Переливание компонентов крови

Переливание компонентов крови

Определение группы крови, Rh-фактора,

Совместимость крови, 9-капельная проба

Определение группы крови по системе АВО

Методика взятия крови.

Обычно кровь берут специальными одноразовыми копьями или иглами, нанося колотую рану в область подушечки ногтевой фаланги IV пальца левой кисти. У детей можно брать кровь из мочки уха, а у грудных детей – из пятки. Выступающая из ранки капля крови снимается чистым предметным стеклом или стеклянной палочкой и наносится на плоскость, на которой определяется группа крови. Взятие крови для определения группы возможно также при венепункции.

В настоящее время используют три способа определения группы крови по системе АВО:

1. с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток;

2. с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов (перёкрестный метод);

3. с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и

анти-В).

При плановом исследовании группу крови определяют в стационаре с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток или цоликлонов. Затем кровь направляется в серологическую лабораторию для перепроверки группы крови перекрёстным методом. Данные о группе крови, полученные в лаборатории должны совпадать с данными, полученными врачом в стационаре. Если результаты исследований не совпадают, оба исследования нужно повторить.

При определении группы крови в экстренном порядке дежурный врач определяет группу крови сам, а перепроверку выполняют в лаборатории на следующий день.

Определение групп крови с помощью стандартных

Изогемагглютинирующих сывороток

1. Маркировка белого планшета с обозначением сывороток O(I), A(II), B(III) и AB(IY) групп и фамилии пациента. После этого на неё под соответствующие обозначения наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки в объеме 0,1 мл (капля около 1 см в диаметре) по две серии каждой из групп.

2. Исследуемую кровь забирают уголком предметного стекла или стеклянной палочкой, переносят в каждую каплю сыворотки и перемешивают. При этом количество крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки.

3. Тарелку периодически покачивают и наблюдают за агглютинацией в течение 5 мин.

4. Добавляют по одной капле физиологического раствора в те капли, где произошла агглютинация, размешивают и оценивают результат реакции.

При положительной реакции появляются мелкие красные зернышки (агглютинаты), состоящие из склеенных эритроцитов. При этом сыворотка обесцвечивается. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, в ней нет агглютинатов.

Оценку результатов проводят по наличию или отсутствию агглютинации с соответствующими сыворотками (таб 1).

 

Таб. 1. Оценка результатов определения группы крови со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками

При агглютинации с сыворотками всех трех групп, для исключения неспецифической агглютинации (панагглютинации) необходимо провести дополнительное контрольное исследование крови со стандартной сывороткой группы AB(IY), не содержащей агглютининов. При отсутствии агглютинации в этой капле и при наличии агглютинации со стандартными сыворотками групп O(I), A(II), B(III) кровь можно отнести к группе AB(IY).

Если исследуемая кровь содержит слабый агглютиноген А₂, то реакция агглютинации с сыворотками групп O(I) и B(III) наступает позже (на 3-4 мин). Чтобы избежать ошибки, оценивать группу крови необходимо через 5 мин.

Реакция агглютинации на плоскости с помощью

Цоликлонов анти-D супер.

Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет. Наносят рядом маленькую каплю (0,02-0,03 мл) исследуемых эритроцитов. Тщательно смешивают реагент с эритроцитами стеклянной палочкой.

Через 10 - 20 с мягко покачивают пластинку. Несмотря на то, что четкая агглютинация наступает в первые 30 с, результаты реакции учитывают через 3 мин после смешивания.

При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус положительная, при отсутствии - как резус отрицательная.

Метод конглютинации с 10% желатином.

Используют реагенты, содержащие неполные поликлональные антитела (сыворотки анти-D) или неполные моноклональные антитела (цоликлоны анти-D).

В 2 пробирки вносят по 0,02 - 0,03 мл осадка эритроцитов, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки. Затем в первую пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) реагента, во вторую (контрольную) пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) физиологического раствора.

Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают в водяную баню на 15 мин или термостат на 30 мин при температуре +46 - 48°С. По истечении указанного времени в пробирки добавляют по 5 - 8 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 1 - 2-кратного переворачивания пробирок.

Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что исследуемый образец крови резус положительный, отсутствие агглютинации - о том, что испытуемая кровь резус отрицательная. В контрольной пробирке агглютинация эритроцитов должна отсутствовать.

Гемотрансфузии

Врач, проводящий трансфузию компонентов крови, обязан, независимо от произведенных ранее исследований и имеющихся записей, лично провести следующие контрольные исследования у постели больного (реципиента):

Ø перепроверка группы крови реципиента по системе АВО и резус-фактору, сверка полученного результата с данными в истории болезни;

Ø перепроверка группы крови донорского контейнера по системе АВО и резус-фактору и сопоставление результатов с данными на этикетке контейнера;

Ø сравнение группы крови и резус – принадлежности, обозначенных на контейнере, с результатами исследования, ранее внесенными в историю болезни и только, что полученными;

Ø проведение пробы на индивидуальную совместимость по системе АВО и резус - фактору эритроцитов донора и сыворотки реципиента;

Ø уточнение у реципиента фамилии, имя, отчества, года рождения и сверка их с указанными на титульном листе истории болезни. Данные должны совпадать и реципиент должен их по возможности подтвердить (за исключением случаев, когда переливание проводиться под наркозом или пациент находится в бессознательном состоянии).

Девятикапельная проба

Девятикапельная проба, предложенная ивановским профессором П.М. Максимовым, выполняется непосредственно перед гемотрансфузией. Она позволяет на одной плоскости одним лицом одновременно провести практически все реакции, дающие право для проведения гемотрансфузии.

Проба выполняется на одной плоскости, разделенной на девять полей (таб.4).

Таб. 4. Девятикапельная проба

В первых трех (1-3) квадратах определяется группа крови донора двумя сериями стандартных сывороток. Во вторых трех (4-6) квадратах определяется группа крови реципиента двумя сериями стандартных сывороток. В 7-8 квадратах проводится проба на индивидуальную совместимость (сыворотка крови реципиента и эритроциты донора). В 8 квадрат добавляется физиологический раствор с целью исключения неспецифической агглютинации. В 9 квадрате сыворотка реципиента смешивается с заведомо несовместимой кровью. Это позволяет оценить агглютинирующую способность сыворотки реципиента.

Оценивается проба по трем параметрам:

группа крови донора и реципиента должны совпадать;

в 7 и 8 каплях не должно быть агглютинации;

в 9 капле должна быть агглютинация (исключение реципиент AB (IV)).

Планшет с пробой сохраняется до конца переливания, как свидетельство правильно выполненной и достоверной изосерологической реакции.

 

 

Переливание компонентов крови