Характерные св-ва прокариотов, эукариотов, вир. Принц классиф прокариотов.

Характерные св-ва прокариотов, эукариотов, вир. Принц классиф прокариотов.

Прокариоты - однок-ые м/орг, бактерии отлич-ся слабой морф-ой дифферинцировкой(доядерные). Для них характерно:

1)Отсутствие окруж мембр ядра(носит-ем наслед-сти явл-ся нуклеотидная замкнутая в кольцо нить ДНК - единственная бакт. хромосома.

2)Отсутствие органелл(митохондрий, хлоропластов, компл. Гольджи)

3)Размнож-ие бинарными амитотическим делением (на двое)

4)Особое стр-ие и сост кл стенки, малые размеры рибосом, своеобр-ые ферменты белкового синтеза

Классификация прокариот:

Прокариоты- разделены на 35 групп:

Спирохеты, несколько гр собственно бакт(грам+ кокки, спорообр грам+ кокки и пал-ки, грам- аэробн пал-ки и кокки), риккетсии, хломидии, микобакт, микоплазмы. В основе дел-ия прокариот на группы лежат:

форма и стр-ие клетки, отнош-ие к окраске по граму, тип метабол-ма и др. Внутри гр выделены более мелкие таксоны: порядок, сем-во, род, вид. Название м/орг сост как правило из родового и видового названий.

Эукариоты - относит-но более высоко орг-ые одноклет и многоклет орг-мы, имеющие сходства с кл животных и раст(грибы). Для них хар-но:

1)Наличие истинного ядра, в кот-ых нах-ся набор линейных хромосом распред-ся в ходе митоза в доч-ие кл

2)Различные органеллы(митохондрии, компл.Гольджи, эндоплазматический ретикулум и др.)

3)Рибосомы большего размера чем у прокариот

4)Способность к эндоцитозу(захвату частиц и раств-ых вещ-в)

Вирусы - мельчайшие неклеточные орг-мы. Основные св-ва:

1)Отсутствие кл строения

2)Отсутствие собст-ых метаб-их сист (у вирионов нет обмена с внешн средой)

3)Наследственный мат-л(геном) – один тип нуклеиновой к-ты(ДНК или РНК)

4)Облигатные внутриклет паразиты

Классификация вирусов:

1)По типу нуклеиновой к-ты

2)По наличию суперкапсида(простой, сложный)

3)По размеру вириона(крупн,сред, мел)

4)По типу симметрии(спиральный, многогранный, смешанный)

5)По особенности репродукции(в ядре, цитоплазме)

 

4.Методы исследования в микробиологии.

1)Микроскопический – изучение микробов в окрашенном или неокрашенном состоянии с помощью различных типов микроскопов. Метод позволяет определить форму размеры, расположение структурные элементы и отношение к окраске микробов.

2)Микробиологический – повес материала на пит среды, для выделения чистой культуры и её вида. Культурой называют совокупность м/орг. Чистая культура - скопление микробов одного вида, выращенных на питательно среде.

Штамм -чистая культура, выделенная из конкретного источника в определенное время (пример штамм shigella Flexner №8 выделенна у больного К. 10.10 2010)

Клон - генетически однородная чистая культура, полученная в результате бесполого размножения одной клетки(используется при изучении микробных популяций в генетич. экспериментах)

3)Экспериментальный(биологический)- заражение микробами лабораторных животных. Метод позволяет: выделить чистую культуру микробов, плохо растущих на пит средах; изучить болезнетворные свойства микробов; получать иммунобиологические препараты для специфической профилактики, диагностики и лечения. 4) Иммунологический- изучение ответных специфических реакций м/орг на контакт с микробами.

Выделяют два метода:

А) серологический- основан на выявление АТ в крови или других жидк с помощью известных микробных АГ (диагностикумов

Б)Аллергический- основан на выявление повыш чувств(аллергии) к повторному поступл в орг-м микробного аллергена (АГ)

5)Молекулярно-генетический – ПЦР(полимеразная цепная реакция), позволяет опред в орг-ме больного нуклеиновую кл возб-ля для диагн-ки хломидиозов и др вир инфекций

6)По кругу восприимчивых хозяев, способу передачи и т.д.

Пит среды. Классификация.

Пит среда - среда содержащяя различн соед-ия сложного или простого состава, кот применяютс для размнож бактерий.

Классификация:

1)По происхожд:

-естественные(из продуктов раст или жив-го происхожд): картофельн, рисов, кукуруз нагар для культив грибов; обезжир молоко для лактобактерий

-синтетические(содержат только глюкозу, фосфаты хлориды и сульфаты)

-комплексные(комбинированные)

2) По консистенции:

-Жидкие (бульоны)

-Полужидкие (агар)

-Плотные (Агар);

3) По составу:

-простые – для культивир прототрофных м/орг(пит.агар, пит.бульон, МПА и др.)

-Сложные- для культив м/орг имеющих сложные пит потребности

4) По назначению:

-Специальные: кровяной агар(стрептококки, изуч гемолитич св-в бакт), сывороточ агар (коринобакт дифтерии, менингококков) среда Китта-Тароцци и др(для культив облигатн анаэробов)

-Элективные: желточно-солевой агар(для культ стафиллококков), желточн бульон(сальмонелл), щелочной агар(вибрионов) и др.

-Диф-диагност: для первичн посева клин мат-ла(среды Эндо, Левина, Плоскарева)и изуч биохим св-в энтеробактерий

Требования к пит средам:

1)Достаток пит вещ-в(источн солей, органогенов)

2)Стерильность

3) Оптим знач Рн и буферность

4)Оптим окисл-вост потенциал.

5)Изотоничность

6)Влажность(для плотн сред)

7)Прозрачность(для жидк сред)

8)Опред вязкость для плотн и полужидк сред(зависит от кличества добавляемого агар-агара)

Реакция агглютинации. Реакция пассивной гемагглютинации(РПГА). Компоненты. Методы постановки. Практическое применение.

Р-я агглютинации – это склеивание и выпадение в осадок микробов под действием АТ в присутствии электролитов. Образуется осадок, называемый агглютинатом. Проводится 2 методами: на стекле и в пробирках. На стекле. Ингредиенты: пробирки, физ. раствор, сыворотка против дизентерии Зонне, сыворотка против дизентерии Флекснера, предметное стекло, пипетки. Проведение: на стекло на разные участки наносят по 1 капле физ.раствора и сывороток, в каждой капле иммульгирует немног неизвестного м/о. Через 2-5 мин. на темном фоне проводят учет. учет: в капле физ. раствора и в капле сыворотки Флекснера- равномерное помутнение; в капле сыворотки Зонне- прозрачная жидкость и хлопья осадка. Интерпретация: на соответствие неизвестного м/о(АГ) с АТ известной сыворотки указывает прозрачная жидкость и хлопья. Вывод: неизвестный м/о- возбудитель дизентерии Зонне. В пробирках. Ингредиенты: сыворотка больного, физ. р-р, пипетки, диагностикум. Постановка: предварительно в пробирках двукратно титруют сыворотку больного(1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600), затем к каждой пробирке +2 капли диагностикума, инкубируют. Учет: прозрачная жидкость и осадок на дне пробирок выявлены в разведениях 1:100, 1:200, 1:400; мутная жидкость при 1:800, 1:1600. Интерпретация: 1) на наличие АТ указывает прозрачная жидкость и осадок на дне пробирки; 2) на отсутсвие АТ в сыворотке больного указывает мутная жидкость; 3) на титр АТ указывает наибольшее разведение сыворотки, при котором выявлены АТ. Вывод: титр АТ обнаружен в разведении 1:400. Ее используют для определения АТ в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе, брюшном тифе и паратифах и других инфекционных болезнях, а также при определении возбудителя, выделенного от больного. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические АТ.

Учет РПГА. Ингредиенты: планшет, сыворотка больного, физ. р-р, пипетки, эритроцитарный диагностикум. Постановка: предварительно в лунках планшета 2-кратно титруют сыворотку, затем в каждую лунку добавляют эритр. диагностикум, инкубируют. Учет: а) осадок эритроцитов с неровными краями, занимающий 2/3 дна лунки планшета(«зонтик»), выявлен при разведениях 1:100, 1:200, 1:400; б) осадок эритроцитов с ровными краями, занимающий не > 1/3 дна лунки(«пуговка»), выявлен при разведениях 1:800, 1:1600.Интерпретация: на наличие АТ указывает зонтик, на отсутствие АТ указывает пуговка; на титр АТ указывает наибольшее разведение сыворотки при котором выявлены АТ. Вывод: титр АТ= 1:400. РПГА очень часто используют для определения противодифтерийных антител.

 

ИНГРЕДИЕНТЫ

Пробирки, сыворотка больного, физ р-р,комплемент(сыворотка морской свинки)эритроциты барана,гемолитическая сыворотка(кролика)диагностикум

ПОСТАНОВКА

РЕАКЦИЯ В 2 ЭТАПА.

Параллельно ставят 1-ну опытную и 2-е контрольные пробирки:

1.контроль сыворотки пациентки(КС)к сывороткедобавляют физ р-р и комплемент,инкубируют и на 2-ом этапе добавляют гемолитическую систему(смесь эритроцитов и сыворотки кролика)инкубируют,проводят учет

2.контроль диагностикума/антигена(КА) на 1-ом этапе к диагностикуму добавляют физ р-р и комплемент,инкубируют,добавляют гемолитическую систему,инкубируют проводят учет

3.опытная пробирка(О) к сыворотке пациента добавляют диагностикум и комплемент,инкубруют, добавляют гемолитическую систему,инкубируют, проводят учет

УЧЕТ

КС КЛ О

А) красная прозрачная жидкость(лаковая кровь)выявлена в пробирках КС,КЛ

Б) прозрачная бесцветная жидкость и осадок на дне выявлена в пробирке О

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

1. на наличие антител в опытной пробирке указывае прозрачная бесцветная жидкость с эритроцитами на дне(гемолиз эритроцитов не произошел)

2.на отсутствие антител в сыворотке пациента указывает лаковая кровь(произошел гемолиз)

5.ВЫВОД. У ПАЦИЕНТА АНТИТЕЛА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ВЫЯВЛЕНЫ.. Реакция лизиса -серологический тест, основанный на растворении цельноклеточного АГ, соединенного с AT, в присутствии комплемента. В зависимости от АГ, участвующих в реакции лизиса, ее называют реакцией спирохетолиза, вибрионолиза, бактериолиза, гемолиза и т.д. AT, участвующие в реакции, соответственно называют спирохетолизинами, вибрионолизинами, гемолизинами и т.д. Комплемент проявляет литическое действие только в присутствии иммунного комплекса «клетка + лизин». Большинство м/о, за исключением холерного вибриона и трепонем, малочувствительны к литическому действию комплемента. Поэтому реакция лизиса не нашла широкого применения в лабораторной практике.

 

ИНГРЕДИЕНТЫ, ПОСТАНОВКА.

Реакцию ставят в 2 этапа.

1.к предварительно раститрованной сыворотке больного в лунки планшета добавляют вирусный диагностикум, инкубируют.

2. добавляют в лунки куриные эритроциты (парагрипп,эритроциты морской свинки)инкубируют проводят учет

УЧЕТ. 1. ВЕРХНИЙ РЯД ЛУНОК

А) ПУГОВКИ(осадок эритроцитов с ровными краями, занимающие 1/3дна лунки)выявлены при разведениях 1/10 – 1/120

Б) ЗОНТИКИ(осадок эритроцитов с неровными краями занимающие 2/3 дна лунки)выявлены при разведениях 1/40 – 1/320

2. А) ПУГОВКИ выявлены при разведениях 1/10 – 11/80

Б) ЗОНТИКИ выявлены при разведениях 1/160 – 1/320

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

А) на наличие антител указывает ПУГОВКА

Б) на отсутствие антител указывает ЗОНТИК

В) на титр антител указывает наиболее разведенные сыворотки, при кот. Выявляют антитела

Вывод. А)Титр антител на 7-й день = ½;Б На 14-й день=1/80; В)диагноз грипп А подтв.т.к титр увеличился в 4раза

РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ

Эту реакцию ставят при диагностике заболеваний возбудители которых обладают цпд(цитопатическим действием)например полиомиелит.

Реакцию ставят в 2 этапа.

1.к раститрованой пробирке сыворотки 1/2- 1/4 – 1/8 и т.д. добавляют вирусный диагностикум, инкубируют.

2.в пробирки добавляют взвесь культуры культуры клеток в питательной среде(199)вазелин. Масло, инкубируют проводят учет

УЧЕТ

1-й ряд пробирок сыворотка на 7-й день заболевания

А) желт. Жидкость выявлена при разведениях 1/2 – ¼ - 1/8 – 1/16

Б) розовая жидкость выявлена при разведениях 1/32 – 1/64

2-й ряд сыворотка через 14 дн. от начала заболевания

А)желт. Жидкость выявлена при разведениях 1/2 – 1/4 - 1/8 – 1/16

Б)розов. Жидкость выявлена при разведениях 1/32 – 1/64

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

А. НА НАЛИЧИЕ АНТИТЕЛ УКАЗЫВАЕТ ЖЕЛТ. ЖИДКОСТЬ

Б. НА ОТСУТСТВИЕ АНТИТЕЛ УКАЗЫВАЕТ РОЗОВАЯ ЖИДКОСТЬ

В. На титр антител указывает наиболее разведенные сыворотки, при которых выявляют антитела

ВЫВОД.а) титр антител на 7й день заболевания=1/16

Б) титр на 14-й день=1/16

Т.к титр антител не изменился диагноз полиомиелит пациенту не подтаерждаем.

Необходимо провести диф диагностику от др. энтеровирусных заболеваний.

64. Реакции имунофлюорестенции, компоненты, практическое применение. «Флуоресцирующие антитела» представляют собой специфические иммуноглобулины, «помеченные» красителем типа флуоресцеина или родамина, флуоресцирующим при облучении ультрафиолетовым или синим светом. Прямая иммунофлуоресценция (А—аф). Вирусный антиген (А) (в виде, например, фиксированного ацетоном зараженного вирусом монослоя клеток на покровном стекле) обрабатывают конъюгированной с флуоресцеином антивирусной сывороткой {аф). Избыток ар отмывают и клетки просматривают с помощью микроскопа, снабженного сильным источником света (лампа с парами ксенона или ртути) и фильтром, задерживающим лучи всех длин волн, кроме коротковолновых. Между объективом и окуляром вводят дополнительные фильтры, которые поглощают все синие и ультрафиолетовые лучи; таким образом, препарат выглядит черным, за исключением тех мест, где флуоресцеин излучает зелено-желтый свет. Непрямая иммунофлуоресценция (А—а—гф). Для этого метода, иногда называемого методом «сэндвича», характерно то, что антивирусные антитела (а), не меченные красителем, выполняют роль «начинки в сэндвиче». Они связываются как с антигеном (А), так и с антигаммаглобулином, конъюгированным с флуоресцеином (гф), который добавляют в конце реакции. Например, если в качестве антивирусной сыворотки берут сыворотку человека в период выздоровления, то целесообразно использовать глобулин (г), полученный путем иммунизации коз или кроликов нормальным человеческим глобулином. Непрямой метод иммунофлуоресценции более чувствителен, чем прямой, и, что особенно важно в диагностике, для тестирования взаимодействия любого антигена с соответствующими антителами, образующимися в организме человека, необходим лишь один вид меченого реагента, например конъюгированный с флуоресцеином козий у-глобулин против глобулина человека. Иммунофлуоресценция комплемента (А—а—К—гф). После того как комплекс антиген—антитело свяжет комплемент, в систему вносят конъгогированнкй с флуоресцеином иммуноглобулин против комплемента. Метод сопряжен с рядом трудностей и используется не так широко, как описанные выше варианты. Иммунофлуоресценция обладает двумя основными преимуществами по сравнению с другими серологическими методами. В исследовательской работе этот метод позволяет определить, какие клетки в органе содержат вирус, и установить локализацию специфических вирусных антигенов в зараженной клетке. Несмотря на то что трудности, обусловленные неспецифической флуоресценцией, несколько задерживают широкое внедрение метода в диагностических лабораториях, он имеет большие возможности для ускоренной идентификации вируса как непосредственно в материале, полученном при биопсии или аутопсии, так и после пассирования вируса в культуре клеток.

Чаще всего РИФ используют для быстрого обнаружения возбудителя в патологическом материале. Учет результатов реакции осуществляется с помощью люминесцентного микроскопа, в оптическую систему которого устанавливается набор светофильтров, обеспечивающих освещение препарата ультрафиолетовым или сине-фиолетовым светом с заданной длинной волны. Это заставляет флюорохром светиться в заданном диапазоне спектра. Исследователь оценивает характер свечения, форму, размер объектов и их взаимное расположение.

 

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ(ИФА).ИММУНОБЛОТИНГ(ИБ).КОМПОНЕНТЫ ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ. ИФА.

ИНГРЕДИЕНТЫ, ПОСТАНОВКА

на фарм предприятии на дно лунок планшета адсорбируют австралийский антиген(Hbs антиген)

В лаборатории/станции переливания крови в лунки наливают контрольные сыворотки и сыворотки пациентов(7- чел).инкубируют, промывают и доб-т античеловеческую сыворотку, конъюгированную с ферментом(пероксидаза).инкубируют промывают и добавляют реактив на фермент (5- аминосалициловая кислота(р-р + перекись Н 3%)инкубируют проводят учет

УЧЕТ

1)контрольные лунки

А)заведомо положительная сыворотка(А11)- выявлена коричневая жидкость

Б)заведомо отрицательная сыворотка(А12)- выявлена желт. Жидкость

В)исследуемые сыворотки.(желт. Жидкость выявлена в лунках А3,А4,А6)

г) коричневая жидкость в лунках,(А1,А2,А5,А7)

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

1)На наличие антител к Hbs антигену указывает коричневая жидкость

2)на отсутствие антител указывает желт.

ВЫВОД. У пациентов А1, А2, А5, А7 выявлены антитела к Hbs антигену.

ИММУНОБЛОТИНГ

1.ИНГРЕДИЕНТЫ (полоски из нитроциллюлозы на кот. Путем электрофореза разделены антигены ВИЧ1 и ВИЧ2)контейнеры/ванны, исследуемые сыворотки пациентов, заведомо положительная сыворотка к ВИЧ1, заведомо положительная сыворотка к ВИ2,конъюгат античеловеческой сыворотки,реактив на фермент.

2.ПОСТАНОВКА предварительно в контейнерах инкубируют сыворотки со стрипами, затем промывают стрипы и добавляют конъюгат, вновь инкубируют и после промывки добавляют реактив, инкубируют проводят учет

УЧЕТ

1)КОНТРОЛЬНЫЕ СТРИПЫ

А)контроль отсутст-е поставле-й иб(№22) коричневой линии на полоске не выявлено

Б)заведомо положительная сыворотка к ВИЧ1(№23)выявлено 3 коричневы линии сверху различной окраски

Г)заведомо положительная сыворотка к ВИЧ2(№24)выявлено 2 коричневые линии в центральной части стрипа

2)ИССЛЕДУЕМЫЕ СЫВОРОТКИ(№1 - №21)

А) в нижней части всех стрипов выявлены коричн. Линии в кол- ве 1-й линии

Б)светло- коричневая линия выявлена в центральной части стрипа№5

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

1)НА ПРОИЗОШЕДШУЮ РЕАКЦИЮ ИБ УКАЗЫВАЮТ

- коричн. Линия в нижней части стрипа

2)на выявление антител к ВИЧ1 указывает 3 коричневые линии в верхней части стрипа

3)на выявление антите к ВИЧ2 указывают 2 коричневые линии в центральной части стрипа

5.ВЫВОД. выявлены врачебные ошибки

А) сомнительный результат был подтвержден пациенту № (это не верно т.к?

Б)пациента №6 обязаны были отправить на дополн. Обследование(а о пациенте №5 забыли)

 

ВАКЦИНЫ.ПРИНЦИПЫ КЛАССИФИКАЦИИ ВАКЦИН.АССОЦИИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ. ТРЕБОВАНИЯ ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ВАКЦИНАМ.

Вакцины — иммунобиологические препараты, предназначенные для активной иммунопрофилактики, то есть для создания активной специфической невосприимчивости организма к конкретному возбудителю.

По назначению вакцины делятся на профилактические и лечебные.
По характеру микроорганизмов, из которых они созданы, вакцины бывают:- бактериальные,- вирусные,- риккетсиозные.

Существует моно- и поливакцина - приготовленные соответственно из одного или нескольких возбудителей.
По способу приготовления различают вакцины:

живые вакцины;убитые вакцины;комбинированные.

Для повышения иммуногенности к вакцинам иногда добавляют различного рода адъюванты (алюмо-калиевые квасцы, гидроксид или фосфат алюминия, масляную эмульсию), создающие депо антигенов или стимулирующие фагоцитоз и таким образом повышающие чужеродность антигена для реципиента.

Ассоциированные вакцины.

Для приготовления обычно используют убитые микробы или их компоненты. Их применение определяют эпидемическая обоснованность (против детских или раневых инфекций), иммунная совместимость и технологическая возможность комбинирования нескольких Аг. Наиболее известные ассоциированные препараты: адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС-вакцина), тетравакцина (вакцины против брюшного тифа, паратифов А и В, а также столбнячный анатоксин) и АДС-вакцина (дифтерийно-столбнячный анатоксин).

Требования предъявляемые к вакцинам “ Идеальной” вакциной может считаться препарат, обладающий такими качествами, как:

1. полной безвредностью для привитых, а в случае живых вакцин - и для лиц, к которым вакцинный микроорганизм попадает в результате контактов с привитыми;

2. способностью вызывать стойкий иммунитет после минимального количества введений (не более трех);

3. возможностью введения в организм способом, исключающим парентеральные манипуляции, например, нанесением на слизистые оболочки;

4. достаточной стабильностью, чтобы не допустить ухудшения свойств вакцины при транспортировке и хранении в условиях прививочного пункта;

5. умеренной ценой, которая не препятствовала бы массовому применению вакцины.

68 Живые вакцины.Разновидности живых вакцин.Преимущества и недостатки живых вакцин.Примеры Живые вакцины изготовляют на основе ослабленных штаммов микроорганизма со стойко закрепленной авирулентностью (безвредностью). Вакцинный штамм после введения размножается в организме привитого и вызывает вакцинальный инфекционный процесс. У большинства привитых вакцинальная инфекция протекает без выраженных клинических симптомов и приводит к формированию, как правило, стойкого иммунитета. Примером живых вакцин могут служить вакцины для профилактики краснухи, кори, полиомиелита, туберкулеза, паротита. Положительные стороны: по механизму действия на организм напоминают "дикий" штамм, может приживляться в организме и длительно сохранять иммунитет (для коревой вакцины вакцинация в 12 мес. и ревакцинация в 6 лет), вытесняя "дикий" штамм. Используются небольшие дозы для вакцинации (обычно однократная) и поэтому вакцинацию легко проводить организационно. Последнее позволяет рекомендовать данный тип вакцин для дальнейшего использования. Отрицательные стороны: живая вакцина корпускулярная - содержит 99% балласта и поэтому обычно достаточно реактогенная, кроме того, она способна вызывать мутации клеток организма (хромосомные аберрации), что особенно опасно в отношении половых клеток.Живые вакцины содержат вирусы-загрязнители (контаминанты),особенно это опасно в отношении обезьяннего СПИДа и онковирусов.К сожалению, живые вакцины трудно дозируются и поддаются биоконтролю, легко чувствительны к действию высоких температур и требуют неукоснительного соблюдения холодовой цепи.

69.Инактивированные и химические вакцины, получение и применение.Примеры. принцип “депо”. ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ содержат инактивированные вакцинные штаммы возбудителей или их выделенные и очищенные от примесей антигены. Они не способны размножаться в организме привитого, но в состоянии вызывать защитный иммунный ответ. Их готовят путем накопления вакцинных штаммов в куриных эмбрионах, например, гриппозная вакцина, или клеточных культурах, например, коревая вакцина. Для инактивации (подавления способности к заражению) вакцинного штамма используют разные методы: воздействие формалином, ацетоном, фенолом, ультрафиолетовое излучение. Такие вакцины стимулируют более слабый иммунный ответ и часто требуют применения нескольких доз. Инактивированные вакцины применяют для профилактики паратифов, дизентерии, холеры, коклюша, лептоспироза, сыпного тифа, гриппа, полиомиелита, клещевого энцефалита.Основной способ получения химических вакцин заключается в выделении протективных антигенов, обеспечивающих развитие надежного иммунитета, и очистки этих антигенов от балластных веществ)

 

СЕРОПРОФИЛАКТИКА И СЕРОТЕРАПИЯ. АНТИТОКСИЧЕСКИЕ И АНТИМИКРОБНЫЕ СЫВОРОТКИ. ИММУНОГЛОБУЛИНЫ.ПРИНЦИП ПОЛУЧЕНИЯ, ПРИМЕНЕНИЕ.ПРИМЕРЫ.

Серотерапия (от лат. serum — сыворотка и терапия), метод лечения заболеваний человека и животных (преимущественно инфекционных) при помощи иммунных сывороток. Лечебный эффект основан на явлении пассивного иммунитета — обезвреживании микробов (токсинов) антителами (антитоксинами), содержащимися в сыворотках, которые получают путём гипериммунизации животных (главным образом лошадей). Для Серотерапия применяют также очищенные и концентрированные сыворотки — гамма-глобулины; гетерогенные (полученные из сывороток иммунизированных животных) и гомологичные (полученные из сывороток иммунизированных или переболевших людей). Сыворотки иммунные применяют при лечении дифтерии (преимущественно в начальной стадии болезни), ботулизма, при укусах ядовитых змей; гамма-глобулины — при лечении гриппа, сибирской язвы, столбняка, оспы, клещевого энцефалита, лептоспироза, стафилококковых инфекций (особенно вызванных антибиотикоустойчивыми формами микробов) и других заболеваний. Для предупреждения осложнений Серотерапия (анафилактический шок, сывороточная болезнь) сыворотки и гетерогенные гамма-глобулины вводят по специальной методике с предварительной кожной пробой

Серопрофилактика (от лат. serum — сыворотка и профилактика), метод предупреждения инфекционных болезней человека и животных при помощи иммунных сывороток; создается сравнительно непродолжительный (1—4 нед) пассивный иммунитет. В современной медицинской практике для Серопрофилактика все шире применяют гамма-глобулины. Серопрофилактика проводят в эпидемических очагах лицам, имевшим контакт с больными (например, корью, коклюшем), при травмах (для предупреждения столбняка), при укусах животных (для профилактики бешенства) и клещей (для предупреждения клещевого энцефалита). Плановая Серопрофилактика осуществляется для профилактики инфекционного гепатита. В ветеринарной практике применяют Серопрофилактика колибактериоза телят, паратифа поросят и т. п. При некоторых инфекциях используют глобулиновые фракции сывороток (болезнь Ауески) или сыворотку молока иммунизированных животных (противоящурный иммунолактон.

Антитоксические Сыворотки иммунопрепараты, изготовляемые из крови иммунных людей и животных и применяемые для лечения пассивной иммунопрофилактики токсинемических инфекций (дифтерии, столбняка, ботулизма, некоторых форм стафилококковой инфекции и др.). Лечебное и профилактическое действие А. с. основано на том, что содержащиеся в них антитоксины (см.) создают пассивный иммунитет, к-рый защищает организм от токсического влияния токсинов с момента введения до 30 - 40-го дня после введения. А. с. не оказывают прямого ингибирующего действия на микробы, продуцирующие токсины, и их эндотоксины. Силу А. с. измеряют в международных ед. (ME) или АЕ, соответствующих минимальному количеству с-ки, нейтрализующему стандартную ед. того или иного токсина. Антимикробные сыворотки содержат антитела против клеточных антигенов возбудителя. Их получают иммунизацией животных клетками соответствующих возбудителей, и дозируют в миллилитрах. Антимикробные сыворотки могут применяться при лечении: сибирской язвы, чумы, стрептококковых инфекции, стафилококковой инфекции, синегнойной инфекций.

Их назначение определяется тяжестью течения заболевания и в отличие от антитоксических не является обязательным.При лечении больных с хроническими, длительно, вяло текущими формами инфекционных заболеваний, возникает необходимость стимулировать собственные механизмы специфической зашиты путем введения различных антигенных препаратов и создания активного приобретенного искусственного иммунитета (иммунотерапия антигенными препаратами). Для этих целей используются в основном лечебные вакцины, и значительно реже - аутовакцины или стафилококковый анатоксин.

Иммуноглобулины cоставная часть белков сыворотки крови. Они содержат защитные антитела, способные нейтрализовать болезнетворное действие различных микроорганизмов - в том числе и вирус клещевого энцефалита. Иммуноглобулины оказывают губительное действие на вирусы, бактерии, спирохеты и простейшие, что определяет их важную роль в предупреждении и лечении ряда инф. заболеваний, особенно у детей.Обычно Иммуноглобулины получают из крови людей, переболевших определенным заболеваниемм, животных (чаще лошадей), к-рым специально вводили соответствующие вакцины. Иммуноглобулины образуются на 2-й нед. после начала иммунизации или болезни.
С профилактич. целями Иммуноглобулины вводят внутримышечно лицам, которые имели контакты с больными и могли заразиться. Для лечения больных Иммуноглобулины рекомендуется вводить как можно раньше от начала заболевания (желательно в первые 2 дня). Как правило, Иммуноглобулины сокращают длительность лихорадочного периода, уменьшают тяжесть заболевания и возникновение возможных осложнений. В настоящее время используются Иммуноглобулины против гриппа, клещевого энцефалита, краснухи, свинки, инфекционного гепатита, кори, оспы, дизентерии, скарлатины, коклюша и сибирской язвы.

 

Стафилококки, виды. Их св-ва. Роль стафилококков при стоматологических и других заболеваниях.Значение и бактерионосительства. Принципы микробиологической диагностики. Препараты для специфического лечения.

Стафилококк – один из самых известных микроорганизмов. Стафилококки – это неподвижные условно-патогенные (вызывающие заболевание только при снижении защитных сил организма) бактерии. Представители данного рода — неподвижные грамположительные кокки, диаметр клетки которых составляет от 0,6 до 1,2 мкм. Для представителей рода характерно расположение микробных клеток «виноградными гроздьями» в чистой культуре. Наиболее известны 3 вида стафилококков: Стафилококк золотистый (Staphylococcus aureus); Стафилококк эпидермальный (Staphylococcus epidermidis); Стафилококк сапрофитный (Staphylococcus saprophyticus); Стафилококк гемолитический (Staphylococcus haemolyticus). Стафилококки — факультативные анаэробы, при этом они не образуют спор или капсул. В состав этого рода входят патогенные и условно-патогенные для человека виды, колонизирующие носоглотку, ротоглотку и кожные покровы. Хорошо развиваются на обычных пит.средах,рН=7,2-7,4 при t=37 гр.С.При комнатной температуре, широкой аэрации и рассеянном свете вырабатывают золотистые, белые и лимонно-желтые пигменты, к-ые не раствор-ся в воде, но раств-ся в эфире, бензине, ацетоне,алкоголе.Наилучшее образ-ии пигментов на молочном агаре и картофиле при t=20-25 гр.С. На мясо-пептидном агаре раст. виде выпуклых с ровными краями колоний размером 1-4 мм.в диаметре, имеют грубозернистую структуру и плотный центр, непрозрачный. На мясо-петидном бульоне- помутнение с выпадением осадка, на пов-ти образуют пленку. Хорошо растут на картофеле и свернутой своротке. На желатине(ч/з 1-2 сут.) по ходу укола обильный рост и разжижение среды, к-ая к 4-5 дню принимает вид воронки, наполненной жидкостью. На кровяном агаре вызывают гемолиз. Свойства:Стафилококки разжижают желатин, свертывают молоко, восстанавливают нитраты в нитриты, продуцируют уреазу, каталазу, фосфотазу. Синтезируют свыше 25 белков, токсинов и ферментов патогенности, энтерококки. Многие штаммы вырабатывают пенициллиназу, разрушающ. пенициллины. Важное клиническое значение бактерионосительства определяется достаточной типичностью процесса переноса стафилококков с наружных кожных покровов и слизистых оболочек во внутреннюю среду организма хозяина с развитием широкого спектра заболеваний. Это позволяет рассматривать стафилококковое бактерионосительство как один из ведущих факторов риска развития различных гнойно-септических инфекций. Патогенные стаф-ки у чел-ка выз-т абсцессы, панариций,фурункулез,периостит, остеомиелиты, периотониы, менингиты,конъюктивиты. Развиию гнойничковый поражений кожи и фурункулеза способ. Сах.диабе, фенилкетонурия, авитаминозы, потливость, мелкие травмы кожи профессионально характера. В ряде слчуаев стафилококки обуславл.вторичные заболевания при оспе, гриппе, раневых инф., а так же послеоперционных нагноений. Особенно опасен стафилококковый сепсис и стафил.пневмонии детей. При употреблении продуктов обсемененных патогенными стафилакокками происходит токсикоинф. При смеш.инф. их обнаруж. вместе со стрептококками при раневых инф. дифтерии, туберкулезе, актиномикозе. Во всех странах мира отлич. рост внутрибольничных заражений в акушерстве, хирургических и детских стационарах, увеличение носительства среди персонала и пациентов.Диагностика:исследуется:гной, мокрота, кровь, продукты, рвоные массы, промывные воды.Цель-выявление патогенных тафилококков.Исследования(бактериоскопические, бактериологические и биологические). Из гноя дел-т мазки, окраш. по Грамму->посев на желточно-солевой,молочно-солевой,кровяной агары и мясо-пептидный агар с кристаллическими фиолетывыми;чист.культуру исследуют на гемолитическую, плазмокоагулирующую и гиалурунидазную способнось и вирулентность, и хар-р пигмента. Для выявления источников инф.производя фаготипирование. Выделенные кльтуры испы.на чуствительность к а/б. Когда не удается обнаружить возбудитель (чаще при остеомиелите)исследуют сывороткуб-ных на наличие антитоксинов.Лечение: пенициллины, тетрациклины, норсульфазол, сульфазол, противостафилококковый гамма-глобулины. Для снятия интоксикации и повышения иммуноглобул. Сил орг-ма(глюкоза, переливание крови).При хр.нагноит.процессах:стафил.поливалентная вакцина, стафилококковый анатоксин, антитоксическая сыворотка, антистафил.плазма. Для борьбы со стафилококками, устойчив.к а/б и сульфаниламидам-полусинтетический препарат пенициллина(метициллин,оксациллин,ампициллин). Новые препараты хиноксидин,диоксидин, ристомицин.

 

Характерные св-ва прокариотов, эукариотов, вир. Принц классиф прокариотов.

Прокариоты - однок-ые м/орг, бактерии отлич-ся слабой морф-ой дифферинцировкой(доядерные). Для них характерно:

1)Отсутствие окруж мембр ядра(носит-ем наслед-сти явл-ся нуклеотидная замкнутая в кольцо нить ДНК - единственная бакт. хромосома.

2)Отсутствие органелл(митохондрий, хлоропластов, компл. Гольджи)

3)Размнож-ие бинарными амитотическим делением (на двое)

4)Особое стр-ие и сост кл стенки, малые размеры рибосом, своеобр-ые ферменты белкового синтеза

Классификация прокариот:

Прокариоты- разделены на 35 групп:

Спирохеты, несколько гр собственно бакт(грам+ кокки, спорообр грам+ кокки и пал-ки, грам- аэробн пал-ки и кокки), риккетсии, хломидии, микобакт, микоплазмы. В основе дел-ия прокариот на группы лежат:

форма и стр-ие клетки, отнош-ие к окраске по граму, тип метабол-ма и др. Внутри гр выделены более мелкие таксоны: порядок, сем-во, род, вид. Название м/орг сост как правило из родового и видового названий.

Эукариоты - относит-но более высоко орг-ые одноклет и многоклет орг-мы, имеющие сходства с кл животных и раст(грибы). Для них хар-но:

1)Наличие истинного ядра, в кот-ых нах-ся набор линейных хромосом распред-ся в ходе митоза в доч-ие кл

2)Различные органеллы(митохондрии, компл.Гольджи, эндоплазматический ретикулум и др.)

3)Рибосомы большего размера чем у прокариот

4)Способность к эндоцитозу(захвату частиц и раств-ых вещ-в)

Вирусы - мельчайшие неклеточные орг-мы. Основные св-ва:

1)Отсутствие кл строения

2)Отсутствие собст-ых метаб-их сист (у вирионов нет обмена с внешн средой)

3)Наследственный мат-л(геном) – один тип нуклеиновой к-ты(ДНК или РНК)

4)Облигатные внутриклет паразиты

Классификация вирусов:

1)По типу нуклеиновой к-ты

2)По наличию суперкапсида(простой, сложный)

3)По размеру вириона(крупн,сред, мел)

4)По типу симметрии(спиральный, многогранный, смешанный)

5)По особенности репродукции(в ядре, цитоплазме)

 

4.Методы исследования в микробиологии.

1)Микроскопический – изучение микробов в окрашенном или неокрашенном состоянии с помощью различных типов микроскопов. Метод позволяет опре