидоз, тромбоцитопеническую пурпуру, хорошим местом для биопсии является десна верхних резцов Богатство этой ткани сосудами, доступность, хороший гемостаз, малая болезненность и быстрое заживление раны, связанное с самой физиологией ротовой полости, обеспечивают успешное иссечение биоптата.

Ткани и органы, полученные при биопсии с диагностической целью, категорически запрещается делить на части и посылать их в несколько патологоанатомических лабораторий. В подобных случаях морфологические изменения, характерные для данного процесса, могут оказаться только в одной части объекта, а следовательно, и результаты исследования будут различными. Это может дезориентировать лечащих врачей и нанести вред больному.

Исследование присланных кусочков тканей и органов рекомендуется проводить в следующие сроки: для экстренных биопсий не позднее 15-30 минут от момента получения материала, для диагностических биопсий и послеоперационного материала - в течение 4-7 суток.

Поступившие на исследование в лабораторию объекты вместе с сопроводительными бланками принимаются лаборантом, обрабатывающим биопсии; при этом проверяется, соответствует ли поступивший объект указанному в бланке, все ли графы бланка заполнены. В книге записи биопсий в порядке поступления регистрируются под очередным номером все объекты, поступившие на исследование.

Микроскопическое описание присланных объектов с указанием количества и объема кусочков и органов, а также вырезание для гистологического исследования кусочков производятся врачом патологоанатомического отделения в день получения материала. Если возникает вопрос о несоответствии клинического диагноза, указанного в сопроводительном бланке, и патологоанатомического процесса, обнаруженного при микроскопическом исследовании оперативно удаленного органа, патологоанатому надлежит вызвать врача, производившего операцию, для выяснения этого вопроса. Если бланк направления заполнен небрежно и в нем отсутствуют необходимые данные, заведующий патологоанатомическим отделением ставит в известность заведующего отделением, откуда прислан материал, при повторных случаях сообщает главному врачу больницы.

При экстренной биопсии материал доставляется в нефиксированном виде. Его немедленно осматривает и описывает прозектор. Затем вырезает кусочки, которые пускает в работу. Обычно вырезают кусочки наиболее подозрительных мест, годные для обработки на замораживающем микротоме или криостате. Затем вырезают кусочки для дополнительного и окончательного исследования. Эта процедура весьма ответственная, поэтому производит ее только опытный прозектор. Нумерация и регистрация производится по общим правилам с добавлением слова «cito» на бланке и препаратах.

Кусочки, взятые для исследования, тут же фиксируют в растворе формалина. Можно исключить формалиновую фиксацию и использовать фиксирующие свойства холода с дальнейшей обработкой срезов. Наиболее надежным является нагревание объекта в 10% растворе форма-липа в пробирке до появления пузырьков газа. Ни в коем случае не кипятить! Также дает хорошие результаты резка замороженного нативного материала и погружение срезов в теплый (40-50°С) раствор формалина. Срезы окрашиваются гематоксилином и эозином ускоренным методом.

Результаты исследований биопсий, органов и тканей, удаленных при хирургических операциях, выдаются под расписку. Ответы отправляются в клиническое отделение с разносной книгой, в которую вписываются: дата отправки, фамилия, имя, отчество больного, от которого биопсия, номер исследования и указывается клиническое отделение. Выдача ответов на руки больному воспрещается!

При запросе биопсийных гистопрепаратов из других лечебных учреждений, куда по характеру заболевания направляется больной, патологоанатомическое отделение, в котором производилось исследование биопсии, и было дано заключение, обязано выдавать заключение и гистопрепараты, официально запрашиваемые из других лечебных учреждений, сохраняя в отделении дубликат препарата. По изучении гистопрепаратов лечебное учреждение, которому они были выданы, обязано возвратить их обратно.

Все книги записей исследования биопсий сохраняются и должны постоянно находиться в помещении патологоанатомического отделения и из него не выноситься. Архивные гистологические препараты рекомендуется хранить на протяжении всего времени существования патологоанатомического отделения. В зависимости от местных условий гистологические препараты червеобразных отростков, грыжевых мешков, миндалин, соскобов сохраняются от 3 месяцев до 1 года, после чего препараты могут быть уничтожены.

Гистологические препараты доброкачественных и злокачественных опухолей, подозрительных на опухолевый рост и специфические воспаления, не уничтожаются, а подлежат постоянному хранению.