Глава II. Частная микробиология и вирусология.

Возбудители бруцеллеза. Виды и биовары бруцелл. Лабораторный диагноз. Эпидемиология, профилактика, терапия.

Бруцеллы — факультативные внутриклеточные паразиты.

Таксономия: отдел Gracilicutes, семейство Brucellaceae, род Brucella, виды Br.melitensis, Br.abortus, Br.suis

Представлены неподвижными мелкими (0,5-0,7x0,6-1,5 мкм) палочками или коккобациллами. Бруцеллы названы в честь английского бактериолога Д.Брюса, выделившего бактерии из организма погибшего человека (В. melitensis) в 1887 г. Позднее было установлено, что патогенными для человека свойствами обладают также В. abortus (палочка Банга), В. suis, B. canis и их биовары. У чувствительных животных и человека вызывают бруцеллёз. У животных заболевание проявляется инфекционными абортами, у человека — длительно протекающими инфекционными поражениями опорно-двигательной системы, нервной и половой системы.

Свойства возбудителя

Морфологические и культуральные свойства

Бруцеллы отличаются выраженным полиморфизмом: в одном препарате (особенно в молодых культурах) наблюдают кокки и удлинённые палочки. Клетки бруцелл В. melitensis чаще представлены кокковидными формами, В. abortus и В. suis — палочками с закруглёнными концами; бруцеллы в мазках располагаются беспорядочно, нередко в виде скоплений. Бруцеллы легко окрашиваются анилиновыми красителями. Хемоорганотрофы, каталаза- и оксидаза-положительны (кроме В. ovis и В neotomae). Бруцеллы — строгие аэробы. Температурный оптимум 37 °С; оптимальный рН 6,6-7,4. Они требовательны к питательным средам. Посевы обычно проводят на 5% КА (с кровью барана) или печёночный агар Хаддльсона. На твёрдых средах бруцеллы образуют мелкие выпуклые гладкие мутноватые, с перламутровым оттенком S-колонии. В процессе диссоциации они формируют шероховатые R-колонии. В жидких средах бруцеллы дают равномерное помутнение.

Биохимические свойства

Ферментируют глюкозу и арабинозу с образованием, кислоты. Бруцеллы восстанавливают нитраты; цитрат не утилизируют; индол не образуют; реакции с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательные, образуют сероводород.

Антигены бруцелл.

У бруцелл определяют до 15 антигенных фракций; выделяют родовой антиген и видовые поверхностные М- (доминируют у В. melitensis), А- (преобладают у В. abortus и В. suis) и R- (у шероховатых форм) антигены. Для идентификации антигенов бруцелл применяют соответствующие антисыворотки. Третий поверхностный антиген — термолабильный L-Ar, имеющий сходство с Vi-Ar сальмонелл.

Эпидемиология. Бруцеллёз — зоонозная инфекция. Резервуар и источник инфекции — домашние животные (овцы, козы, коровы, свиньи, реже собаки). Человек — вторичный хозяин; заболевания людей (исключая случаи лабораторного заражения) возникают на фоне эпизоотии. От животного к животным и человеку бруцеллы передаются через заражённые фекалии, мочу, молоко и мясо. В. abortus чаще вызывает бруцеллёз крупного рогатого скота (болезнь Банга), В. melitensis — коз и овец (иногда кур), В. suis — свиней. Возбудитель бруцеллеза внедряется в организм человека через повреждённую кожу, слизистую оболочку дыхательных путей и ЖКТ, конъюнктиву. Контактный путь заражения более характерен для овечьего и свиного бруцеллёза. Бруцеллы устойчивы во внешней среде. При 10-13 °С они сохраняются в воде и влажной почве до 5 мес, в молоке — до 9 мес, в сыре — до года. При 70 °С бруцеллы погибают в течение 10 мин, при кипячении— практически мгновенно. Бактерии чувствительны к дезинфектантам.

Патогенез поражений. Из первоначальных ворот распространяются по лимфотоку, депонируются в лимфоузлах. В первые 5-10 сут бруцеллы размножаются в макрофагах регионарных лимфатических узлов (миндалины, заглоточные, подчелюстные, язычные, шейные узлы, лимфоидная ткань подвздошно-слепокишечного отдела кишечника), переживают внутри фагоцитов, выделяя низкомолекулярные факторы, ингибирующие слияние фагосом с лизосомами. Внутри фагоцитов могут формировать в L-формы и длительно персистировать, что приводит к появлению гранулём. Обратный переход в исходные формы обусловливает рецидив болезни. Из разрушенных макрофагов бруцеллы попадают в кровоток и диссеминируют в печень, селезёнку, почки, костный мозг и эндокард. В поражённых органах находят очаги некроза, окружённые инфильтратами. В дальнейшем бактерии могут попадать в молочные железы человека и появиться в грудном молоке. Инфицирование плаценты и тканей плода животных приводит к абортам, однако при бруцеллёзе беременных женщин спонтанные аборты регистрируют не чаще, чем у здоровых. Такое различие обусловлено наличием в плаценте животных ускоряющего рост бруцелл эритритола.

Клинические проявления. Продолжительность инкубационного периода бруцеллеза 1-6 нед. Выделяют пять клинических форм бруцеллёза: первично-латентную, остросептическую, первично-хроническую метастатическую, вторично-хроническую метастатическую и вторично-латентную. Среди поражений бруцеллеза доминируют нарушения функций опорно-двигательного аппарата, нервной и половой систем. Наиболее характерны полиартриты, полиневриты, орхиты и эпидидимиты. При аэрогенном заражении часто развиваются вялотекущие пневмонии. Практически все формы сопровождаются генерализованной лимфаденопатией, увеличением печени и селезёнки.

Диагностика бруцеллеза. Включает бактериологические, серологические и аллергологические методы. Материал для исследований: кровь, моча, грудное молоко, аспираты костного мозга и биопсийный материал печени. Принимая во внимание системный характер поражений при бруцеллезе, в первую очередь исследуют кровь. Образцы культивируют в МПБ при 37 °С. При проведении исследования засевают два флакона и в одном создают повышенную концентрацию С02. Через 4-5 сут в этом флаконе наблюдают рост бруцелл; среда может оставаться слегка мутной или прозрачной. После пересева на твёрдые среды отмечают характерный рост колоний, из которых отсеивают чистые культуры с последующей идентификацией видовых свойств. При сильном загрязнении материала им заражают морских свинок и от них выделяют чистую культуру. • Поскольку биохимические и культуральные свойства бруцеллеза варьируют внутри одного вида, то у В. melitensls выделяют 3 биовара, у В. abortus — 9, а у Я suis — 5. Для их диффереицировки используют потребность первых генераций в С02, способность к образованию H2S, чувствительность к бактерицидному действию красителей основного фуксина и тионина, фаголиза-бельность, а также агглютинабельность моноспецифическими антисыворотками. • Для выявления Аг бруцелл применяют РПГА с эритроцит арным диагностикумом с AT к родовому Аг, а также реакцию агрегат-агглютинации, РП и ИФА. • Для выявления AT к бруцеллам в сыворотке крови применяют РА Райта, реакцию Кумбса (на неполные AT), РНИФ, РПГА, РСК, ИФА и др. Для быстрого обнаружения AT применяют реакцию агглютинации Хаддльсона на стекле, латекс-агглютинации, тест с бенгальским розовым и др. • При отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований ставят кожные аллергические пробы (проба Бюрне), обычно положительные у 70-85% пациентов к концу 1 мес заболевания. Аллергеном служит бруцеллин — белковый экстракт культуры. Реакция положительна и у вакцинированных лиц. Для выявления возбудителя бруцеллеза в молоке широко применяется кольцевая проба Банга.

Лечение бруцеллеза. Препараты выбора при лечении бруцеллеза — тетрациклины и аминогликозиды (стрептомицин); в тяжёлых и упорных случаях назначают рифампицин.

Профилактика.

Неспецифическая: соблюдение правил личной гигиены и режима обработки сельскохозяйственной продукции.

Специфическая: В эндемичных очагах козье-овечьего бруцеллёза применяют живую вакцину из штамма В. abortus. Проводят однократную накожную иммунизацию. При отрицательной кожной пробе и отсутствии выработки AT проводят ревакцинацию. Вакцина против бруцеллеза реактогенна. Также предложена химическая вакцина из Аг клеточной стенки. Все доступные вакцины против бруцеллеза не обеспечивают 100% защитного эффекта. Способность взвеси убитых бруцелл (лечебная вакцина) или ХБВ стимулировать клеточные иммунные реакции используют при лечении хронических поражений.