Свернутая сыворотка, кровяной агар

Выращивается на средах с теллуритом калия или натрия, ингибирующего рост

Сопутствующей микрофлоры: дифтерийная палочка дает колонии черные или

Темно-серые за счет восстановления металла

Факторы адгезии, колонизации и инвазии (пили, микрокапсула, гиалуронидаза,

нейраминидаза, протеаза).

Токсический гликолипид клеточной стенки, оказывающий разрушающее действие

на клетки ткани в месте размножения возбудителя.

Экзотоксин - гистотоксин (блокада синтеза белка на рибосомах); обладает

тропизмом к мембране клеток миокарда, паренхимы сердца, надпочечников.

нервных ганглиев; Особенности синтеза дифтерийного токсина клетками

возбудителя: токсический полипептид контролируется генами возбудителя,

транспортный полипептид (отвечает за доставку токсина к клеткам-мишениям)

контролируется генами профага; следовательно, только лизогенные клетки могут

Обладать токсигенностью.

У C. diphtheriae выделяют О- и К-Ag

О-Ag коринебактерий преимущественно представлены межвидовыми Ag

Поверхностные термолабильные К-Ag обеспечивают видовую специфичность и

проявляют выраженную иммуногенность (около 58 биоваров).

 

Микроскопический – обнаружение в мазках из зева или из чистой культуры

типичных дифтерийных палочек;

2. Бактериологический – посев патологического материала (мазки из зева и носа,

фибриновые пленки) на теллуритовый кровяной агар с последующей

идентификацией на жидких средах Гисса и определением токсигенности в реакции

преципитации в агаре (см. рис.9);

 

3. Серологический – реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с парными

сыворотками; РНГА может использоваться для оценки антитоксического

иммунитета (диагностический титр 1:40)

При лечении дифтерии обязательно используется антитоксическая сыворотка

(лошадиная) или антитоксический иммуноглобулин (донорский)

 

Создание искусственного иммунитета обеспечивается: вакцинами АКДС, АКДС-М,

АДС, АДС-М у детей и подростков; у взрослых – дифтерийным анатоксином.

2. Микобактерии, классификация, характеристика биологических свойств возбудителя туберкулеза, виды микобактерий, факторы патогенности. Иммунитет, его особенности, методы микробиологической диагностики, специфическая профилактика туберкулеза.

Род Mycobacterium

Виды: M.tuberculosis

M.bovis

M.africanum

Грамположительные, неподвижные,

полиморфные (от длинных до кокковидных форм), прямые или изогнутые

палочковидные бактерии. Длиной от 1 до 10 мкм и шириной от 0,2 до 0,6 мкм.

Строгие аэробы

Требовательны к питательным средам: необходимы аминокислоты,

витамины и пр. (среда Ливенштейна-Йенсена содержит глицерин,

картофельный крахмал, аминокислоты, яичный желток, малахитовый

зеленый для задержки роста сопутствующей микрофлоры)

Растут медленно (2-3 недели)

Колонии кремового цвета, сухие, морщинистые, трудно снимаются с агара

(см. рис.3)

Патогенность связана с химическим составом клетки

Корд-фактор препятствует фагоцитозу, нарушает функцию митохондрий, тормозит

миграцию лимфоцитов, способствует формированию «жгутов» и «кос»

Жирные кислоты, воск Д и пр. компоненты обладают токсическими свойствами

В антигенном отношении однороден

Носители антигенных свойств: липиды (выполняют функцию адъювантов),

полисахариды, корд-фактор

Основной носитель антигенных свойств: белок – туберкулин; вызывает в

организме иммунный ответ (гиперчувствительность замедленного типа - ГЗТ);

используется в качестве диагностического препарата (туберкулиновая проба

Манту)

Туберкулёз

Микроскопический – микроскопия мокроты, окрашенной по Цилю-Нильсену (см.

рис.2); люминисцентная микроскопия.

2. Бактериологический – посев мокроты на элективные среды (Левенштейна-

Йенсена) с последующей идентификаций выделенных микобактерий. Особенности

бактериологического метода при диагностики туберкулеза: длительность

исследования; предварительная обработка мокроты серной кислотой с целью

подавления сопутствующей микрофлоры; определение чувствительности к

химиотерапевтическим препаратам и антибиотикам только методом серийных

разведений;

3. Биологический – заражение морских свинок материалом от больного; через 5-10

суток развивается лимфаденит, через 3-4 недели – положительная туберкулиновая

проба; через 1-2 месяца – генерализованный процесс приводит к гибели животного

4. Иммунологический – выявление антигенов микобактерий из патологического

материала: иммунофлюоресценция (ИФ), иммуноферментный анализ (ИФА).

5. Аллергический – выявление ГЗТ с целью отбора контингента на ревакцинацию; с

целью выявления заболевших и инфицированных. Суть метода: введенный

внутрикожно очищенный туберкулин вызывает ГЗТ; размер папулы и гиперемии

зависит от выраженности защитных реакций, что позволяет судить о выраженности

противотуберкулезного иммунитета и возможного заболевания (см. рис.4)

6. Генетический – полимеразная цепная реакция (ПЦР)

 

ИММУНИТЕТ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ

• Клеточный - гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ)

• Нестерильный

• Основа иммунной защиты - незавершенный фагоцитоз

• Антитела - «свидетели» инфекционного процесса

Плановая массовая иммунизация живой вакциной БЦЖ на 5-й день с момента рождения; механизм заключается в формировании нестерильного иммунитета

Ревакцинация – 7 – 12 – 17 – 22 и 27-30 лет (лица, отрицательно реагирующие на

пробу Манту)

 

3. Микобактерии лепры, биологические свойства, факторы патогенности, лабораторная диагностика.

Микобактерии лепры

M. leprae

 

Род Mycobacterium

 

Гр+ палочки, образуют плотные шаровидные скопления (лепрозные шары). Кислотоустойчивы

На искусственных не культивируются

Те же, что и у других микобактерий.

Термостабильный полисахаридный и термолабильный белковый, который высокоспецифичен для микобактерий лепры.

 

Бактериоскопический с окраской по Цилю-нильсону. Бактериологический

Профилактики нет. Лечение проводят в лепрозориях. Применяют антибиотики.

4. Трепонема сифилиса, классификация, характеристика биологических свойств, факторы патогенности, патогенез сифилиса, иммунитет, лабораторная диагностика.

Трепонема сифилиса

- сем. Spirochaetaceae

род Treponema

вид: Tr. pallidum («бледная трепанема»)

Морфология: протоплазматический цилиндр, 6-20 мкм, покрыт ЦПМ и тонкой клеточной

стенкой (пептидогликан, полисахариды, липиды), 8-12 завитков, в цитоплазме – 1 или

несколько фибрилл, прикрепленных к полярным дискам (см.рис11,12,13)

• Подвижен: вращательные, маятникообразные, поступательные, волновые движения

• Плохо фиксирует красители (используется окраска по Романовскому)

• Анаэроб

 

В организме образует цисты и L-формы

Плохо культивируется на искусственных питательных средах

• Для культивирования используют кроликов (заражение в яичко)

•

Выраженная антифагоцитарная активность

• ЛПС - оказывает повреждающее действие на ткани

• Способность образовывать цисты и L-формы в пораженных тканях (что способствует

«уходу»от защитных механизмов организма)

Белковые антигены – высокая иммуногенность, быстрая индукция антител

• Полисахаридные антигены – низкая иммуногенность

• Липидные антигены – сходны с компонентами мембран клеток организма человека (данное

явление используется в реакции Вассермана – постановка реакции с двумя антигенами:

кардиолипидным (неспецифическим) и собственно антигеном трепанемы)

 

Микроскопический метод: микроскопия отделяемого язвы или элементов сыпи

• Световая микроскопия (окраска по Романовскому)

• Темнопольная

• Фазово-контрастная

• Серебрение (по Морозову)

2. Бактериологический метод: не применяется из-за трудностей культивирования возбудителя

на искусственных питательных средах

3. Серологический метод:

• Реакция Вассермана (РСК) с двумя антигенами (кардиолипидным и

трепонемным);

• РНГА

• ИФА, ИФ (обнаружениеIgMи IgG)

• Осадочные пробы (экспресс-диагностика) на стекле – концентрированный

кардиолипидный антиген+сыворотка больного; при положительной реакции

(образование осадка) проводится полное исследование сыворотки (РСК,РНГА, ИФА и

тд.)

 

 

ИММУНИТЕТ ПРИ СИФИЛИСЕ

• Нестерильный

• Формы иммунитета: клеточный (ГЗТ) и гуморальный

• Основной защитный механизм – фагоцитоз

• Антитела появляются через 3-4 недели после заражения

ИММУНОПРОФЛАКТИКА СИФИЛИСА НЕ РАЗРАБОТАНА

5. Гонококки, их классификация, общая характеристика. Факторы патогенности, патогенез. Лабораторная диагностика острой и хронической гонореи, методы провокации. Бленорея новорожденных. Специфическая терапия и меры профилактики.

 

Гонококки

сем. Neisseriaceae

род Neisseria

вид: N. gonorrhoeae

Грамотрицательные диплококки

Микроаэрофилы – требуют 5 – 10% углекислого газа при культивировании

• Требовательны к питательным средам: в состав должны входить сыворотка или кровь

• На плотных средах дают мелкие прозрачные блестящие колонии

Пили – адгезия (к эпителию матки, маточных труб, кишечника, слизистой полости рта,

конъюнктиве)

• Капсула – антифагоцитарные и иммуногенные свойства

• Каталаза – антифагоцитарные свойства фагоцитоз при гонорее незавершенный (гонорея -

«болезнь фагоцитов»)

• Эндотоксин

 

 

Микроскопический метод: при острой гонорее - обнаруживаются гонококки внутри

фагоцитов!(см. рис.8)

при хронической гонорее – отсутствует данный признак!

• Бактериологический метод: наиболее достоверный, так как часто встречаются хронические

и латентные формы течения.

Для провокации (обострения)процесса с целью диагностики и лечения используется

гоновакцина (взвесь убитых гонококков)

• Иммунофлюоресценция: выявление гонококков в патологическом материале

• Генетический метод: ПЦР

Иммунные реакции не защищают от повторного заражения и от суперинфекции.

 

6. Хламидии, классификация. Характеристика биологических свойств, факторы патогенности, виды хламидий, формы существования и жизненный цикл. Заболевания, вызываемые хламидиями. Лабораторная диагностика.

 

Хламидии сем. Chlamidiaceae

род Chlamidia

виды: Ch. Psittaci

Ch. Trachomatis

Ch. pneumoniae

1. Мелкие кокковидные бактерии, по строению оболочки напоминают грамотрицательные

бактерии (см. рис.1)

2. Облигатные внутриклеточные паразиты: хламидии не способны синтезировать

высокоэнергетические соединения («энергетические паразиты»).

3. Способны к образованию L-форм

Культивирование на клеточных культурах (McCoy, L-929, куриные эмбрионы), так как

хламидии не могут расти на искусственных питательных средах

Аг клеточной поверхности, подавляющие защитные реакции организма

2. Эндотокины – ЛПС

3. Экзотоксины (в эксперименте в/в введение вызывает гибель мышей)

4. Поверхностные белки, способствующие адгезии

1. Поверхностный родоспецифический антиген (ЛПС)

2. Главный белок наружной мембраны – проявляет свойства поринов, включает родо-, видо-,

типо- и сероварспецифические детерминаты

3. Ch. trachomatis по антигенным свойствам делиться на 15 сероваров

Трахома (хронический хламидийный конъюнктивит

 

Хламидийная пневмония:

источник – человек

Орнитоз (пситтакоз) Cl.psittaci:

Культивирование на клеточных культурах (McCoy, L-929, куриные эмбрионы), так как

хламидии не могут расти на искусственных питательных средах

• Определение телец включений в окрашенных мазках (низкая чувствительность)

• Выявление Аг хламидий (иммунофлюоресценция (ИФ), иммунная хроматография (ИХГ),

иммуноферментный анализ (ИФА)

• ПЦР

• Серологический метод – выявление Ig M (мало информативен, так как хламидийная инфекция

протекает, преимущественно хронически)

Иммунитет гуморальный и клеточный

• Высокие титры антител выявляются при острых формах хламидийной инфекции: пневмониях

• Иммунные механизмы не защищают от повторного заражения и от суперинфекции

Иммунопрофилактика и иммунотерапия не разработаны

7. Микоплазмы, классификация, характеристика биологических свойств, факторы патогенности, патогенные для человека виды. Заболевания, вызываемые микоплазмами. Методы микробиологической диагностики.

Семейство – Mycoplasmataceae

род I Mycoplasma

5 видов, патогенных для человека:

M. pneumoniae,

M. hominis,

M. genitalium,

M. incognitus,

M. fermentas

Факультативные анаэробы

• Полиморфны (кокковидные, ветвящиеся, крупные многоядерные формы, псевдомицелий)-

обусловлено отсутствием ригидной клеточной стенки (пептидогликана) (см. рис.4)

• Размножение бинарным делением

• Способны к почкованию и сегментации

• Размер – 0.2 – 0.7 мкм

• Основной элемент клеточной мембраны –холестерин (утилизируют из тканей и питательных

сред)

Требовательны к питательным средам - в состав сред обязательно входят: нативная

сыворотка, холестерин, аминокислоты, углеводы, витамины, соли (триптический перевар

сердца крупного рогатого скота); для уреаплазмы – добавление мочевины

• Возможно выделение на куриных эмбрионах

• На средах содержащих кровь, некоторые виды дают α- и β-гемолиз

• На твердых средах микоплазмы образуют характерные мелкие колонии (0.2-1, 5 мм) типа

«яичницы глазуньи», появляющиеся на 5-7 сутки, уреаплазмы – могут не иметь характерной

картины «яичницы глазуньи» (см. рис.5,6)

• На жидких средах дают очень незначительное помутнение или опалесценцию

Адгезины – входят в состав поверхностных антигенов

• Экзотоксины – нейротоксин (мишень действия – астроциты)

• Эндотоксины – вызывают пирогенный эффект, лейкопению, тромбогеморрагические

поражения, коллапс и отёк легких (не тождественен эндотоксину грамотрицательных

бактерий)

• Гемолизин (некоторые виды)

• Ферменты агрессии:

фосфолипаза А, аминопептидазы – гидролизируют фосфолипиды клеточной стенки;

нейраминидаза – нарушение архитиктоники клеточных мембран и межклеточные

взаимодействия;

протеазы и эндопептидазы – дегрануляция клеток, расщепление АТ;

РНКазы, ДНКазы

Основные антигены представлены липидами, полисахаридами и белками

• Изменчива

• Антигенная мимикрия (вызывает выработку аутоантител)

I.микоплазменной инфекции:

а) Поражение МПС:

• уретриты

• простатиты

• цервициты

• воспалительные поражения тазовых органов • невынашивание беременности

• преждевременные роды

• внутриутробное заражение плода

б) Пневмонии

в) Поражения суставов

г) Поражения центральной и периферической нервной системы

II. уреаплазменной инфекции

Поражение МПС

Бактериологический метод – сроки появления колоний 5 - 7 суток. с последующей

идентификацией по биохимическим свойствам

2. Иммунофлюоресценция(выявление возбудителя в патологическом материале,

идентификация при росте на питательных средах) и ИФА (выявление возбудителя в

патологическом материале; обнаружение IgM и IgG)

3. Серологический метод:РСК (парные сыворотки)

4. Генетический метод: гибридизация ДНК, ПЦР

 

8. Внутрибольничные и госпитальные инфекции. Причины и условия возникновения госпитальных инфекций. Этиология и патогенез. Характеристика госпитальных штаммов. Эпидемиология. Методы диагностики, методы эпидемиологического анализа госпитальных инфекций.

Внутрибольничные инфекции: Любое, клинически распознаваемое инфекционное заболевание, поражающее больного в результате госпитализации или посещения лечебного учреждения с целью лечения, а также персонал, независимо от того, проявлялось ли оно при нахождении в стационаре.

Практическое значение внутрибольничных инфекций:

1. Удлинение сроков лечения

2. Увеличение доли инвалидизации

3. Рост смертности

4. Экономический ущерб: оплата больничных листов, оплата инвалидности, оплата лечебных процедур и лекарственных средств и пр.

Причины и условия возникновения ВБИ:

1. Нарушение правил асептики или недостаточность асептических мероприятий:

а) неграмотность, небрежность, нехватка медицинского персонала;

б) старые помещения, старое оборудование

в) неадекватные методы стерилизации сложного медицинского оборудования

г) вентиляция

2. Высокая вероятность контакта больных и персонала: скученность пациентов, нехватка

персонала

3. Массовая госпитализация: до 25% населения госпитализируется 1 раз в год

4. Инвазивные методы обследования и лечения: создание искусственных «входных ворот»;

до 30% манипуляций не обоснована

5. Снижение резистентности организма пациентов

6.Циркуляция госпитальных штаммов: высоковирулентных и полирезистентных

Условия селекции:

а) снижение резистентности организма

б) нерациональная антибиотикотерапия; использование антисептиков, дезинфектантов

Основа селекции:

а) гетерогенность микробной популяции

б) R-плазмиды

Источники ВБИ

1. Больные

2. Медицинский персонал

3. Внешняя среда стационара (лечебно-диагностического учреждения)

4. Посетители

Механизмы и пути распространения ВБИ

1. Аэрогенный: воздушно-капельный, воздушно-пылевой

2. Фекально-оральный: водный, пищевой, контактно-бытовой

3. Контактный: непосредственный контакт

4. Артифициальный (искусственный) – в основе его лежит преодоление микроорганизмами

естественных защитных барьеров:

• Контактно-инструментальный

• Инъекционный, инфузионный

• Трансфузионный

• Имплантационный

• Посткатетеризационный

• Ингаляционный

Этиология ВБИ:

Все известные инфекционные агенты: бактерии, вирусы

*** респираторные (грипп, ветрянка и пр.)

*** кишечные (особенно у детей младшего возраста)

Условно-патогенные микроорганизмы: представители нормальной микрофлоры

 

Госпитальные инфекции: Входят в структуру ВБИ

Этиология: условно-патогенные микроорганизмы – высоковирулентные и полирезистентные

(энтеробактерии, НГОБы, стафило- и стрептококки, дифтероиды и облигатные анаэробы)

Эпидемиология: чаще всего механизм распространения – артифициальный

Клинические проявления госпитальных инфекций

• гнойно-септические (гнойно-воспалительные) процессы (85%)

• диареи, особенно в детских стационарах

• пневмонии • мочевая инфекция

• сепсис

Принципы диагностики госпитальных инфекций:

I. Факт госпитальной инфекции: наличие не менее 3 пациентов в очаге

II. Выделение и идентификация возбудителя

III. Выявление источников инфекции:

1) обследование персонала; обследование объектов среды стационара, инструментов

2) фаготипирование, бактерцинотипирование

IV. Выявление маркеров госпитализма: резистентности к антибиотикам (выявление бета-

лактамаз); плазмидный профиль, ДНК- гомология

Принципы профилактики госпитальных инфекций

• Рациональная антибиотикотерапия

• Мониторинг резистентной микрофлоры в лечебном учреждении

• Целесообразность инвазивных манипуляций

• Строгое соблюдение правил асептики

• Санация носителей (сотрудников и пациентов перед операцией)

• Вакцинация пациентов перед плановыми операциями

 

9. Внутриутробные инфекции, их этиология. Источники и пути инфицирования плода. Поражения плода на разных стадиях его внутриутробного развития (гаметопатия, фетопатия ранняя и поздняя). Методы диагностики. Меры профилактики внутриутробных инфекций.

· Внутриутробные инфекции (ВУИ) — это различные инфекционные заболевания эмбриона, плода и новорождённого, заражение которыми происходит внутриутробно и в процессе родов Группа ВУИ, вызываемая вирусами: краснуха, ЦМВ, герпесвирусы, вирусный гепатит и др.

· Заболевания, вызываемые бактериями: сифилис, листериоз, туберкулёз, ЗППП

· Паразитарные инфекции: токсоплазмоз

· Грибковые инфекции, в том числе ятрогенного генеза

· Микст-инфекции (сочетанные).

Источником инфекции является мать. Но так же есть и ятрогенные причины инфицирования во время медицинских манипуляций.

· Трансплацентарный (гематогенный) путь — от матери к плоду через плаценту. Чаще передаются вирусные ВУИ, так как вирус легко проникает через гемато-плацентарный барьер (как и токсоплазма).

· Восходящий — когда инфекция из половых путей попадает в полость матки и затем может инфицировать плод. Чаще это бактериальные инфекции, ЗППП, хламидиоз, грибы, микоплазмы, энтерококки.

· Нисходящий путь — из маточных труб в полость матки

· Контактный (интранатальный) путь — заражение во время прохождения через родовые пути.

Гаметопатии — поражение гамет родителей

Различают ранние фетопатии (возникают в раннем фетальном периоде эмбриогенеза — до 28-недельного срока беременности) и поздние фетопатии (после 28 недель беременности и до начала родов).

Прямые методы

Прямые методы исследования направлены на выявление возбудителя или его антигена в организме больного ребёнка.

· Микроскопический (бактериоскопический) метод.

· Культуральный метод (посев биологических жидкостей и выделений больного на специальные среды) наиболее точен, но его редко используют из-за дороговизны и длительности исследования (от 3 до 20 дней).

· Молекулярно-биологический метод. Наибольшее распространение получила полимеразная цепная реакция (ПЦР), позволяющая обнаружить минимальное количество ДНК возбудителя. Результаты оценивают в сопоставлении с данными других лабораторных методов и клиническими проявлениями. Для решения вопроса об активности процесса и эффективности лечения используют сочетание ПЦР и серологического метода, а также параллельно исследуют сыворотку крови ребёнка и матери в динамике (нарастание титра антител при методе парных сывороток).

· С помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и реакции иммунофлюоресценции (РИФ) выявляют специфические антигены.